Dụng cụ, trang thiết bị

Một phần của tài liệu XÁC ĐỊNH đột BIẾN GEN ABCC8 TRÊN BỆNH NHÂN CƯỜNG INSULIN (Trang 26 - 27)

2.3.1.1. Thiết bị

- Tủ lạnh: ARCTIKO -80ºC và SANYO.

- Dụng cụ thủy tinh: Ống nghiệmpha hóa chất, cốc thủy tinh, ốngđong, bình nón, cốc thủy tinh.

- Pipet định mức và đầu côn các loại 1000µl, 200µl, 100µl, 20µl, 10µl, 2,5µl - Ống Eppendorf

- Găng tay, giấy thấm vô trùng - Tủ sấy, tủ ấm

- Khay đổ gel - Cân điện tử

- Lò vi sóng (Saiko)

- Máy ly tâm để bàn Eppendorf (Đức): Centrifuge 5242R và WeALTEC - Máy Votex Genie 2

- Máy rung lắc nhiệt: Thermomixer5437, Thermomixer comfort cho ống 1,5ml và Mixmate cho ống 2ml

- Máy điện di

- Máy soi gel và chụp ảnh tự động: EC3 Imaging system - Máy đọc huỳnh quang

- Máy đo OD: Nanodrop 1000 - Máy PCR: Eppendorf vapoprotect

2.3.1.2. Hóa chất tách DNA

- Các dung dịch đệm phosphate (PBS) pH:7,4 - Dung dịch phá vỡ bạch cầu RBC

- Dung dịch Lysis buffer HD - Proteinase K (10mg/mL)

- Phenol Cholofrom Isoamyl (25:24:1) - Cholorofrom Isoamyl (24:1)

- Ethanol 100%, ethanol 70% bảo quản lạnh - Dung dịch hòa tan DNA: đệm TE (Tris- EDTA)

2.3.1.3. Hóa chất cho phản ứng PCR

- Thành phần của PCR Master Mix gồm: - 10X Buffer

- Gotaq2X chứa: dNTPs, Taq polymerase, MgCl2 - Primers: mồi xuôi, mồi ngược

2.3.1.4. Hóa chất chạy điện di

- Dung dịch đệm TBE (Tris Borate EDTA) 1X gồm: Tris base, boric acid và EDTA (pH =8.0)

- Agarose 1,5%

- DNA thang chuẩn (marker :100bp)

2.3.1.5. Hóa chất giải trình tự

- Ethanol 100%, ethanol 70%

- Hi - Di™Formamide (bảo quản lạnh ở -20ºC) - Big dye

- Buffer

Một phần của tài liệu XÁC ĐỊNH đột BIẾN GEN ABCC8 TRÊN BỆNH NHÂN CƯỜNG INSULIN (Trang 26 - 27)