L ời cam đoan
2.4.13. Phương pháp khảo sát một số điều kiện môi trường nuôi cấy để thu nhận
nhận cellulase
2.4.13.1. Xác định nguồn nitơ thích hợp, hàm lượng nitơ
Xác định nguồn thức ăn nitơ thích hợp
Tiến hành nuôi cấy VK trên MT theo kết quả của thí nghiệm 2.4.12.2. Bổ sung vào MT nuôi cấy các nguồn nitơ khác nhau: cao nấm men, (NH4)2SO4, NH- 4NO3. Sau thời gian nuôi cấy thu dịch enzyme, xác định hoạt độ cellulase theo phương pháp 2.4.10. Chọn nguồn nitơ thích hợp cho hoạt độ cellulase cao nhất.
Xác định nồng độ nguồn thức ăn nitơ
Tiến hành nuôi cấy VK trên MT theo kết quả của thí nghiệm 2.4.13.1. Bổ sung vào MT nuôi cấy nguồn nitơ thích hợp có nồng độ khác nhau: 1, 2, 3, 4, 5%. Sau thời gian nuôi cấy thu dịch enzyme, xác định hoạt độ cellulase theo phương pháp 2.4.10. Chọn nguồn nitơ có nồng độ thích hợp cho hoạt độ cellulase cao.
Tiến hành nuôi cấy VK trên MT theo kết quả của thí nghiệm 2.4.13.1, điều chỉnh pH ban đầu của MT ở các mức khác nhau: 5,5; 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0; 8,5. Sau thời gian nuôi cấy thu dịch enzyme, xác định hoạt độ cellulase theo phương pháp 2.4.10. Xác định pH ban đầu thích hợp cho hoạt độ cellulase cao.
2.4.13.3. Xác định nhiệt độ nuôi cấy thích hợp
Tiến hành nuôi cấy VK trên MT theo kết quả của thí nghiệm 2.4.13.2 ở các điều kiện nhiệt độ khác nhau: 25, 30, 35, 40, 45, 500C. Sau thời gian nuôi cấy thu dịch enzyme, xác định hoạt độ cellulase theo phương pháp 2.4.10. Xác định nhiệt độ thích hợp cho hoạt độ cellulase cao nhất.
2.4.13.4. Xác định thời gian nuôi cấy thích hợp
Tiến hành nuôi cấy VK trên MT theo kết quả của thí nghiệm 2.4.13.3ở các khoảng thời gian khác nhau: 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 120, 144 giờ. Sau thời gian nuôi cấy thu dịch enzyme, xác định hoạt độ cellulase theo phương pháp 2.4.10. Xác định thời gian nuôi cấy thích hợp cho hoạt độ cellulase cao nhất.