Sử dụng phương pháp thống kê mô tảñể xử lý thông tin, ñánh giá các yếu tốảnh hưởng ñến nguồn lây nhiễm Vibrio trong trại sản xuất giống.
Sử dụng phần mềm Excel 7.0 ñể xử lý các số liệu thu thập ñược trong quá trình nghiên cứu - Xác ñịnh tỷ lệ sống NA TCBS BH Nuôi cấy trực tiếp Làm các loại tiêu bản Thực hiện các phản ứng sinh hóa Giọt ép, treo, nhuộm Gram Nuôi cấy tăng sinh Giải phẫu gan tụy Thu chủng VK thuần Mẫu tôm bệnh và tôm khoẻ
Xác ñịnh tên vi khuẩn theo khóa phân loại của Bergey, 1994
Nuôi cấy phân lập
Số lượng tôm thu
Tỷ lệ sống của tôm (%) = x 100
CHƯƠNG 3:
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả xác ñịnh nguồn lây nhiễm và ñề xuất các giải pháp kiểm soát Vibrio
trong sản xuất giống tôm chân trắng tại Ninh Hải-Ninh Thuận
3.1.1. Kết quả ñiều tra tình hình sản xuất, dịch bệnh trên tôm bố mẹ và tôm giống tại Ninh Hải-Ninh Thuận và thu mẫu phân tích một số loài Vibrio có khả năng gây tại Ninh Hải-Ninh Thuận và thu mẫu phân tích một số loài Vibrio có khả năng gây bệnh trên tôm giống
Kết quả ñiều tra tình hình sản xuất giống, dịch bệnh trên tôm bố mẹ cho thấy có 60% số trại sản xuất giống cho biết là người mua tôm giống tại trại phản ánh có hiện tượng tôm bị chết sớm (30-40% số người mua). Trong số này bắt gặp ở cả các công ty lớn và ở cả các trại sản xuất nhỏ. Các trại giống có hệ thống xử lý nước, áp dụng các biện pháp kỹ thuật, sử dụng các loại hóa chất, chế phẩm sinh học khác nhau nhưng tôm giống bán ra khi nuôi vẫn có khả năng bị bệnh.
Tôm giống từ các khu vực sản xuất khác nhau, nguồn gốc tôm bố mẹ khác nhau khi nuôi vẫn bị bệnh hội chứng gan tụy cấp.
Hình 3.1: Tỷ lệ (%) một số bệnh thường gặp trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng tại Ninh Hải-Ninh Thuận
Trong quá trình sản xuất chưa phát hiện tôm giống bị bệnh như tôm thương phẩm. Các bệnh thường gặp trong sản xuất giống tôm là: bệnh ñường ruột, phát sáng,
Tỷ
lệ
%
ñục thân, xù ñầu, dính chân, nấm và nhầy. Trong các bệnh này thì nấm là bệnh thường gặp có tỷ lệ trung bình cao nhất (hình 3.1).
Theo các cơ sở sản xuất thì tôm bố mẹ trước khi ñưa vào sản xuất ñã ñược kiểm tra rất kỹ và ñược sự cho phép của các cơ quan thú y quản lý. Tôm bố mẹ sau khi nhập về ñược lấy mẫu xét nghiệm các bệnh thường gặp và ñược theo dõi 1 tuần nếu không bị bệnh mới ñược cấp phép và ñưa vào sản xuất giống. Không có trại sản xuất nào cho biết là tôm bố mẹ có hiện tượng bị chết tương tự như tôm nuôi thương phẩm mắc bệnh gan tụy. Có 3% số trại cho biết có tôm bố mẹ chết rải rác nhưng không rõ nguyên nhân.
