2. Mục tiêu nghiên cứu
3.4.5. Hàm lượng protein tổng số và các tiểu phần protein
*Hàm lượng protein tổng số trong huyết thanh
Protein huyết thanh là một chỉ tiêu quan trọng trong sự sinh trưởng và phát triển của ựộng vật, có mối liên quan với chế ựộ dinh dưỡng, ựiều kiện chăm sóc và năng suất của ựộng vật.
Protein huyết thanh có vai trò cực kỳ quan trọng ựối với cơ thể ựộng vật: Vai trò xúc tác như các enzim, vai trò dinh dưỡng, vai trò vận chuyển như: Albumin, α - Globulin, β - Globulin, vai trò bảo vệ cơ thể như γ - GlobulinẦ Ngoài ra protein còn có vai trò giữ ựộ nhớt cho huyết tương, cần thiết cho máu và các hoạt ựộng của bạch cầu, giữ áp lực keo ựảm bảo chuyển hóa các muối, tham gia quá trình ựáp ứng miễn dịch không ựặc hiệu,Ầ
Với những chức năng quan trọng như trên, số lượng của mỗi loại protein trong huyết thanh ựều ựược ựiều hòa rất chặt chẽ và nhờ vậy mà hàm lượng của
nó là những con số hằng ựịnh. Khi có những tác nhân bệnh lý tác ựộng, hoạt ựộng các cơ quan trong cơ thể bị rối loạn thì hàm lượng protein trong huyết thanh cũng có thay ựổi tương ứng. Do ựó, xét nghiệm hàm lượng protein huyết thanh là một biện pháp khá quan trọng trong việc chẩn ựoán và xác ựịnh tiên lượng bệnh.
Nhằm tìm hiểu tình trạng trao ựổi protein trong các trường hợp gây viêm phổi chó thực nghiệm chúng tôi ựã tiến hành ựịnh lượng protein huyết thanh và ựiện di protein ựể tách các tiểu phần protein.
Bằng phương pháp ựo trên khúc xạ kế Zenna, chúng tôi ựã xác ựịnh ựược protein tổng số của chó trước và sau khi gây bệnh thực nghiệm. Kết quả ựược chúng tôi tổng hợp và trình bày ở bảng 3.10.
Kết quả bảng 3.10 cho thấy hàm lượng protein tổng số của chó trước khi gây bệnh (khỏe mạnh) là 6,45 ổ 0,16 g%, dao ựộng từ 6,06 Ờ 6,84 g%. Theo dõi ở chó sau khi gây bệnh chúng tôi thấy hàm lượng protein tổng số có xu hướng giảm và thấp khi bệnh kéo dàị Cụ thể:
Ở những chó gây bệnh ựợt 1: Sau khi gây bệnh 24 giờ hàm lượng protein tổng số trung bình là 5,77 ổ 0,11 g%, dao ựộng từ 5,42 Ờ 6,11 g%. Sau 48 giờ gây bệnh hàm lượng protein tổng số trung bình là 5,20 ổ 0,09 g%, dao ựộng từ 4,92 Ờ 5,48 g%, và ựến 72 giờ sau khi gây bệnh thì hàm lượng protein tổng số trung bình là 4,43 ổ 0,10 g%, dao ựộng từ 4,12 Ờ 4,74 g% nhưng ựến 96 giờ sau gây bệnh thì hàm lượng protein tổng số trung bình giảm chỉ còn 3,97 ổ 0,10 g%, dao ựộng từ 3,46 Ờ 4,11 g%.
Ở những chó gây bệnh ựợt 2: Sau khi gây bệnh 24 giờ hàm lượng protein tổng số trung bình là 5,93 ổ 0,09 g%, dao ựộng từ 5,69 Ờ 6,16 g%. Sau 48 giờ gây bệnh hàm lượng protein tổng số trung bình là 5,67 ổ 0,06 g%, dao ựộng từ 5,00 Ờ 5,34 g%, và ựến 72 giờ sau khi gây bệnh thì hàm lượng protein tổng số trung bình là 4,40 ổ 0,16 g%, dao ựộng từ 3,92 Ờ 4,86 g%.
Qua theo dõi chó mắc bệnh viêm phổi thực nghiệm chúng tôi thấy: Khi chó mắc bệnh viêm phổi thì hàm lượng protein tổng số giảm so với chó khỏẹ Ở những chó gây bệnh ựợt 1 hàm lượng protein tổng số giảm nhiều hơn nhiều so với chó gây bệnh viêm phổi ở ựợt 2.
