2.3.1. Trong phòng thí nghiệm
Thực hiện thí nghiệm: sử dụng dung dịch nấm đã pha loãng ở các nồng độ tƣơng ứng, cho thêm chất bám dính Thần H . Sau đó, tiến hành nhúng cùng lúc 30 con rệp sáp (1 lần lặp l i) vào đĩa petri có chứa 20 ml dung dịch nấm bằng dụng cụ nhúng nấm, giữ trong 30 giây rồi vớt ra, chuy n rệp sáp vào đĩa petri lớn chứa giấy thấm và 1-2 lá cà tím có quấn bông gòn ẩm đ giữ độ tƣơi. Nghiệm thức đối chứng đƣợc tiến hành tƣơng tự nhƣng thay dung dịch nấm bằng nƣớc cất.
Thí nghiệm 1: sử dụng nấm Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin đã nuôi cấy trong phòng thí nghiệm. Thí nghiệm đƣợc bố trí theo th thức hoàn toàn ngẫu nhiên với 5 nghiệm thức, 4 lần lặp l i. Mỗi lần lặp l i 30 con rệp sáp.
Nghiệm thức 1 (Bb1): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 2.108 Nghiệm thức 2 (Bb2): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 4.108 Nghiệm thức 3 (Bb3): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 6.108
19
Nghiệm thức 4 (Bb4): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 8.108 Nghiệm thức 5: Đối chứng (nƣớc cất)
Thí nghiệm 2: sử dụng nấm Verticillium sp. đã nuôi cấy trong phòng thí nghiệm. Thí nghiệm đƣợc bố trí theo th thức hoàn toàn ngẫu nhiên với 5 nghiệm thức, 4 lần lặp l i. Mỗi lần lặp l i 30 con rệp sáp.
Nghiệm thức 1 (Ver1): Verticillium sp. nồng độ 2.108 Nghiệm thức 2 (Ver2): Verticillium sp. nồng độ 4.108 Nghiệm thức 3 (Ver3): Verticillium sp. nồng độ 6.108 Nghiệm thức 4 (Ver4): Verticillium sp. nồng độ 8.108 Nghiệm thức 5: Đối chứng (nƣớc cất)
2.3.2. Trong nhà lƣới
Thực hiện thí nghiệm: các bƣớc tiến hành tƣơng tự nhƣ trong phòng thí nghiệm với lƣợng rệp sáp là 40 con. Sau khi thả rệp sáp lên cây cà tím, dùng bình xịt phun đều 40 ml dung dịch nấm cho một lần lặp l i, rồi bao l i. Thay dung dịch nấm bằng nƣớc cất ở nghiệm thức đối chứng.
Thí nghiệm 3: sử dụng nấm Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin đã nuôi cấy trong phòng thí nghiệm. Thí nghiệm đƣợc bố trí theo th thức hoàn toàn ngẫu nhiên với 5 nghiệm thức, 4 lần lặp l i. Mỗi lần lặp l i là 40 con rệp sáp. Mỗi cây cà tím là một lần lặp l i.
Nghiệm thức 1 (Bb1): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 2.108 Nghiệm thức 2 (Bb2): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 4.108 Nghiệm thức 3 (Bb3): Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin nồng độ 6.108 Nghiệm thức 4 (Bb4): Beauveria bassiana (Bals.) Vuilleminnồng độ 8.108
Nghiệm thức 5: Đối chứng (nƣớc cất)
Thí nghiệm 4: sử dụng nấm Verticillium sp. đã nuôi cấy trong phòng thí nghiệm. Thí nghiệm đƣợc bố trí theo th thức hoàn toàn ngẫu nhiên với 5 nghiệm thức, 4 lần lặp l i. Mỗi lần lặp l i là 40 con rệp sáp. Mỗi cây cà tím là một lần lặp l i.
Nghiệm thức 1 (Ver1): Verticillium sp. nồng độ 2.108 Nghiệm thức 2 (Ver2): Verticillium sp. nồng độ 4.108 Nghiệm thức 3 (Ver3): Verticillium sp. nồng độ 6.108
20
Nghiệm thức 4 (Ver4): Verticillium sp. nồng độ 8.108 Nghiệm thức 5: Đối chứng (nƣớc cất)
2.3.3. Phƣơng pháp lấy chỉ tiêu
Ghi nhận chỉ tiêu
Theo dõi tỷ lệ rệp sáp sống, chết sau khi làm thí nghiệm (trong phòng thí nghiệm và nhà lƣới) ở các thời đi m 3, 5, 7, 9 và 12 ngày sau khi xử lý với dung dịch nấm Beauveria bassiana (Bals.) Vuilleminvà Verticillium sp..
Ghi nhận nhiệt độ và ẩm độ khi lấy chỉ tiêu. Tính độ hữu hiệu bằng công thức Abbott:
Độ hữu hiệu (%) = ( ) x 100
Trong đó:
C: số rệp sáp sống ở nghiệm thức đối chứng. T: số rệp sáp sống ở nghiệm thức phun nấm. Tỷ lệ (%) nhiễm nấm trở l i
Thu rệp sáp chết ở các nghiệm thức, đ vào các đĩa petri theo từng nghiệm thức. Các đĩa petri có lót giấy thấm và bông gòn đ t o ẩm độ
Ủ các đĩa có rệp sáp chết trong điều kiện phòng thí nghiệm, sau 7 ngày (k từ lúc thu mẫu) đem ra quan sát đ tính tỷ lệ nhiễm nấm trở l i.
Tỷ lệ nhiễm nấm (%) = x 100
Trong đó:
a: số rệp sáp nhiễm nấm của từng nghiệm thức. b: số rệp sáp bị chết của từng nghiệm thức.
Số liệu đƣợc xử lý và thống kê bằng Excel 2010 và phần mềm SPSS 16.0.
C - T C
a
21
CHƢƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN