về di truyền và sinh lý của giống.
- Sử dụng phương pháp cấy chuyền (Trần Linh Thước và ctv., 2001): Vi sinh vật hiếu khí được cấy chuyền và giữ trong ống thạch nghiêng. Ở nhiệt độ phòng, phương pháp này chỉ giúp giữ giống ngắn hạn, cần phải cấy chuyền lại sau vài tuần. Muốn kéo dài thời gian bảo quản từ 3 – 5 tháng, cần trữ ống giống trong tủ lạnh (ở nhiệt độ khoảng 0 - 5oC).
2.2.7. Xác định khả năng cố định đạm, hòa tan lân khó tan của các dòng thu được được
Thông qua việc (1) định lượng đạm sinh ra khi nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường Burk không đạm, (2) định lượng lân hòa tan khi nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường NBRIP chứa lân khó tan, có thể chọn ra các dòng tốt nhất.
Thao tác chuẩn bị dịch vi khuẩn cho cả 2 thí nghiệm định lượng sau đây là tương tự nhau. Tuy nhiên, thời điểm trích lấy dịch nuôi cấy để đo nồng độ các chất sinh ra là khác nhau đối với mỗi thí nghiệm.
Thao tác chuẩn bị dịch vi khuẩn cho cả 2 thí nghiệm định lượng sau đây là tương tự nhau. Tuy nhiên, thời điểm trích lấy dịch nuôi cấy để đo nồng độ các chất sinh ra là khác nhau đối với mỗi thí nghiệm. lỏng là như nhau, dùng que cấy lấy đầy 1 vòng ans sinh khối của mỗi dòng hòa vào ống nghiệm chứa sẵn 5 ml môi trường nuôi cấy lỏng tương ứng với môi trường đặc đang dùng để lưu trữ mẫu vi khuẩn.
- Ủ trên máy lắc với tốc độ 120 vòng/phút, trong 2 ngày.
- Sau 2 ngày để vi khuẩn làm quen với chế độ nuôi cấy lỏng lắc, lấy 500µl dịch vi khuẩn chủng vào các ống nghiệm chứa 20 ml môi trường nuôi cấy lỏng dùng cho thí nghiệm định lượng (Mỗi nghiệm thức lặp lại 3 lần). Cụ thể là:
+ Môi trường Burk không đạm, đối với thí nghiệm định lượng NH4+ sinh ra. + Môi trường NBRIP chứa lân khó tan, đối với thí nghiệm định lượng PO4-