3.2.3.1 Tỷ lệ khuếch đại genMYCN theo trạng thái biệt hóa
Kết quả khi so sánh các bệnh nhân có khuếch đại gen MYCN với kết quả giải phẫu bệnh về trạng thái biệt hóa tế bào u của các bệnh nhân đƣợc thể hiện ở Error! Reference source not found. và Hình 3.7.
Bảng 3.5. Phân bố khuếch đại gen MYCN theo trạng thái biệt hóa tế bào u NBTK
Trạng thái biệt hóa Số lƣợng Tỷ lệ
Chƣa biệt hóa 1 9%
Ít biệt hóa 9 82%
Đang biệt hóa 1 9%
35
Bảng 3.6. Phân bố không khuếch đại gen MYCN theo trạng thái biệt hóa tế bào u NBTK
Trạng thái biệt hóa Số lƣợng Tỷ lệ
Chƣa biệt hóa 4 8%
Ít biệt hóa 40 83%
Đang biệt hóa 4 8%
Hình 3.10. Tỷ lệ không khuếch đại gen MYCN theo trạng thái biệt hóa tế bào u
Nhận xét: Số lƣợng bệnh nhân phát hiện khuếch đại gen MYCN cao nhất khi tế bào u ở trạng thái ít biệt hóa: 9 bệnh nhân (82%),tế bào ở trạng thái đang biệt hóa và chƣa biệt hóa tỷ lệ khuếch đại thấp nhất: 1 bệnh nhân (9%)
Trong quá trình phát triển bình thƣờng của tế bào thần kinh các nguyên bào thần kinh trải qua quá trình biệt hóa để hình thành nên các tế bào thần kinh trƣ ởng thành.Khi một nguyên bào thần kinh bị đột biến và tăng sinh không kiểm soát sẽ hình thành nên u NBTK,các tế bào này lại tiếp tục biệt hóa và phát triển, căn cứ vào số lƣợng các tế bào biệt hóa trong khối u ngƣời ta chia khối u NBTK thành 3 nhóm nhỏ:chƣa biệt hóa, ít biệt hóa và đang biệt hóa. Trong 3 nhóm này nhóm u NBTK ít biệt hóa chiếm tỷ lệ nhiều nhất khoảng 65%-75%.
Theo mô hình di truyền (Hình 1.4) của bệnh u NBTK các tế bào đã biệt hóa thƣờng chỉ có thay đổi về số lƣợng NST nên khả năng gặp khuếch đại gen MYCN ở
36
nhóm đang biệt hóa là thấp.Còn các tế bào u NBTK không biệt hóa sẽ có các biến đổi về cấu trúc NST cũng nhƣ khuếch đại gen MYCN.Các tế bào này sẽ tập trung ở nhóm u NBTK chƣa biệt hóa và ít biệt hóa.Giữa 2 nhóm này, nhóm ít biệt hóa chiếm đa số hơn 90%.Do vậy, dù khả năng khuếch đại gen MYCN ở các tế bào là tƣơng đƣơng
nhau nhƣng tỷ lệ phát hiện bất thƣờng này ở các bệnh nhân có khối u NBTK ít biệt hóa là cao hơn đáng kể.
Kết quả phát hiện khuếch đại MYCN ở 3 nhóm khác nhau trong u NBTK trong nghiên cứu này là phù hợp với kết quả của George và cộng sự năm 2001 [18].
3.2.3.2 Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN theo phân loại mô bệnh học
Kết quả khi so sánh các bệnh nhân có khuếch đại gen MYCN với phân loại giải phẫu bệnh của các bệnh nhân
Bảng 3.7. Phân bố khuếch đại gen MYCN theo phân loại mô bệnh học
Tiên lƣợng MBH Số lƣợng Tỷ lệ
Thuận lợi 4 36%
Không thuận lợi 7 64%
37
Bảng 3.8. Phân bố khôngkhuếch đại gen MYCN theo phân loại mô bệnh học
Tiên lƣợng MBH Số lƣợng Tỷ lệ
Thuận lợi 28 58%
Không thuân lợi 20 42%
Hình 3.12. Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN theo tiên lượng MBH
Nhận xét: Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN ở các bệnh nhân có tiên lƣợng MBH
không thuận lợi (64%) cao hơn so với các bệnh nhân có tiên lƣợng MBH thuận lợi (36%).
