L ời cam đoan
3.7.3.Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt độ của enzyme
Hoạt động của enzyme lệ thuộc khá rõ vào nhiệt độ MT. Để tìm ra giá trị nhiệt độ thích hợp cho hoạt động của CPE B chúng tôi tiến hành khảo sát hoạt tính cellulase của CPE B trong MT đệm acetate pH=5, cơ chất là CMC 1%, thay đổi nhiệt độ phản ứng ở các mức khác nhau: 35, 40, 45, 50, 55, 60, 650C. Xác định hoạt độ cellulase của CPE B. Kết quả được trình bày ở bảng 3.18 và hình 3.18.
Bảng 3.18. Ảnh hưởng của nhiệt độ lên hoạt tính của CPE B
STT Nhiệt độ
(0C)
Hoạt độ CPE B (UI/g)
Hoạt độ tương đối so với cực đại (%)
1 35 1190,48 ± 4,21 58,47 2 40 1640,93 ± 2,76 80,59 3 45 1662,99 ± 2,76 81,67
5 55 1766,87 ± 3,18 86,77 6 60 1383,53 ± 4,21 68,04 7 65 1236,44 ± 3,18 60,72 8 70 955,14 ± 4,21 46,91
Hình 3.18. Ảnh hưởng của nhiệt độ lên hoạt tính của CPE B
Kết quả trên cho thấy hoạt độ của CPE B ở 350C thấp (58,47% so với hoạt độ cực đại), khi nhiệt độ phản ứng tăng thì hoạt độ tăng và đạt giá trị cực đại ở nhiệt độ 500C (2036,22 (UI/g)). Nhiệt độ tiếp tục tăng cao hơn 500C thì hoạt độ giảm dần và giảm nhanh từ 60 – 700
C, đến 700C thì hoạt độ chỉ đạt 46,91% so với hoạt độ cực đại. Do bản chất của enzyme là protein nên khác với các phản ứng hóa học, vận tốc phản ứng do enzyme xúc tác chỉ tăng lên khi tăng nhiệt độ trong một giới hạn nhất định. Ở nhiệt độ cao, enzyme bị tê liệt và bị phá hủy do rối loạn về cấu trúc phân tử bậc 2,3 làm hỏng trung tâm hoạt động được tạo nên từ các acid quan trọng và các nhóm ghép.
Từ kết quả trên cho thấy CPE B có khoảng nhiệt độ thích hợp tương tự như một số chế phẩm của hãng nước ngoài như Cellusoft L (Novo) và Primafast 200 (Genencor) có nhiệt độ thích hợp cho phản ứng là 45 – 550
C. Nghiên cứu của
0 500 1000 1500 2000 2500 35 40 45 50 55 60 65 70 Ho ạt độ CP E B (U I/g Nhiệt độ (0 C)
Hoàng Quốc Khánh và cs cũng chỉ ra nhiệt độ hoạt động tối ưu của cellulase từ A. niger NRRL-363 là 500C [32].
Vậy có thể kết luận nhiệt độ tối ưu cho hoạt động của CPE B là 500 C.