II. HỢP CHẤT ALKALOID
6. Chiết xuất và phân tách:
6.1 Chiết xuất: Có 2 cách loại tạp
Sau đó tiến hành chiết alkaloid bằng một trong 2 cách cơ bản sau,tùy theo lý tính alkaloid dễ bay hơi hay alkaloid ổn định.
vài giờ đến 1 ngày(trích nguội).
Chiết liên tục với eter dầu bằng cách đun hoàn lưu, bột loại tạp xong để khô tự nhiên( trích nóng).
+ Trường hợp alkaloid dễ bay hơi:
Có trong cây ở trạng thái muối.Cây được phơi khô và nghiền nát thành bột, cho chất kiềm phóng thích alkaloid. Chất kiềm thường dùng là vôi, NH4OH, NaOH. Sau đó chưng cất lôi cuốn hơi nước để thu dược alkaloid.
+ Trường hợp alkaloid của base ổn định: Dùng 2 phương pháp :
* Nấu cây với nước acid, alcol acid hóa bằng acid mạnh.
Trong điều kiện này alkaloid được chuyển sang dạng muối hòa tan trong nước hoặc trong alcol loảng. Việc chọn dung môi phải chọn phù hợp với tính phân cực của alkaloid là trung bình hay yếu để alkaloid tan tốt vào pha đó.
* Chế hóa bột cây khô bởi base mạnh để phóng thích alkaloid .Dùng NaOH, NH4OH, vôi, MgOH,Na2CO3.
Làm khô dịch chiết ở áp suất thấp, chiết bằng dung môi thích hợp để hòa tan alkaloid tự do.
+: Một số đặc tính cần chú ý trong quá trình chiết
* Trong cây alkaloid tồn tại dưới dạng muối của các acid hữu cơ.
* Nhưng một số kết hợp với tanin, vì vậy đối với nguyên liệu có nhiều tanin thì nên dùng dung môi có độ phân cực mạnh hơn.
* Hoặc chiết nóng để tách alkaloid ra khỏi tanin và hòa tan vào dung môi. * Một số alkaloid là ester như Atropin, Cocain, Heliotrin, có thể bị thủy phân trong quá trình chiết xuất nên cần hạn chế sử dụng ở nhiệt độ cao.
* Ngược lại một số alkaloid tồn tại dưới dạng glycocid như
Solamaegin,solasonin,để chiết các alkaloid này cần có giai đoạn thủy phân * Nhìn chung alkaloid là những chất tương đối bền, nhưng một số ít chất thuộc dẫn xuất indol rất dể bị phân hủy do ánh sáng hoặc tác nhân oxy hóa khử
Nhìn chung:
Phân ly alkaloid ở trạng thái tinh khiết là một vấn để khó khăn luôn luôn trong quá trình chiết người ta thu được alkaloid.
Đầu tiên phải tinh chế alkaloid bằng cách khửΦ hết tanin, resin, amino acid làm dơ chúng.
Kế đó, phân ly alkaloid bằngΦ cách hòa tan trong dung môi thích hợp hoặc tạo kết tinh,tạo tủa phân đoạn.
Cuối cùng , đối với các phân đoạn 3,4 chất thì sử dụng sắc khí cột kết hợp sắc kí lớp mỏng, hoặc sắc khí trao đổi ion,…để tách riêng chúng ra .
6.2 Phân tách:
* Để phân tách alkaloid phải qua quy trình sau:
Lọc lấy dung dịch muối,kiềm hóa để lấy ancaloit hoàn toàn khỏi muối.
Nghiền nhỏ nguyên liệu thành bột rồi ngâm với dung dịch HCl1%( hoặc băng dung dịch xôđa)để chuyển hóa hoàn toàn ancaloit thành muối clohidrat dễ tan. Cất cuốn hơi nước hoặc chiết bằng dung môi hữu cơ như clorofom,benzen Xác định cấu trúc các alkaloid thử hoạt tinh sinh học,đem sản phẩm thửΦ
nghiệm,ứng dung.
*Sản phẩm thu được thường là hỗn hợp nhiều alkaloid, hiện nay người ta thường dùng các phương pháp sắc kí khác nhau (sắc kí cột, sắc kí bản mỏng, . . .) để tách riêng các alkcaloid ra khỏi hỗn hợp.
7. Thuốc thử alkaloid
Có 2 loại:
* Loại thứ nhất :cho kết tủa rất ít tan,có độ nhạy lớn, dùng để tìm alkaloid ở dạng vết.
. Dung dịch HgCl2
. Thuốc thử iodur
. Dung dịch vài acid có trọng lượng phân tử cao * Loại thứ hai:
. Dung dịch acid picric bão hòa trong nước . Dung dịch acid stibic bão hòa trong nước . Dung dịch acid picrolonic bão hòa trong nước