pháp đo mật độ quang
Theo định luật Lambert-Beer, độ lớn của tín hiệu hấp phụ tỉ lệ thuận với nồng độ chất phân tích, các chất khác nhau sẽ hấp thụ tốt ở các bước sóng khác nhau. Trong quá trình nuôi cấy vi sinh vật trên môi trường, khi vi sinh vật phát triển trên môi trường nuôi cấy sẽ làm thay đổi về độ hấp thụ quang của môi trường, có thể dựa vào đó để khả sát khả năng sinh trưởng của vi khuẩn.
Công thức định luật Lambert-Beer: It = I0.10-aCl
Trong đó:
a: hằng số hấp thụ C: nồng độ chất hấp thụ l: Bề dày cuvet
Độ truyền qua: T= It/I0 = 10-aCl
Độ hấp thụ quang: A =log1/T =log 1/10aCl
Trong quá trình sinh trưởng và phát triển của vi khuẩn, mức độ sinh trưởng và phát triển của vi khuẩn được xác định gián tiếp thông qua độ đục của môi trường nuôi cấy. Độ đục tỷ lệ với mật độ tế bào, số lượng tế bào càng nhiều (C càng cao) thì độ đục (A) càng cao.
Khi một pha lỏng có chứa cấu tử không tan tạo nên hệ huyền phù có độ đục, chúng có tác dụng cản trở ánh sáng, làm phát tán chùm ánh sáng tới. Vì vậy có thể dựa vào độ đục để khảo sát khả năng sinh trưởng của vi khuẩn.
Khảo sát khả năng sinh trưởng của vi sinh vật: Tế bào vi sinh vật hấp thụ tốt ở bước sóng 620nm, giá trị mật độ quang đo được ở bước sóng này đánh giá tổng lượng tế bào vi sinh vật có trong mẫu phân tích. Phương pháp này dùng để xác định khả năng sinh trưởng của vi sinh vật theo từng khoảng thời gian nuôi khác nhau.[5], [9],[11]