H Ọ V ỊC TRÍC TỰC VẬT ĐỐI VỚ
3.1.HIỆUQUẢ ĐỐI KHÁNG IN VITRO CỦA 4 LOẠI THUỐC HÓA HỌC
BỆNH LEM LÉP HẠT LÚA
3.1.1 Nấm Trichoconis sp.
Bảng 3.1 ghi nhận ảnh hƣởng của các loại thuốc hóa học lên sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm Trichoconis sp. trong điều kiện in vitro. Ở thời điểm 48 và 72 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty (GSĐKT), ngoại trừ nghiệm thức xử lý Comcat 150WP nồng độ (0,064g/100ml), các nghiệm thức xử lý thuốc hóa học còn lại đều cho đƣờng kính khuẩn ty nấm nhỏ hơn có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trung bình đƣờng kính khuẩn ty của các nghiệm thức xử lý hiệu quả lần lƣợt khoảng 0,5 – 1,3 cm (48 GSĐKT) và 0,5 – 2,1 cm (72 GSĐKT), của nghiệm thức đối chứng là 1,5 cm (48 GSĐKT) và 2,1 cm (72 GSĐKT). Kết quả về hiệu quả cũng đƣợc ghi nhận tƣơng tự ở hai thời điểm 96 và 120 GSĐKT. Đến thời điểm 144 GSĐKT, nghiệm thức xử lý với Comcat 150WP ở hai nồng độ (0,032g/100ml) và (0,064g/ml) không còn thể hiện khả năng ức chế sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm, trung bình đƣờng kính khuẩn ty nấm ở nghiệm thức này không khác biệt ý nghĩa về mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Các nghiệm thức còn lại vẫn tiếp tục thể hiện hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm. Ở thời điểm khảo sát cuối cùng (160 GSĐKT), nghiệm thức xử lý Comcat 150WP ở cả ba nồng độ không còn thể hiện khả năng ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm, trong khi các nghiệm thức xử lý với Tilt super 300EC, Rocksai Super 525SE và Man 800WP vẫn tiếp tục thể hiện khả năng ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm Trichoconis sp. Đƣờng kính khuẩn ty nấm của các nghiệm thức ở thời điểm này lần lƣợt là Tilt super 300EC nồng độ (46,9µl/100ml) (0,58cm), Tilt super 300EC nồng độ (93,8µl/100ml) (0,52cm), Tilt super 300EC nồng độ (187,6µl/100ml) (0,52cm), Rocksai Super 525SE nồng độ (62,5µl/100ml) (2,32cm), Rocksai Super 525SE nồng độ (125µl/100ml) (1,60cm), Rocksai Super 525SE nồng độ (250µl/100ml) (0,76cm) và Man 80WP nồng độ (0,016g/100ml) (0,52cm), Man 80WP nồng độ (0,032g/100ml) (0,5cm), Man 80WP nồng độ (0,064g/100ml) (0,5cm), của đối chứng là 5,54cm.
28
Bảng 3.1. Ảnh hƣởng của các loại thuốc hóa học lên sự phát triển đƣờng kính (cm) của hu n ty nấm Trichoconis sp. trong điều iện in vitro
Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau đặt khoanh khuẩn ty)
Loại thuốc Nồng độ 48h 72h 96h 120h 144h 160h
Tilt super 300EC 46,9µl/100ml 0,50 f 0,50 f 0,56 f 0,50 f 0,58 fg 0,58 g Tilt super 300EC 93,8µl/100ml 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,52 f 0,52 g 0,52 g Tilt super 300EC 187,6µ/100ml 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,52 f 0,52 g 0,52 g Rocksai Super 525SE 62,5µl/100ml 0,64 e 0,90 d 1,32 d 1,62 d 1,96 d 2,32 d Rocksai Super 525SE 125µl/100ml 0,52 f 0,72 e 0,94 e 1,14 e 1,36 e 1,60 e Rocksai Super 525SE 250µl/100ml 0,50 f 0,50 f 0,52 f 0,60 f 0,66 b 0,76 f Man 80WP 0,25g/100ml 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,52 f 0,52 f 0,52 g Man 80WP 0,5g/100ml 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 g Man 80WP 1g/100ml 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 f 0,50 g Comcat 150WP 0,016g/100ml 1,32 c 2,08 c 2,82 c 3,76 c 4,56 c 5,40 c Comcat 150WP 0,032g/100ml 1,16 d 2,08 c 2,74 c 3,68 c 4,70 b 5,58 b Comcat 150WP 0,064g/100ml 1,56 a 2,48 a 3,34 a 4,38 a 5,32 a 6,20 a Đối chứng 1,46 b 2,34 b 3,16 b 3,92 b 4,72 b 5,54 bc Mức ý nghĩa * * * * * * CV (%) 8,01 5,48 4,77 4,78 4,61 5,12
Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ; ns : khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %
29
Bảng 3.2 ghi nhận hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm Trichoconis sp. của các loại thuốc hóa học trong điều kiện in vitro. Ở thời điểm 48 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty nấm (GSĐKT) trừ nghiệm thức xử lý Comcat 150WP nồng độ (0,016g/100ml) và nghiệm thức xử lý Comcat 150WP nồng độ (0,064g/100ml), thì các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại đều cho hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm cao có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trung bình hiệu quả ức chế khuẩn ty nấm của các nghiệm thức xử lý có hiệu quả khoảng từ 20,6% - 65,7%. Đến thời điểm 72 và 96 GSĐKT, nghiệm thức xử lý với Comcat 150WP nồng độ (0,064g/100ml) không thể hiện hiểu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm, trong khi các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại vẫn có hiệu quả ức chế cao có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trung bình hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty của các nghiệm thức có hiệu quả lần lƣợt khoảng 10,95% -78,6 % (72 GSĐKT), 10,8% - 84,2% (96 GSĐKT). Ở thời điểm 120 và 144 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty nấm, hầu hết các nghiệm thức xử lý Comcat 150WP ở cả 3 nồng độ không còn thể hiện hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm, trung bình hiệu quả ức chế của các nghiệm thức này không khác biệt ý nghĩa về mặt thống kê so với đối chứng không xử lý, các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại vẫn cho hiệu quả ức chế cao. Kết quả đƣợc ghi nhận tƣơng tự ở thời điểm cuối 160 GSĐKT, nghiệm thức xử lý Comcat 150WP ở cả ba nồng độ không có hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm, nhƣng các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại với Tilt super 300EC, Rocksai Super 525SE và Man 800WP vẫn đạt hiệu quả ức chế cao có ý nghĩa thống kê so với đối chứng không xử lý, hiệu quả ức chế của các nghiệm thức xử lý này lần lƣợt là Tilt super 300EC nồng độ (46,9µl/100ml) (89,53%), Tilt super 300EC nồng độ (93,8µl/100ml) (90,61%), Tilt super 300EC nồng độ (187,6µl/100ml) (90,59%), Rocksai Super 525SE nồng độ (62,5µl/100ml) (58,05%), Rocksai Super 525SE nồng độ (125 µl/100ml) (71,12%), Rocksai Super 525SE nồng độ (250µl/100ml) (86,27%) và Man 80WP nồng độ (0,25g/100ml) (90,61%), Man 80WP nồng độ (0,5g/100ml) (90,97%), Man 80WP nồng độ (0,1g/100ml) (90,97%).
30
Bảng 3.2. Hiệu quả ức chế sự phát triển hu n ty nấm Trichoconis sp. của các loại thuốc h a học trong điều iện in vitro
Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 %; ns : khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %
Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau đặt khoanh khuẩn ty)
Loại thuốc Nồng độ 48h 72h 96h 120h 144h 160h