Bảng 3.10. Hàm lượng Protein tổng số và các tiểu phần protein ở chó gây bệnh thực nghiệm Các tiểu phần protein (%)
Chỉ tiêu theo dõi đối tượng
Thời gian theo dõi sau gây bệnh
(giờ)
Protein tổng số
(g%) Albumin α - Globulin β - Globulin γ - Globulin
Hệ số A/G
X ổ mx 6,45ổ0,16 49,23ổ0,91 11,04ổ0,49 23,78ổ0,50 15,97ổ0,68 0,97ổ0,04
Chó khoẻ mạnh (trước
khi gây bệnh) Dao ựộng 6,06-6,84 47,03-51,38 9,88-12,20 22,59-24,97 14,37-17,58 0,89-1,06
X ổ mx 5,77ổ0,11 45,21ổ0,41 13,65ổ0,55 23,36ổ0,26 17,77ổ0,42 0,83ổ0,02 24 Dao ựộng 5,42-6,11 43,92-46,50 11,91-15,39 22,54-24,18 16,44-19,11 0,78-0,87 X ổ mx 5,20ổ0,09 43,79ổ0,39 14,66ổ0,52 22,77ổ0,42 18,79ổ0,93 0,78ổ0,01 48 Dao ựộng 4,92-5,48 42,55-45,02 13,00-16,32 21,42-24,10 15,83-21,75 0,74-0,82 X ổ mx 4,43ổ0,10 42,66ổ0,38 15,51ổ0,43 22,21ổ0,36 19,62ổ0,75 0,75ổ0,01 72 Dao ựộng 4,12-4,74 41,44-43,88 14,14-16,88 21,05-23,37 17,25-21,99 0,71-0,78 X ổ mx 3,79ổ0,10 41,44ổ0,30 16,60ổ0,49 21,33ổ0,25 20,62ổ0,75 0,71ổ0,01 đợt 1 (n=15) 96 Dao ựộng 3,46-4,11 40,50-42,39 15,06-18,16 20,54-22,12 18,24-23,00 0,68-0,73 X ổ mx 5,93ổ0,09 45,64ổ0,31 14,29ổ0,25 21,95ổ0,32 18,13ổ0,40 0,84ổ0,01 24 Dao ựộng 5,69-6,16 44,66-46,62 13,48-15,10 20,93-22,96 16,87-19,38 0,81-0,88 X ổ mx 5,67ổ0,06 43,97ổ0,13 15,43ổ0,25 21,70ổ0,25 18,90ổ0,35 0,79ổ0,00 48 Dao ựộng 5,00-5,34 43,57-44,37 14,63-16,22 20,92-22,48 17,78-20,02 0,77-0,08 X ổ mx 4,40ổ0,16 42,30ổ0,33 16,19ổ0,47 21,20ổ0,14 20,31ổ0,43 0,73ổ0,01 Chó gây bệnh thực nghiệm đợt 2 (n=15) 72 Dao ựộng 3,92-4,86 41,24-43,36 14,68-17,70 20,74-21,65 18,94-21,69 0,71-0,76
Nguyên nhân chủ yếu là do con vật bị sốt, ho nhiều và thở khó do quá trình tiêu hóa hấp thu giảm, con vật ủ rũ mệt mỏi kém ăn. Mặt khác, do con vật sốt kéo dài nên tiêu tốn nhiều năng lượng. Tất cả các nguyên nhân trên làm cho protein tổng số trong huyết thanh giảm.
*Các tiểu phần protein trong huyết thanh
Trong cơ thể, huyết thanh ựược phân giải và tổng hợp, nó trực tiếp tham gia vào quá trình trao ựổi chất của cơ thể. Sự thay ựổi protein trong huyết thanh phụ thuộc vào nguồn gốc thức ăn, chất lượng thức ăn, khả năng hấp thu của ruột, chức năng tổng hợp của gan và các trạng thái bệnh lý khác.
Protein trong huyết thanh: Chủ yếu gồm hai loại là Albumin và Globulin. Albumin là thành phần rất quan trọng trong sự trao ựổi protein của ựộng vật, nó ựóng vai trò tạo hình, giữ áp lực thẩm thấu keo của máu, làm nhiệm vụ vận chuyển các axit béo, cholesteron, một số vitamin, một số ion canxi, mageẦ
Globulin: Globulin chiếm phần lớn protein trong huyết thanh, nó bao gồm α -Globulin, β - Globulin, γ Ờ Globulin. Chúng có ý nghĩa sinh học và ựóng vai trò khác nhau trong cơ thể sống.
Tỷ lệ A/G ựược gọi là chỉ số protit, nó có ý nghĩa ựối với công tác chẩn ựoán. Sự biến ựổi tương quan tỷ lệ giữa Albumin, Globulin và sự biến ựổi các thành phần Globumin xảy ra với các lứa tuổi dưới ảnh hưởng của các trạng thái bệnh lý và sinh lý khác nhaụ Tỷ số A/G ựặc thù cho từng lứa tuổi, từng giống. đây cũng là chỉ tiêu ựánh giá chất lượng con vật khi gia súc mắc bệnh, ựặc biệt là bệnh truyền nhiễm thì chỉ số này giảm mạnh.
Chúng tôi tiến hành ựiện di protein ựể xác ựịnh hàm lượng các tiểu phần protein ở chó trước và sau khi gây bệnh viêm phổi thực nghiệm trên màng Acetat cellulosẹ Kết quả ựược chúng tôi trình bày ở bảng 3.10.