3.1.2. Kết quả khảo sát quá trình xử lý nước, nguồn thức ăn, vệ sinh hệ thống sản xuất, sử dụng hóa chất và chế phẩm sinh học nhằm xác ñịnh nguyên nhân lây xuất, sử dụng hóa chất và chế phẩm sinh học nhằm xác ñịnh nguyên nhân lây nhiễm Vibrio trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
3.1.2.1. Kết quả khảo sát quy trình xử lý nước, việc xử lý nước và kiểm tra Vibrio trong nước ở các trại sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
Kết quả khảo sát cho thấy quy trình xử lý nước ở các trại sản xuất tôm giống
ñược thể hiện ở hình 3.3
Hình 3.2: Sơñồ quy trình xử lí nước tại các trại sản xuất giống tôm chân trắng tại Ninh Hải-Ninh Thuận
A: Quy trình xử lý nước chỉ sử dụng hóa chất không sử dụng chế phẩm sinh học; B: Quy trình xử lý nước sử dụng hóa chất kết hợp với chế phẩm sinh học.
ðiều chỉnh môi trường Nước biển Bể lọc Bể chứa Bể lọc Bể nuôi A Nước biển lBể ắng Hóa chất diệt khuẩn Bể lọc thô Chế phẩm sinh học Bể lọc tinh Bể chứa B ể nuôi B
Quy trình xử lý nước trong các trại sản xuất giống tôm thẻ chân trắng tại Ninh Hải- Ninh Thuận cho kết quả khá hiệu quả trong việc ngăn chặn sự lây lan nhiễm khuẩn Vibrio trong quá trình sản xuất giống. Hiệu quả này cao hơn ñối với các trại có xử dụng chế phẩm sinh học trong quy trình xử lý nước trước khi ñưa vào sản xuất giống.
Kết quảñiều tra về xử lý nước trong quá trình sản xuất giống tôm thẻ chân trắng cho thấy xử lý nước là khâu rất quan trọng trong quá trình sản xuất giống vì thế khâu này ñược quản lý rất chặt chẽ từ khâu bơm nước vào ñến giải quyết nguồn nước thải sau khi ương nuôi. Hệ thống bể lọc, bể nuôi vỗ, bể ñẻ, bể ương nuôi ấu trùng,... ñều
ñược che chắn, sục khí ñảm bảo chất lượng kỹ thuật. Có 100% các trại giống ñều xử lý nguồn nước trước khi ñưa vào nuôi tôm bố mẹ và ương nuôi ấu trùng, tuy nhiên hầu hết các trại ñều không kiểm tra chất lượng nước trước khi ñưa vào bể nuôi chỉ khoảng 10-13% có kiểm tra (bảng 3.1).
Bảng 3.1: Kết quảñiều tra việc xử lý nước và kiểm tra Vibrio trong nước ở các trại sản xuất giống (n=30) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Nước giai ñoạn nuôi Tỷ lệ trại có xử lý nước (%)
Tỷ lệ trại kiểm tra Vibrio trong nước trước khi sản xuất giống
(%)
Tôm bố mẹ 100 10
Ương nuôi ấu trùng 100 13
Ghi chú: n-số trại ñiều tra
ðối với nguồn nước sau quá trình sản xuất giống thì nước ñược thải ra hố ga ở
các công ty lớn thì nguồn nước này sẽñược xử lý bằng Clorin trước khi thải ra ngoài trại sản xuất. Tuy nhiên, vẫn có một số trại sản xuất nhỏ nước không tiến hành xử lý nước sau sản xuất trước khi thải ra ngoài môi trường. Với các bể có “sự cố” thì 100% các cơ sở sản xuất ñều xử lý nước trước khi thải ra ngoài môi trường.