Khuếch đại gen MYCN là một dấu ấn di truyền của các bệnh nhân u NBTK nguy cơ cao với các đặc điểm sinh học không thuận lợi nhƣ: tuổi chẩn đoán trên 18 tháng,giai đoạn muộn… MBH không thuận lợi là một trong những dấu ấn về mặt giải phẫu của một khối u ác tính cao.Do vậy tỷ lệ phát hiện khuếch đại gen MYCN trên các bệnh nhân MBH không thuận lợi rõ ràng cao hơn so với các bệnh nhân MBH không thuận lợi.
Theo các kết quả thu thập đƣợc, tỷ lệ khuếch đại gen của các bệnh nhân trong nhóm MBH không thuận lợi là 64% cao hơn đáng kể so với tỷ lệ khuếch đại gen
MYCN trong nhóm còn lại.Sự phân bố này là phù hợp với nghiên cứu năm 2001 của
George và cộng sự [18].Điều này một lần nữa chứng minh đƣợc ý nghĩa tiên lƣợng xấu của khuếch đại gen MYCN.
38
Ngoài ra một điểm đúng là, 1/3 trong số bệnh nhân MBH thuận lợi có khuếch đại gen MYCN. Điều này có nghĩa là, kết quả phân loại bệnh nhân chỉ theo kết quả
MBH đôi khi là không đủ độ chính xác, dẫn đến kết quả điều trị thành công không cao.
39
4 KẾT LUẬN
Từ các kết quả nghiên cứu trên, tôi có một số kết luận nhƣ sau:
1) 59 bệnh nhân mắc u NBTK,phát hiện 11 trƣờng hợp có khuếch đại gen
MYCN, chiếm tỷ lệ 19% và 48 trƣờng hợp không có khuếch đại gen (81%). Hai dạng
khuếch đại gen MYCNđã đƣợc xác định gồm dạng chứa các đoạn chất nhiễm sắc
vòng, ngắn, nằm ngoài bộ NST và dạng bắt màu đồng nhất trên 1 vùng của bộ NST. 2) Nhóm tuổi chẩn đoán có số lƣợng bệnh nhân khuếch đại gen cao nhất là nhóm trên 18 tháng (7/11 bệnh nhân). Nhƣ vậy, nhóm tuổi lớn hơn 18 tháng là nhóm tuổi cần phải đánh giá trạng thái khuếch đại gen MYCN trên tất cả các bệnh nhân.
3) Tỷ lệ giới tính của nhóm bệnh nhân có khuếch đại gen MYCN là 5 trẻ trai : 6 trẻ gái. Nhƣ vậy, sự khuếch đại gen không phụ thuộc vào giới tính.
4) Tỷ lệ khuếch đại gen MYCN cao nhất nằm ở nhóm u NBTK ít biệt hóa
(9/11 bệnh nhân). Điều này cho thấy, các tế bào chƣa biệt hóa có ƣu thế xuất hiện các biến đổi di truyền cao hơn so với các tế bào đã biệt hóa.
5) Nhóm tiên lƣợng xấu dựa theo sự phân loại này là nhóm mô bệnh học không thuận lợi. Tỷ lệ khuếch đại genđƣợc phát hiện ở nhóm tiên lƣợng xấu theo mô bệnh học có khuếch đại gen (7/11 bệnh nhân) cao hơn so với nhóm mô bệnh học thuận lợi.
40
5 KIẾN NGHỊ
Trong khuôn khổ nghiên cứu này, chúng tôi đƣa ra 2 kiến nghị nhƣ sau:
1) Nghiên cứu đánh giá tỷ lệ khuếch đại gen MYCN trên các bệnh nhân nhi
với kích thƣớc mẫu lớn hơn.
2) Tiếp tục nghiên cứu các biến đổi di truyền khác cũng có giá trị tiên lƣợng trên các bệnh nhân u nguyên bào thần kinh nhằm hỗ trợ chẩn đoán và điều trị.
