- Định tính saponin[20]: Một đặc tính quan trọng của saponin là tính tạo bọt nên đây là một trong những phương pháp chính xác để xác định có sự hiện diện của saponin.
Chiết 10g bột dược liệu với cồn 70% bằng cách đun hồi lưu trong 30 phút rồi lọc. Cô bốc hơi dịch lọc cho đến cắn khô.
Hòa tan một lượng cắn tương ứng 1g bột nguyên liệu vào 5ml nước nóng. Lọc vào một ống nghiệm và để nguội, thêm nước cho đủ 10ml, dùng ngón tay cái bịt miệng ống nghiệm và lắc mạnh theo chiều dọc của ống nghiệm trong 1 phút (khoảng 30 lần lắc). Để yên ống nghiệm, quan sát lớp bọt và đánh giá kết quả:
Bọt bền trong 15 phút: + Bọt bền trong 30 phút: ++ Bọt bền trong 60 phút: +++
- Định tính alkaloid[20]: ngâm bột nguyên liệu trong dung dịch H2SO4 loãng 1%, sau đó cho lên nồi đun cách thủy 15 phút. Lọc nước chiết. Từ đây có thể định tính được alkaloid.
Chuẩn bị các loại thuốc thử sau:
Thuốc thử Mayer: 1,35g HgCl2 hòa tan trong 100ml dung dịch KI 5%. Các alkaloid sẽ tủa vô định hình màu trắng vàng.
Thuốc thử Wagner: hòa tan 5g I2 trong 100ml dung dịch KI 10%.
Các alkaloid cho tủa màu nâu sáng đến nâu đen (phần lớn ở dạng tủa bông hoặc bột, đôi khi tạo thành giọt dầu có màu nâu đen).
- Định tính steroid[20]: Phản ứng Salkowki.
Hòa tan 1-2mg bột nguyên liệu trong CHCl3 và nhỏ vào 1ml H2SO4 đậm đặc. Phản ứng dương tính là cho màu đỏ sẫm, xanh, xanh tím.
- Định tính triterpenoid[20]
Phản ứng Liebermann - Burchard.
Chiết 10–20gam bột nguyên liệu bằng diethylether lắc trong bình nón, trong 10–20 phút, chiết cho tới khi dịch ether sau khi bốc hơi không còn để lại lớp cắn mờ trên mặt kính đồng hồ, gộp các dịch chiết, lọc và cô lại đến khi còn khoảng 50ml dịch chiết ether.
Lấy 5ml dịch chiết ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn. Hòa tan cắn với 0,5ml anhydrid acetic, rồi thêm vào dung dịch 0,5ml chloroform. Chuyển dung dịch vào1 ống nghiệm nhỏ khô, dùng pipet pasteur thêm cẩn thận 1–2ml H2SO4đậm đặc lên thành ống nghiệm để nghiên cho acid chảy xuống đáy ống nghiệm. Nơi tiếp xúc giữa 2 lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ đến tím, lớp phía dung dịch trên dần dần chuyển thành màu xanh lục hay tím. Kết luận có triterpenoid.