3.1.2.2. Kết quả khảo sát việc kiểm soát thức ăn trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
Kết quả từ bảng 3.2 cho thấy chỉ có 10% các trại sản xuất có kiểm tra các chỉ tiêu vi sinh ñối với nguồn thức ăn trong quá trình nuôi tôm bố mẹ và ương nuôi tôm giống. Những thức ăn này là nguồn thức ăn tươi sống như dời, hầu, mực trong nuôi tôm bố
mẹ và Artemia, tảo tươi trong quá trình ương nuôi ấu trùng. Còn các loại thức ăn tổng hợp thì các trại ñều không kiểm tra và xử lý trước khi ñưa vào bể cho ăn. ðây cũng có
thể là nguồn lây nhiễm Vibrio trong trại sản xuất giống vì thức ăn cho tôm bố mẹ chủ
yếu là thức ăn tươi sống nên nếu không ñược kiểm tra và xử lý rất dễ là nguồn lây nhiễm sang ấu trùng.
Bảng 3.2. Kết quảñiều tra việc kiểm tra và xử lý thức ăn trong quá trình sản xuất giống tôm thẻ chân trắng (n=30)
Thức ăn ở các giai ñoạn nuôi
Kiểm tra các chỉ tiêu vi sinh (%)
Xử lý trước khi ñưa vào bể (%)
Tôm bố mẹ 10 30
Uơng nuôi ấu trùng 10 0
Ghi chú: n-số trại ñiều tra
3.1.2.3. Kết quả khảo sát sử dụng hóa chất trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
Bảng 3.3: Các loại hóa chất diệt khuẩn thường dùng trong sản xuất tôm giống (n=30)
Loại Liều lượng Công dụng Giai ñoạn
sử dụng Tỷ lệ (%) Aquasept A 1 viên / 800 - 1200 lít nước - Khử trùng nước, có khả năng diệt ñược tất cả các loại vi khuẩn, vi rút gây bệnh lan truyền qua môi trường nước. Sử dụng trong bể lắng. 80 Alkaline 5 – 10 kg/1000m3. - Giúp pH ổn ñịnh. - Tăng ñộ cứng trong nước Dùng trong bể lắng. 90 Iodine 1 – 5 g/m3 nước.
- Diệt khuẩn trong nước bể
nuôi, sát trùng dụng cụ…
Vệ sinh bể,
dụng cụ bể 100
Formalin - Diệt khuẩn, nguyên sinh
ñộng vật trong nước bể nuôi, sát trùng dụng cụ nuôi tôm, cá.. Xử lý nước, dụng cụ,… 100 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Clorin 20-70ppm - Diệt khuẩn, nguyên sinh
ñộng vật trong nước bể
nuôi, sát trùng dụng cụ
Xử lý nước,
dụng cụ,… 100
EDTA 10ppm - Xử lý kim loại Xử lý nước 100
Virkon 100ppm - Diệt khuẩn Vệ sinh bể 90
Kết quả từ bảng 3.3 cho thấy 100% các trại sản xuất giống tôm thẻ chân trắng trên ñịa bàn Ninh Hải-Ninh Thuận ñều sử dụng hóa chất ñể xử lý nước trước và sau khi sản xuất giống. Các loại hóa chất này ñược dùng cả trong việc vệ sinh trại, dụng cụ
sản xuất,… Danh mục các loại hóa chất thường dùng trong sản xuất giống tôm thẻ
chân trắng ñược thể hiện ở bảng 3.3.
Hóa chất dùng trong các trại sản xuất giống có thểñược chia làm 2 loại có chức năng khác nhau:
- Loại 1: là các hóa chất có chức năng diệt khuẩn, sát trùng như clorin, iodin, formol, Aquasept A
- Loại 2: là những chất dùng ñểổn ñịnh môi trường, trung hòa các kim loại nặng có trong nước như: EDTA, Alkaline
3.1.2.4. Kết quả khảo sát việc sử dụng chế phẩm sinh học trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
Hiện nay, trong quá trình sản xuất giống 100% cơ sở sản xuất có sử dụng chế
phẩm sinh học. Các loại chế phẩm thường ñược sử dụng (liều lượng, công dụng, giai
ñoạn sử dụng) trong sản xuất giống ñược thể hiện ở bảng 3.4. Các loại chế phẩm sinh học này ñược chia làm 2 nhóm:
- Nhóm 1: xử lý môi trường, ổn ñịnh oxy, pH. Nhóm này bao gồm một số sản phẩm chứa Nitrobacter, Nitrosomonas, Bacilus licheniformis.