41
6 TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt
1. Phùng Tuyết Lan (2007), Nghiên cứu một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng
và điều trị u nguyên bào thần kinh ở trẻ em, Luận án tiến sĩ, Đại học Y Hà Nội,
Hà Nội.
2. Vũ Đình Quang, Nguyễn Xuân Huy, Nguyễn Thị Phƣơng Mai, Phùng Tuyết Lan, Trần Đức Hậu, Trần Ngọc Sơn, Hoàng Ngọc Thạch, Bùi Khắc Hiếu, Ngô Diễm Ngọc và Nguyễn Thanh Liêm (2013), "Đánh giá sự khuếch đại gen NMYC trên bệnh nhân u nguyên bào thần kinh", Tạp chí Nhi khoa 6(1), 67-72. 3. Vũ Đình Quang, Nguyễn Thị Hồng Vân, Phùng Tuyết Lan, Trần Ngọc Sơn, Lê
Đình Công, Hoàng Ngọc Thạch, Trần Thị Chi Mai, Nguyễn Xuân Huy, Ngô Diễm Ngọc và Nguyễn Thanh Liêm (2015), "Nghiên cứu mối quan hệ giữa trạng thái gen MYCN với một số yếu tố tiên lƣợng khác trên 41 bệnh nhân u nguyên bào thần kinh", Tạp chi Khoa học: Khoa học Tự nhiên và Công nghệ
31(4S), 288-293.
Tiếng Anh
4. Attiyeh E. F., London W. B., Mosse Y. P., Wang Q., Winter C., Khazi D., McGrady P. W., Seeger R. C., Look A. T., Shimada H., Brodeur G. M., Cohn S. L., Matthay K. K. and Maris J. M. (2005), "Chromosome 1p and 11q deletions and outcome in neuroblastoma", N Engl J Med 353(21), 2243-53. 5. Bauchinger S., Lackner H., Schwinger W., Sovinz P., Benesch M., Sorantin E.,
Till H. and Urban C. (2014), "Primary renal neuroblastoma metastasizing into liver and lungs with tumor thrombus extension into the right atrium", Klin Padiatr 226(6-7), 369-71.
6. Beierle E. A., Trujillo A., Nagaram A., Kurenova E. V., Finch R., Ma X., Vella J., Cance W. G. and Golubovskaya V. M. (2007), "N-MYC regulates focal adhesion kinase expression in human neuroblastoma", J Biol Chem 282(17),
12503-16.
7. Bordbar M., Tasbihi M., Kamfiroozi R. and Haghpanah S. (2014), "Epidemiological and clinical characteristics of neuroblastoma in southern iran", Iran J Ped Hematol Oncol 4(3), 89-96.
8. Bown N. (2001), "Neuroblastoma tumour genetics: clinical and biological aspects", J Clin Pathol 54(12), 897-910.
9. Breslow N. and McCann B. (1971), "Statistical estimation of prognosis for children with neuroblastoma", Cancer Res 31(12), 2098-103.
10. Brodeur G. M. (2003), "Neuroblastoma: biological insights into a clinical enigma", Nat Rev Cancer 3(3), 203-16.
11. Canete A., Gerrard M., Rubie H., Castel V., Di Cataldo A., Munzer C., Ladenstein R., Brichard B., Bermudez J. D., Couturier J., de Bernardi B., Pearson A. J. and Michon J. (2009), "Poor survival for infants with MYCN- amplified metastatic neuroblastoma despite intensified treatment: the
42
International Society of Paediatric Oncology European Neuroblastoma Experience", J Clin Oncol 27(7), 1014-9.
12. Caren H., Erichsen J., Olsson L., Enerback C., Sjoberg R. M., Abrahamsson J., Kogner P. and Martinsson T. (2008), "High-resolution array copy number analyses for detection of deletion, gain, amplification and copy-neutral LOH in primary neuroblastoma tumors: four cases of homozygous deletions of the CDKN2A gene", BMC Genomics 9(353.
13. Caren H., Kryh H., Nethander M., Sjoberg R. M., Trager C., Nilsson S., Abrahamsson J., Kogner P. and Martinsson T. (2010), "High-risk neuroblastoma tumors with 11q-deletion display a poor prognostic, chromosome instability phenotype with later onset", Proc Natl Acad Sci U S A 107(9), 4323-8.
