Bước 1: Cân mẫu thức ăn cho vào keo ủ tối màu, cẩn thận tránh làm vƣơng vảy mẫu.
Bước 2: Pha dung dịch đệm. Dung dịch đệm đƣợc sử dụng trong thí nghiệm theo mô tả của Tilley and Terry (1963).
Dung dịch đệm sau khi pha xong đƣợc sục khí CO2 cho đến khi chuyển sang trong suốt. Sau khi sục khí xong, để thùng chứa dung dịch vào bồn ủ khoảng 15 phút, nhiệt độ trong bồn đƣợc giữ ổn định ở 38oC trƣớc khi sử dụng để tạo nhiệt độ thích hợp cho VSV trong dạ cỏ.
Bảng 3.3: Lƣợng cân các hóa chất trong 1 lít dung dịch đệm
Bước 3: Lấy dịch dạ cỏ. Dịch dạ cỏ đƣợc lấy thông qua lỗ dò của bò, dịch dạ cỏ đã lấy đƣợc đựng trong bình giữ nhiệt để giữ ấm và chuyển ngay về phòng thí nghiệm. Tại đây dịch dạ cỏ đƣợc lọc qua 4 lớp vải muslin vào bình thủy tinh tối màu, sau đó đem đi sục khí CO2 rồi đậy kín tạo môi trƣờng yếm
STT Hóa chất Lƣợng cân (g/lít) 1 NaHCO3 9.80 2 KCl 0.57 3 CaCl2 0.04 4 Na2HPO4.12H2O 9.30 5 NaCl 0.47 6 MgSO4.7H2O 0.12 7 Cystein 0.25
Trang 30
khí và ủ ấm ở nhiệt độ 38oC trƣớc khi dùng để thực hiện thí nghiệm. Dựa vào số lƣợng đơn vị thí nghiệm và lƣợng thực liệu khi đem ủ là bao nhiêu từ đó ta tính đƣợc lƣợng dạ cỏ cần dùng trong thí nghiệm. Đối với 1gDM thì cần 20 ml dịch dạ cỏ.
Bước 4: Trộn dịch dạ cỏ đã lấy vào dung dịch đệm, trƣớc khi cho hỗn hợp dịch dạ cỏ và dung dịch đệm vào keo ủ chúng ta cần khuấy đều để cho lƣợng VSV phân bố đều. Dùng ống đong, đong 400 ml hỗn hợp dịch dạ cỏ và dung dịch đệm cho vào keo ủ đã có sẵn 4gDM mẫu đã cân, tránh để mẫu dính trên thành keo ủ, đậy kín nắp keo ủ, dùng đất sét làm kín xung quanh kẽ hở giữa nắp keo và miệng keo ngăn không cho không khí đi vào cũng nhƣ khí thoát ra ngoài ảnh hƣởng đến kết quả thí nghiệm.
Dùng ống nhựa loại 2.5 x 4 mm, chiều dài 1m nối keo ủ mẫu với bình đo thể tích khí sinh ra thông qua 2 ru ngoài của ống đƣợc vặn kính hoàn toàn vào 2 nắp của keo ủ và keo đo khí.
Dùng bơm tiêm 50 ml/cc lấy không khí ra khỏi hệ thống thông qua van 3 ngã đƣợc nối vào ống nhựa sao cho mực nƣớc trong bình tia khi đó dâng lên ở mức 100 ml, ngƣng lấy không khí, khóa van ngăn không cho không khí đi vào và đảm bảo khí lƣu thông đƣợc giữa keo ủ và bình đo thể tích khí. Sắp xếp tất cả các keo ủ mẫu vào khung inox cho vào bồn ủ, nhiệt độ ủ đƣợc điều chỉnh ở 38ºC, tiến hành ủ và theo dõi lƣợng khí sinh ra tƣơng ứng với mực nƣớc hạ xuống trong bình đo thể tích khí sau mỗi 3 giờ trong 24 giờ.
pH đƣợc đo bằng pH điện tử: dịch dạ cỏ sau khi lấy cho vào bình giữ nhiệt, sau đó mang về phòng thí nghiệm lọc qua giấy lọc muslin 4 lớp và đo pH ngay.
Bước 5: Tính tỷ lệ tiêu hóa. Mẫu sau khi ủ 24 giờ đem đi lọc bằng túi vải đã đƣợc sấy ở 650C và xác định trọng lƣợng. Mẫu sau khi lọc mang đi sấy ở 1050C cho đến trọng lƣợng không đổi.
Dƣỡng chất trƣớc khi ủ - Dƣỡng chất sau khi ủ Dƣỡng chất trƣớc khi ủ
× 100% TLTH (%) =
Trang 31
Hình 3.1 Keo ủ và bình đo thể tích Hình 3.2 Lọc dịch dạ cỏ
Hình 3.3 Đo pH Hình3.4 Ủ thực liệu
Trang 32