- Nhóm 2: trợ giúp tiêu hóa, phòng bệnh ñường ruột. Nhóm này bao gồm một số sản phẩm chứa Bacilus subtilis, lactobacilus,...và một số enzyme proteaza, amylaza, lipaza.
Quy trình chung sử dụng chế phẩm sinh học trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng
ñược thể hiện ở hình 3.4
Hình 3.3: Sơñồ quy trình sử dụng chế phẩm sinh học ở các cơ sở sản xuất giống tôm thẻ chân trắng tại Ninh Hải-Ninh Thuận
Nước biển sau
xử lý
Nauplii Zoae Mysis Postlarvae
Chế phẩm sinh học 1 Chế phẩm sinh học 2 Chế phẩm sinh học 3 Chế phẩm sinh học 4
Bảng 3.4: Các loại chế phẩm sinh học sử dụng trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng (n=30)
Tên Liều lượng Công dụng Giai ñoạn sử dụng BIOTONIC 5g/m3. - Khử ñộc, diệt khuẩn, cải
thiện chất lượng nước, tăng tính ổn ñịnh của nước.
- Tăng khả năng miễn dịch cho tôm. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Sau xử lí cơ học và hóa học
- Sau khi thay nước giữa các giai ñoạn Zoae, Mysis, Postlarvae.
ET800 1g/m3 - Cung cấp vitamin giúp nâng cao sức khoẻ của ấu trùng tôm. - Giúp tôm lột xác ñồng loạt, phát triển nhanh. - Ngăn ngừa viêm ñường ruột, ngừa và chống sốc cho ấu trùng.
- Trước khi thả Nauplius. - Giai ñoạn Zoae và Mysis mỗi ngày dùng 1 lần.
- Giai ñoạn Post larvae: 2-3 ngày/lần.
- Sau khi thay nước. Men DORAY 1g/m3 - Bổ sung các sinh vật có lợi,
ức chế sự phát triển của các vi khuẩn gây bệnh. - Giảm nồng ñộ khí ñộc mmoniac (NH3) thải ra từ phân của cá. - Kháng hóa các chất bẩn hữu cơ trên nền ñáy. Hạn chế
ô nhiễm môi trường.
- Sau mỗi lần thay nước.
Men BIOTEC A 5 – 10 g/10kg thức ăn. - Phòng và trị các bệnh như phân trắng, tiêu chảy. - Giúp tôm hấp thụ tốt thức ăn, giảm hệ số FCR.
- ðường ruột tôm to, ñồng
ñều, không ñứt quãng.
- Sử dụng trong các giai
ñoạn Mysis, Postlavae.
ZP – 25 2 – 5
mg/kg
- Giúp ấu trùng tôm tiêu hoá tốt. - Cứ 2 ngày dùng một lần Men EPIZYM – G2 1g/m3 - Tăng sức ñề kháng. - Giúp tôm hấp thụ tốt thức ăn. - Từ giai ñoạn Mysis ñến giai ñoạn Postlavae. YUDO 005 1g/m3 - Giảm thiểu NH3 trong môi
trường nước.
- Phân hủy mùn bã hữu cơ, chất thải của tôm
- Dùng sau mỗi lần thay nước.
H Aqua 3ppm - Zoea, Mysis và PL
TOP 35 2g/hồ/ngày - Vi sinh ñường ruột - Mysis, PL
Vibrotech 10ppm - Mysis, PL
Các nhóm chế phẩm ñược sử dụng xen kẽ hay phối hợp trong quá trình sản xuất tôm giống. Tuy nhiên, ít gặp nhóm chế phẩm sinh học dùng ñể kích thích miễn dịch, cạnh tranh ñối kháng với Vibrio (chẳng hạn các chế phẩm chứa các chủng Baciluss subtilis BT23, Baciluss subtilis E20, Pseudomonas sp. I-2,...).