Tilt super 300EC 46,9µl/100ml 65,65 a 78,61 a 82,30 a 85,19 a 87,72 a 89,53 a Tilt super 300EC 93,8µl/100ml 65,65 a 78,61 a 84,17 a 86,71 a 88,98 a 90,61 a Tilt super 300EC 187,6µ/100ml 65,65 a 78,61 a 84,17 a 86,73 a 88,97 a 90,59 a Rocksai Super 525SE 62,5µl/100ml 56,11 a 61,49 a 58,23 b 58,66 a 58,45 a 58,05 a Rocksai Super 525SE 125µl/100ml 64,23 a 69,25 a 70,26 ab 70,93 a 71,22 a 71,12 a Rocksai Super 525SE 250µl/100ml 65,65 a 78,61 a 83,53 a 84,71 a 86,00 a 86,27 a
Man 80WP 0,25g/100ml 65,65 a 78,61 a 84,17 a 86,74 a 88,97 a 90,61 a Man 80WP 0,5g/100ml 65,65 a 78,61 a 84,17 a 87,24 a 89,40 a 90,97 a Man 80WP 1g/100ml 65,65 a 78,61 a 84,17 a 87,24 a 89,40 a 90,97 a Comcat 150WP 0,016g/100ml 9,55 bc 10,95 b 10,75 c 4,04 b 3,34 b 2,46 b Comcat 150WP 0,032g/100ml 20,61 b 10,95 b 13,29 c 6,03 b 0,38 b 0,00 b Comcat 150WP 0,064g/100ml 0,00 c 0,09 c 0,00 d 0,00 b 0,82 b 0,00 b Đối chứng 0,00 c 0,00 c 0,00 d 0,00 b 0,00 b 0,00 b Mức ý nghĩa * * * * * * CV (%) 8,01 7,04 5,37 5,65 7,14 6,70
31
Nhƣ vậy, từ kết quả đã phân tích ở bảng 3.1. và 3.2., trong 4 loại thuốc dùng để khảo sát hiệu quả ức chế trên nấm Trichoconis sp., thì trừ nghiệm thức xử lý với thuốc hóa học Comcat 150WP không thể hiện hiệu quả ức phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm, các nghiệm thức xử lý thuốc với Tilt super 300EC, Rocksai Super 525SE và Man 80WP đều có hiệu quả ức chế phát triển khuẩn ty nấm Trichoconis
sp. và đều cho kết quả khác biệt ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trong ba loại thuốc cho hiệu quả thì Tilt super 300EC và Man 80WP cho hiệu quả ức chế khuẩn ty cao nhất, ngay từ nồng độ A (nồng độ bằng ½ khuyến cáo) đã thể hiện hiệu quả cao. Kết quả của Tilt super 300EC tƣơng tự kết quả của Trần Văn Hai (1999) và Hồ Văn Thơ (2007). Trần Văn Hai (1999) thử thuốc trên
Trichoconis padwickii bằng phƣơng pháp đặt khoanh khuẩn ty đƣờng kính 7mm vào môi trƣờng PSA, thì Tilt 250EC cũng cho hiệu quả ức chế khuẩn ty nấm cao có ý nghĩa thống kê so với đối chứng. Hồ Văn Thơ (2007) đã khảo sát hiệu quả của Tilt super 300EC và Dithane M - 45 80WP trên nấm Trichoconis padwickii, cùng một phƣơng pháp tiến hành và đều cho kết quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm cao khác biệt ý nghĩa thống kê so với đối chứng không xử lý. Butt và ctv. (2011) đã sử dụng phƣơng pháp ngâm hạt, khảo sát hiệu quả của các loại thuốc trên nấm
Alternaria sp. thì Mancozeb cũng cho hiệu quả ức chế nấm phát triển có khác biệt ý nghĩa thống kê so với đối chứng không xử lý. Hai nghiệm thức Tilt super 300EC (46,9µl/100ml) và Man 80WP (0,25g/100ml) sẽ đƣợc sử dụng để tiếp tục thực hiện thí nghiệm 3.
32
Hình 3.1: Sự phát triển khu n ty nấm Trichoconis sp. của các nghiệm thức Man 80WP và
Rocksai super 525SE sau năm ngày th thuốc.
Rocksai super 525SE (0,064µl/100ml)
Đối chứng
Man 80WP (0,25g/100ml) Man 80WP (0,5g/100ml)
Man 80WP (0,1g/100ml)
Rocksai super 525SE (0,016) Rocksai super 525SE
33
Hình 3.2: Sự phát triển khu n ty nấm Trichoconis sp. của các nghiệm thức Tiltsuper 300EC
và Comcat 150WP sau năm ngày th thuốc.
Tilt super 300EC (46,9µl/100ml)
Đối chứng Tilt super 300EC (93,8µl/100ml)
Tilt super 300EC (187,6µl/100ml) Comcat 150WP (0,016g/100ml) Comcat 150WP (0,032g/100ml) Comcat 150WP (0,64g/100ml)