14. Cohn S. L., Pearson A. D., London W. B., Monclair T., Ambros P. F., Brodeur G. M., Faldum A., Hero B., Iehara T., Machin D., Mosseri V., Simon T., Garaventa A., Castel V. and Matthay K. K. (2009), "The International Neuroblastoma Risk Group (INRG) classification system: an INRG Task Force report", J Clin Oncol 27(2), 289-97.
15. Esiashvili N., Goodman M., Ward K., Marcus R. B., Jr. and Johnstone P. A. (2007), "Neuroblastoma in adults: Incidence and survival analysis based on SEER data", Pediatr Blood Cancer 49(1), 41-6.
16. Evans A. E. and D'Angio G. J. (2005), "Age at diagnosis and prognosis in children with neuroblastoma", J Clin Oncol 23(27), 6443-4.
17. Farber S., D'Angio G., Evans A. and Mitus A. (1960), "Clinical studies on actinomycin D with special reference to Wilms' tumor in children", Ann N Y Acad Sci 89(421-5.
18. George R. E., Variend S., Cullinane C., Cotterill S. J., McGuckin A. G., Ellershaw C., Lunec J. and Pearson A. D. (2001), "Relationship between histopathological features, MYCN amplification, and prognosis: a UKCCSG study. United Kingdom Children Cancer Study Group", Med Pediatr Oncol
36(1), 169-76.
19. George R. E., Attiyeh E. F., Li S., Moreau L. A., Neuberg D., Li C., Fox E. A., Meyerson M., Diller L., Fortina P., Look A. T. and Maris J. M. (2007), "Genome-wide analysis of neuroblastomas using high-density single nucleotide polymorphism arrays", PLoS One 2(2), e255.
20. Gostissa M., Ranganath S., Bianco J. M. and Alt F. W. (2009), "Chromosomal location targets different MYC family gene members for oncogenic translocations", Proc Natl Acad Sci U S A 106(7), 2265-70.
21. Goto S., Umehara S., Gerbing R. B., Stram D. O., Brodeur G. M., Seeger R. C., Lukens J. N., Matthay K. K. and Shimada H. (2001), "Histopathology (International Neuroblastoma Pathology Classification) and MYCN status in patients with peripheral neuroblastic tumors: a report from the Children's Cancer Group", Cancer 92(10), 2699-708.
22. Hallett R. M., Seong A. B., Kaplan D. R. and Irwin M. S. (2016), "Transcript signatures that predict outcome and identify targetable pathways in MYCN- amplified neuroblastoma", Mol Oncol 10(9), 1461-1472.
43
23. Hansford L. M., Thomas W. D., Keating J. M., Burkhart C. A., Peaston A. E., Norris M. D., Haber M., Armati P. J., Weiss W. A. and Marshall G. M. (2004), "Mechanisms of embryonal tumor initiation: distinct roles for MycN expression and MYCN amplification", Proc Natl Acad Sci U S A 101(34),
12664-9.
24. Horvilleur E., Bauer M., Goldschneider D., Mergui X., de la Motte A., Benard J., Douc-Rasy S. and Cappellen D. (2008), "p73alpha isoforms drive opposite transcriptional and post-transcriptional regulation of MYCN expression in neuroblastoma cells", Nucleic Acids Res 36(13), 4222-32.
25. Maris J. M. and Matthay K. K. (1999), "Molecular biology of neuroblastoma",
J Clin Oncol 17(7), 2264-79.
26. Maris J. M. (2010), "Recent advances in neuroblastoma", N Engl J Med
362(23), 2202-11.
27. Matsui A., Ihara T., Suda H., Mikami H. and Semba K. (2013), "Gene amplification: mechanisms and involvement in cancer", Biomol Concepts 4(6), 567-82.
28. McCarville M. B. (2011), "Imaging neuroblastoma: what the radiologist needs to know", Cancer Imaging 11 Spec No A(S44-7.
