Để xác định độ chụm và độ đúng của phương pháp phân tích, chúng tôi tiến hành thí nghiệm như sau: Tiến hành thí nghiệm lặp 6 lần trên nền mẫu trắng (mẫu lạc đã được phân tích không chứa chất cần phân tích) thêm chuẩn ở mức nồng độ 3ppb. Kết quả thu được như sau:
Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại của các aflatoxins
Loại AF Nồng độ AF xác định được (ng/ml)
Aflatoxin B1 Aflatoxin B2 Aflatoxin G1 Aflatoxin G2
1 2,5 2,6 2,9 3,0
2 2,5 2,7 2,8 2,8
4 2,2 2,9 2,5 3,2 5 3,1 3,1 2,4 2,7 6 2,7 2,6 3,0 2,3 Trung bình 2,6 2,8 2,7 2,9 R% 87 93 90 97 SD 0,30 0,23 0,24 0,34 RSD (%) 11 8,1 8,9 12
Nhận xét: Độ lặp lại của phép đo với khoảng nồng độ kể trên có RSD % trong
khoảng 8,1 ÷ 12% và hiệu suất thu hồi đạt 87 - 97% nằm trong giới hạn cho phép của AOAC (đạt yêu cầu).
Ngoài ra, để xác định độ đúng chúng tôi thực hiện xác phân tích mẫu chuẩn (RM) là mẫu tham gia thử nghiệm liên phòng quốc tế của Singapore tổ chức - Food Safety Division, Health Sciences Authority có mã số 16 với chứng nhận (Phụ lục III), sắc đồ mẫu liên phòng (Phụ lục IA: hình 7). Kết quả được trình bày trong bảng sau:
Bảng 3.6. Kết quả tham gia thử nghiệm liên phòng của các aflatoxins
Thông số Giá trị đúng Kết quả PTN Hiệu suất z-score
Aflatoxin B1 4,77 µg/kg 6,1 µg/kg 80 1,3
Aflatoxin B2 0,19 µg/kg ND (0,1 µg/kg) 80 2,3*
‘*’ Giá trị z-score được tính toán dựa trên báo cáo về giới hạn phát hiện của phương pháp (Giới hạn phát hiện của phương pháp mà phòng thí nghiệm thẩm định là 0,1 µg/kg)
Nhận xét:Kết quả phân tích mẫu chuẩn cho thấy giá trị tuyệt đối của Zscore< 3,
AF có hàm lượng cao cho kết quả rất sát với kết quả thực (Zscore gần 1). Nhưng với các AFB2 có hàm lượng thấp, Zscore tương đối cao do hàm lượng không năm trong giói hạn LOQ của phương pháp (LOQ AFB2 = 0,3). Tuy nhiên theo quy định về Zscore thì kết quả nói trên vẫn được chấp nhận.