34
3.1.2. Nấm Aspergillus sp.
Ảnh hƣởng của các loại thuốc hóa học lên sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm Aspergillus sp. trong điều kiện in vitro đƣợc trình bày ở Bảng 3.3. Ở thời điểm 48 và 72 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty nấm, tất cả các nghiệm thức xử lý thuốc đều có khả năng ức chế sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm Aspergillus sp. cho đƣờng kính khuẩn ty nhỏ hơn có ý nghĩa thống kê với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trung bình đƣờng kính khuẩn ty của các nghiệm thức xử lý có hiệu quả khoảng 0,5 – 2,44cm (48 GSĐKT) và 0,5 – 3,54cm (72 GSĐKT), của nghiệm thức đối chứng tƣơng ứng là 2,62cm và 3,68cm. Đến thời điểm 96 GSĐKT, nghiệm thức xử lý Comcat 150WP ở nồng độ (0,064g/100ml) không còn thể hiện khả năng ức chế đƣờng kính khuẩn ty nấm, trung bình đƣờng kính khuẩn ty các nghiệm thức này không khác biệt ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trong khi đó các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại đều cho khả năng ức chế đƣờng kính khuẩn ty nấm Aspergillus sp. với đƣờng kính khuẩn ty nhỏ hơn có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Kết quả cũng đƣợc ghi nhận ở thời điểm 120, 144 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty nấm, trừ nghiệm thức xử lý Comcat 150WP ở cả ba nồng độ không còn thể hiện khả năng ức chế sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm. Các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại vẫn tiếp tục thể hiện hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm. Đến thời điểm cuối 160 GSĐKT, nghiệm thức xử lý Comcat 150WP của ba nồng độ vẫn không có thể hiện khả năng ức chế sự phát triển đƣờng kính khuẩn ty nấm, trung bình đƣờng kính khuẩn ty ở các nghiệm thức xử lý này không khác biệt ý nghĩa về mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý, các nghiệm thức xử lý thuốc còn lại là Tilt super 300EC, Rocksai Super 525SE và Man 80WP đều cho hiệu quả với đƣờng kính khuẩn ty nhỏ hơn có ý nghĩa thống kê so với đối chứng, đƣờng kính khuẩn ty ở các nghiệm thức xử lý hiệu quả này lần lƣợt là Tilt super 300EC nồng độ (46,9µl/100ml) 0,66cm, Tilt super 300EC nồng độ (93,8µl/100ml) 0,56cm, Tilt super 300EC nồng độ (187,6µl/100ml) 0,60cm, Rocksai Super 525SE nồng độ (62,5µl/100ml) 1,62cm, Rocksai Super 525SE nồng độ (125µl/100ml) 0,98cm, Rocksai Super 525SE nồng độ (250µl/100ml) 0,70cm, Man 80WP ở cả 3 nồng độ đều là 0,50cm, của nghiệm thức đối chứng là 7,52cm.
35
Bảng 3.3. Ảnh hƣởng của các loại thuốc hóa học lên sự phát triển đƣờng ính cm hu n ty nấm Aspergillus sp. trong điều iện in vitro
Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau đặt khoanh khuẩn ty)
Loại thuốc Nồng độ 48h 72h 96h 120h 144h 160h
Tilt super 300EC 46,9µl/100ml 0,54 de 0,58 e 0,60 de 0,62 e 0,62 fg 0,66 d Tilt super 300EC 93,8µl/100ml 0,50 e 0,50 e 0,52 ef 0,54 e 0,56 fg 0,56 de Tilt super 300EC 187,6µ/100ml 0,50 e 0,50 e 0,52 ef 0,56 e 0.60 fg 0,60 de Rocksai Super 525SE 62,5µl/100ml 0,58 d 0,74 d 1,00 c 1,22 c 1,56 d 1,62 b Rocksai Super 525SE 125µl/100ml 0,50 e 0,58 e 0,64 d 0,76 d 0,96 e 0,98 c Rocksai Super 525SE 250µl/100ml 0,52 e 0,54 e 0,60 de 0,60 e 0,68 f 0,70 d Man 80WP 0,25g/100ml 0,50 e 0,50 e 0,50 f 0,50 e 0.50 g 0,50 e Man 80WP 0,5g/100ml 0,50 e 0,50 e 0,50 f 0,50 e 0,50 g 0,50 e Man 80WP 1g/100ml 0,50 e 0,50 e 0,50 f 0,50 e 0,50 g 0,50 e Comcat 150WP 0,016g/100ml 2,44 b 3,54 b 4,44 b 5,50 ab 6,46 bc 7,54 a Comcat 150WP 0,032g/100ml 2,28 c 3,40 c 4,44 b 5,54 ab 6,54 ab 7,46 a Comcat 150WP 0,064g/100ml 2,40 b 3,50 b 4,55 a 5,59 a 6,66 a 7,59 a Đối chứng 2,62 a 3,68 a 4,56 a 5,46 b 6,36 c 7,52 a Mức ý nghĩa * * * * * * CV (%) 4,27 4,06 3,73 4,18 4,42 3,85
