Chuẩn bị mẫu:
Trước khi tiến hành phân tích, mẫu được tiến hành đông khô để chuyển từ dạng dung dịch sữa về dạng mẫu bột, dễ dàng cho quá trình tách chiết. Mẫu được tiến hành đông khô bằng máy đông khô, Unicryo MC6L trong thời gian 24h.
Chuẩn bị mẫu giả:
Trong luận văn này chúng tôi tiến hành các thí nghiệm khảo sát dung môi chiết và phân tích mẫu thêm chuẩn trên nền mẫu là sữa bột Similac Gain IQ, Abbot, Hoa Kì với hàm lượng mỡ ghi trên bao bì là 23,8%.
Khảo sát hệ dung môi chiết mẫu
Mẫu được chiết sử dụng hỗn hợp dung môi gồm Hexan, Diclometan và một dung môi phân cực. Yếu tố khảo sát là loại dung môi phân cực Metanol hoặc Etanol và tỉ lệ dung môi thích hợp. Loại dung môi và tỉ lệ được lựa chọn để tiến hành chiết mẫu phải đảm bảo được hiệu quả chiết mỡ tốt (đánh giá thông qua độ thu hồi mỡ trong mẫu giả).
Chiết mẫu
Dung dịch nội chuẩn được thêm vào hỗn hợp mẫu đã trộn đều với muối Na2SO4 khan. Sau đó hỗn hợp ở trên được tiến hành chiết trên PLE bằng dung môi thích hợp với chương trình chiết đã được cài đặt trước. Hiệu suất của toàn bộ quá trình phân tích được đánh giá thông qua độ thu hồi của chất nội chuẩn.
27
Dung dịch chuẩn làm sạch, 37Cl-2,3,7,8-TCDD được thêm vào dịch chiết mẫu trước khi tiến hành làm sạch trên hệ làm sạch bán tư động, hãng Supelco. Sau đó hỗn hợp dịch chiết mẫu và chuẩn được làm sạch trên hệ gồm hai cột Silica đa lớp và cột Cacbon hai lớp. Hiệu suất của quá trình làm sạch được đánh giá dựa trên độ thu hồi của chất chuẩn làm sạch.
Phát hiện và Định lượng trên thiết bị HRGC/HRMS
Phương pháp định lượng các chất Dioxin trên hệ thống HRGC/HRMS được tham khảo từ phương pháp tiêu chuẩn USEPA 1613 với một số thay đổi phù hợp với điều kiện của phòng thí nghiệm. Các thí nghiệm trên hệ thống phân tích bao gồm: xác định các chất Dioxin dựa vào thời gian lưu và mảnh phổ của ion đặc trưng của từng đồng loại, dựng đường chuẩn gồm 5 điểm chuẩn của 17 chất đồng loại Dioxin (với nồng độ của từng đồng loại trong bảng 2.4), xác định các giá trị giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng của phương pháp và định lượng chất phân tích sử dụng đường chuẩn theo phương pháp pha loãng đồng vị và nội chuẩn.
Đánh giá độ đúng và độ chụm của phương pháp
Với hệ dung môi đã khảo sát ở trên, chúng tôi tiến hành thêm chuẩn trên nền mẫu sữa bột và tiến hành phân tích 06 mẫu lặp, hàm lượng của các chất trong dung dịch thêm chuẩn trong phụ lục 2. Độ đúng và độ chụm của phương pháp được đánh giá thông qua độ thu hồi chất chuẩn và độ lặp lại của phương pháp phân tích.
Phân tích mẫu thực tế
Sau khi đánh giá phương pháp phân tích đảm bảo yêu cầu về độ thu hồi và độ lặp lại cho phương pháp phân tích Dioxin theo phương pháp tiêu chuẩn USEPA 1613, chúng tôi tiến hành phân tích mẫu thực tế.