Quy trình sử dụng chế phẩm sinh học của các trại tương ñối ổn ñịnh, sử dụng linh hoạt các chế phẩm sinh học ñặc hiệu, phát huy lợi ích của chế phẩm sinh học trong quá trình ương nuôi nhằm nâng cao chất lượng nước, giúp ấu trùng tôm tiêu hóa tốt hơn, tăng cường sức ñề kháng cho tôm giảm nguy cơ mắc bệnh trên tôm. Tuy nhiên, quy trình sử dụng chế phẩm sinh học tại thời ñiểm khảo sát mang lại hiệu quả chưa rõ ràng trong việc cải thiện và hạn chế việc lây nhiễm Vibrio trong các cơ sở sản xuất giống tôm.
3.1.2.5. Kết quả ñiều tra việc theo dõi các chỉ tiêu chất lượng nước tại cơ sở sản xuất giống
Các yếu tố môi trường nước là chỉ tiêu quan trọng trong việc sản xuất giống tôm chân trắng tuy nhiên các trại sản xuất chủ yếu mới chỉ quan tâm ñến các yếu tố về môi trường như nhiệt ñộ, ñộ mặn, pH và ñộ kiềm. chỉ có 10% số trại ñiều tra của các công ty lớn có kiểm tra các yếu tố vi sinh của nguồn nước trước khi ñưa vào thả nuôi bảng 3.5.
Bảng 3.5: Tỷ lệ số cơ sở sản xuất giống tôm thẻ chân trắng theo dõi các chỉ tiêu chất lượng nước tại Ninh Hải-Ninh Thuận (n=30)
Nguồn nước cấp Nguồn nước thải STT Chỉ tiêu theo dõi
Tần số bắt gặp Tỷ lệ (%) Tần số bắt gặp Tỷ lệ (%) 1 Nhiệt ñộ 30/30 100 0/30 0 2 pH 30/30 100 0/30 0 3 ðộ mặn 30/30 100 0/30 0 4 ðộ kiềm 30/30 100 0/30 0 5 Vi khuẩn HKTS 3/30 10 0/30 0 6 Vibrio TS 3/30 10 0/30 0 7 Khác 0/30 0 0/30 0 Ghi chú: n-số trại khảo sát; (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.1.3. Kết quả phân tích mẫu ñánh giá nguồn lây nhiễm Vibrio trong sản xuất giống tôm thẻ chân trắng ở Ninh Hải - Ninh Thuận
3.1.3.1. Kết quả phân tích 1 số loài Vibrio có khả năng gây bệnh trên tôm giống tại các trại sản xuất giống tôm thẻ chân trắng tại
Bảng 3.6: Tần số bắt gặp 1 số loài Vibrio ở mẫu PL thu tại các trại sản xuất giống tôm thẻ chân trắng tại Ninh Hải-Ninh Thuận (n=30)
Tác nhân Tần số bắt gặp Tỷ lệ (%) V. alginolyticus 16/30 53,3 V. parahaemolyticus 7/30 23,3 V. vulnificus 10/30 33,3 V. harveyi 4/30 13,3 V. cholerae 6/30 20,0 V. anguillarum 5/30 16,68 Ghi chú: n-số trại khảo sát; Tỷ lệ %: số trại có sử dụng
Kết quả từ bảng 3.6 cho thấy 3 loài vi khuẩn V. alginolyticus, V. parahaemolyticus và V. vulnificus có tỷ lệ bắt gặp tương ñối cao tại các trại sản xuất tôm giống tại Ninh Hải-Ninh Thuận. ðây là những vi khuẩn thường xuyên ký sinh và gây bệnh trên các
ñối tượng nuôi trồng thủy sản. Theo Bùi Quang Tề (2003) , ðỗ Thị Hòa và cộng sự