Ghi chú *: số liệu khác biệt ở mức ý nghĩa 5 % ; ns : khác biệt không ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột, những số có cùng chữ số theo sau thì khác biệt không ý nghĩa ở mức 5 %
36
Hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm Aspergillus sp. của các loại thuốc hóa học trong điều kiện in vitro đƣợc ghi nhận ở Bảng 3.4. Ở thời điểm 48 giờ sau đặt khoanh khuẩn ty nấm, tất cả các nghiệm thức xử lý thuốc hóa học đều cho hiệu quả cao ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm Aspergillus sp. có ý nghĩa về mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Trung bình hiệu quả của các nghiệm thức xử lý đạt đƣợc khoảng 6,84% - 80,91%. Kết quả đƣợc ghi nhận tƣơng tự ở thời điểm 72 GSĐKT. Đến thời điểm 96, 120 và 144 GSĐKT, lúc này các nghiệm thức xử lý với Comcat 150WP đã không còn cho hiệu quả ức chế khuẩn ty nấm, trung bình hiệu quả ức chế của các nghiệm thức này không khác biệt ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đối chứng không xử lý. Còn các nghiệm thức xử lý còn lại vẫn tiếp tục cho hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty cao, trung bình hiệu quả ức chế lần lƣợt là 78,06 – 89,03% (96 GSĐKT), 77,60 – 90,84% (120 GSĐKT) và 75,41 – 92,14% (144 GSĐKT). Ở thời điểm cuối 160 GSĐKT,vẫn là nghiệm thức xử lý với Comcat 150WP không còn thể hiện hiệu quả ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm, còn các nghiệm thức xử lý với Tilt super 300EC, Rocksai Super 525SE và Man 800WP vẫn tiếp tục cho hiệu quả cao trong việc ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm và có khác biệt ý nghĩa thống kê so với đối chứng không xử lý. Hiệu quả của các nghiệm thức xử lý này lần lƣợt là Tilt super 300EC nồng độ (46,9µl/100ml) 91,22%, Tilt super 300EC nồng độ (93,8µl/100ml) 92,56%, Tilt super 300EC nồng độ (187,6µl/100ml) 92,02%, Rocksai Super 525SE nồng độ (62,5µl/100ml) 78,42%, Rocksai Super 525SE nồng độ (125µl/100ml) 86,96%, Rocksai Super 525SE nồng độ (250µl/100ml) 90,69%, Man 800WP đạt 93,35% ở cả 3 nồng độ.
37
Bảng 3.4. Hiệu quả ức chế sự phát triển hu n ty nấm Aspergillus sp. của các loại thuốc h a học trong điều iện in vitro
Nghiệm thức Thời điểm quan sát (giờ sau đặt khoanh khuẩn ty)
Loại thuốc Nồng độ 48h 72h 96h 120h 144h 160h
Tilt super 300EC 46,9µl/100ml 79,40 ab 84,23 b 86,83 b 88,64 a 90,25 a 91,22 a Tilt super 300EC 93,8µl/100ml 80,91 a 86,41 a 88,60 a 90,12 a 91,20 a 92,56 a Tilt super 300EC 187,6µ/100ml 80,91 a 86,41 a 88,60 a 89,73 a 90,56 a 92,02 a Rocksai Super 525SE 62,5µl/100ml 77,86 b 79,89 c 78,06 c 77,60 a 75,41 a 78,42 a Rocksai Super 525SE 125µl/100ml 80,91 a 84,23 b 85,97 b 86,06 a 84,89 a 86,96 a Rocksai Super 525SE 250µl/100ml 80,14 a 85,32 ab 86,84 b 89,01 a 89,30 a 90,69 a
Man 800WP 0,25g/100ml 80,91 a 86,41 a 89,03 a 90,84 a 92,14 a 93,35 a Man 800WP 0,5g/100ml 80,91 a 86,41 a 89,03 a 90,84 a 92,14 a 93,35 a Man 800WP 1g/100ml 80,91 a 86,41 a 89,03 a 90,84 a 92,14 a 93,35 a Comcat 150WP 0,016g/100ml 6,84 d 3,80 e 2,63 d 0,00 b 0,00 b 0,00 b