Qua bảng 3.10 cho thấy: Ở chó trước khi gây bệnh (khỏe mạnh) thì tỷ lệ các tiểu phần protein trong huyết thanh là tỷ lệ Albumin trung bình là 49,23 ổ 0,91%; tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình 11,04 ổ 0,49%, tỷ lệ β Ờ Globulin trung bình 23,78 ổ 0,50%, tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình 15,97 ổ 0,68%.
Sau khi gây bệnh thực nghiệm viêm phổi trên chó qua theo dõi chúng tôi thấy hàm lượng Albumin giảm xuống theo các khoảng thời gian khác nhaụ Cụ thể:
Ở những chó gây bệnh ựợt 1: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ Albumin trung bình 45,21 ổ 0,41. Và ựến 72h sau khi gây bệnh thì tỷ lệ Albumin trung bình giảm xuống chỉ còn 42,66 ổ 0,38% và tới 96h sau gây bệnh thì tỷ lệ Albumin trung bình là 41,44 ổ 0,30%.
Ở những chó gây bệnh ựợt 2: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ Albumin trung bình 45,64 ổ 0,31. Và ựến 72h sau khi gây bệnh thì tỷ lệ Albumin trung bình giảm xuống chỉ còn 42,30 ổ 0,33%.
Cùng với việc theo dõi sự biến ựộng tỷ lệ Albumin trung bình chúng tôi cũng tiến hành theo dõi tỷ lệ α - Globulin, β - Globulin, γ Ờ Globulin. Qua kết quả bảng 3.10 cho thấy tỷ lệ α - Globulin, β - Globulin, γ Ờ Globulin có xu hướng tăng so với chó khỏẹ Cụ thể:
Ở những chó gây bệnh ựợt 1: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 13,65 ổ 0,55%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 17,77 ổ 0,42%. Sau khi gây bệnh 48h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 14,66 ổ 0,52%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 18,79 ổ 0,93%. Sau khi gây bệnh 72h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 15,51 ổ 0,43%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 19,62 ổ 0,75%. Sau khi gây bệnh 96h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình tăng lên là 16,60 ổ 0,49%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình tăng lên là 20,62 ổ 0,75%.
Ở những chó gây bệnh ựợt 2: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 14,29 ổ 0,25%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 18,13 ổ 0,40%. Sau khi gây bệnh 48h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 15,43 ổ 0,25%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 18,90 ổ 0,35%. Sau khi gây bệnh 72h tỷ lệ α Ờ Globulin trung bình là 16,19 ổ 0,47%; tỷ lệ γ Ờ Globulin trung bình là 20,31 ổ 0,43%.
Tỷ lệ α - Globulin, γ Ờ Globulin có xu hướng tăng thì tỷ lệ β Ờ Globulin lại có xu hướng giảm so với chó khỏe mạnh. Cụ thể:
Ở những chó gây bệnh ựợt 1: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ β Ờ Globulin trung bình là 23,36 ổ 0,26%. Sau khi gây bệnh 48h tỷ lệ β Ờ Globulin trung bình
là 22,77 ổ 0,42%. Sau khi gây bệnh 72h β Ờ Globulin trung bình này giảm chỉ còn là 22,21 ổ 0,36%. Sau khi gây bệnh 72h β Ờ Globulin trung bình ựã giảm rõ chỉ còn 21,33 ổ 0,25%.
Ở những chó gây bệnh ựợt 2: Sau khi gây bệnh 24 giờ tỷ lệ β Ờ Globulin trung bình là 21,95 ổ 0,32%. Sau khi gây bệnh 48h tỷ lệ β Ờ Globulin trung bình là 21,70 ổ 0,25%. Sau khi gây bệnh 72h β Ờ Globulin trung bình này giảm chỉ còn là 21,20 ổ 0,14%.
Song song với việc theo dõi sự biến ựộng của các tiểu phần protein chúng tôi cũng tiến hành kiểm tra sự thay ựổi tỷ lệ A/G của chó gây bệnh thực nghiệm. Kết quả ở bảng 3.10 cho thấy tỷ lệ A/G trung bình của chó khỏe mạnh là 0,97 ổ 0,04. Khi gây bệnh viêm phổi thực nghiệm thì tỷ lệ này giảm so với chó khỏe mạnh và giảm nhiều khi bệnh nặng. Cụ thể:
Ở những chó gây bệnh ựợt 1: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ A/G trung bình là 0,83 ổ 0,02. Nhưng ựến 96h tỷ lệ A/G trung bình chỉ còn là 0,71 ổ 0,01.
Ở những chó gây bệnh ựợt 2: Sau khi gây bệnh 24h tỷ lệ A/G trung bình là 0,84 ổ 0,01. Nhưng ựến 72h tỷ lệ A/G trung bình chỉ còn là 0,73 ổ 0,01.
Như vậy, khi chó bị viêm phổi thì có sự biến ựổi các tiểu phần protein, kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với kết luận qua thực nghiệm của Lê Khắc Thận (1974): ỘTrong các trường hợp bệnh lý khiến gan bị tổn thương thì Albumin giảm ựồng thời Globumin tăng cao và hệ số A/G do ựó cũng giảm rõỢ.