29. Morandi F., Croce M., Cangemi G., Barco S., Rigo V., Carlini B., Amoroso L., Pistoia V., Ferrini S. and Corrias M. V. (2015), "IL-10 and ARG-1 concentrations in bone marrow and peripheral blood of metastatic neuroblastoma patients do not associate with clinical outcome", J Immunol Res 2015(718975.
30. Morgenstern D. A., London W. B., Stephens D., Volchenboum S. L., Simon T., Nakagawara A., Shimada H., Schleiermacher G., Matthay K. K., Cohn S. L., Pearson A. D. and Irwin M. S. (2016), "Prognostic significance of pattern and burden of metastatic disease in patients with stage 4 neuroblastoma: A study from the International Neuroblastoma Risk Group database", Eur J Cancer
65(1-10.
31. Rothenberg A. B., Berdon W. E., D'Angio G. J., Yamashiro D. J. and Cowles R. A. (2009), "Neuroblastoma-remembering the three physicians who described it a century ago: James Homer Wright, William Pepper, and Robert Hutchison", Pediatr Radiol 39(2), 155-60.
32. Sano H., Bonadio J., Gerbing R. B., London W. B., Matthay K. K., Lukens J. N. and Shimada H. (2006), "International neuroblastoma pathology classification adds independent prognostic information beyond the prognostic contribution of age", Eur J Cancer 42(8), 1113-9.
33. Schmidt M. L., Lal A., Seeger R. C., Maris J. M., Shimada H., O'Leary M., Gerbing R. B. and Matthay K. K. (2005), "Favorable prognosis for patients 12 to 18 months of age with stage 4 nonamplified MYCN neuroblastoma: a Children's Cancer Group Study", J Clin Oncol 23(27), 6474-80.
34. Thurman W. G., Fernbach D. J. and Sullivan M. P. (1964), "Cyclophosphamide therapy in childhood neuroblastoma", N Engl J Med 270(1336-40.
35. Umehara S., Nakagawa A., Matthay K. K., Lukens J. N., Seeger R. C., Stram D. O., Gerbing R. B. and Shimada H. (2000), "Histopathology defines prognostic subsets of ganglioneuroblastoma, nodular", Cancer 89(5), 1150-61.
44
36. Vandepoele K., Andries V., Van Roy N., Staes K., Vandesompele J., Laureys G., De Smet E., Berx G., Speleman F. and van Roy F. (2008), "A constitutional translocation t(1;17)(p36.2;q11.2) in a neuroblastoma patient disrupts the human NBPF1 and ACCN1 genes", PLoS One 3(5), e2207.
37. Westermann F., Muth D., Benner A., Bauer T., Henrich K. O., Oberthuer A., Brors B., Beissbarth T., Vandesompele J., Pattyn F., Hero B., Konig R., Fischer M. and Schwab M. (2008), "Distinct transcriptional MYCN/c-MYC activities are associated with spontaneous regression or malignant progression in neuroblastomas", Genome Biol 9(10), R150.
38. Yoshimoto M., Caminada De Toledo S. R., Monteiro Caran E. M., de Seixas M. T., de Martino Lee M. L., de Campos Vieira Abib S., Vianna S. M., Schettini S. T. and Anderson Duffles Andrade J. (1999), "MYCN gene amplification. Identification of cell populations containing double minutes and homogeneously staining regions in neuroblastoma tumors", Am J Pathol
155(5), 1439-43.
39. Zenitani M., Uehara S., Miyashita E., Hashii Y., Oue T. and Okuyama H. (2016), "Primary renal neuroblastoma with metastasis and matrix metalloproteinase-14 expression", Pediatr Int 58(2), 161-4.
40. Balmain A., Gray J. and Ponder B. (2003), "The genetics and genomics of cancer", Nature genetics Supplement 33(238-44.
41. Brodeur G. M., Pritchard J. , Berthold F., Carlsen N. L., Castel V., Castelberry R. P., De Bernardi B., Evans A. E., Favrot M. and Hedborg F. (1993), "Revisions of the international criteria for neuroblastoma diagnosis, staging, and response to treatment", Journal Clinical Oncology 11(8), 1466-1477. 42. Schell M. and Bergeron C. (2003), "Neuroblastoma", Orphanet Encyclopedia 43. Society American Cancer (2015), "Neuroblastoma", Annual report, United