Xác định protein bằng phương pháp A280

Một phần của tài liệu Tách chiết enzyme bromelain từ phế liệu vỏ dứa (ananas comosus) bằng phương pháp lọc (Trang 30)

Nguyên lý: Tiến hành đo lượng sản phẩm được tạo thành sau một thời gian nhất định và lượng enzyme đã xác định trước. Protease khi thủy phân các cơ chất protein BSA tạo ra các sản phẩm tan trong dung dịch TCA (Tricloacetic acid).

- Hoạt độ enzyme của chế phẩm được biểu diễn bằng “đơn vị hoạt độ proteolytic”. Một đơn vị hoạt độ proteolytic (UI) là lượng enzyme mà trong một phút ở 30 ºC có khả năng phân giải protein tạo thành các sản phẩm hòa tan trong acid tricloacetic cho phản ứng màu với thuốc thử folin-Ciocalteau tương ứng với một µmol tyrosin

- Hoạt độ riêng của chế phẩm được biểu diễn bằng số đơn vị hoạt độ proteolytic trên một mg protein của chế phẩm (số UI/mg protein).

- Hiệu suất thu hồi protein là tỷ lệ giữa tổng hoạt tính enzyme thu được sau quá trình tinh sạch và tổng hoạt tính enzyme trong mẫu trước khi đem tinh sạch.

- Độ tinh sạch là tỷ lệ giữa hoạt tính riêng của enzyme thu được sau quá trình tinh sạch và hoạt tính riêng của mẫu trước khi đem tinh sạch.

- Đơn vị hoạt độ

Khả năng xúc tác của enzyme được xác định thông qua hoạt độ hoạt động của enzyme. Hoạt độ hoạt động của enzyme thông qua đơn vị hoạt độ

- Đơn vị quốc tế (UI)

Đơn vị hoạt độ quốc tế là lượng enzyme có khả năng xúc tác làm chuyển hóa được 1 µmol cơ chất sau một phút ở điều kiện tiêu chuẩn.

1 UI = 1 µmol cơ chất (10-6 mol)/phút

Hoạt độ riêng: Hoạt độ riêng của chế phẩm enzyme là số đơn vị WI (hoặc một đơn vị Katal) ứng với một militre dung dịch (nếu là dung dịch) hoặc một miligram protein (nếu là bột khô) của chế phẩm enzyme. Khi biết được khối lượng phân tử của enzyme ta hoàn toàn có thể tính được hoạt độ riêng của phân tử.

Hoạt độ riêng của phân tử: Hoạt độ riêng của phân tử enzyme là số phân tử cơ chất được chuyển hóa bởi một phân tử cơ chất được chuyển hóa bởi một phân tử enzyme trong một đơn vị thời gian.

CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Một phần của tài liệu Tách chiết enzyme bromelain từ phế liệu vỏ dứa (ananas comosus) bằng phương pháp lọc (Trang 30)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(63 trang)