B. NỘI DUNG
3.3.1. Phân lập các sesquiterpen lacton
- Trong các terpenoid các hợp chất có vòng lacton mà đặc biệt là sesquiterpen lacton chiếm một ví trí quan trọng vì nhiều ứng dụng của chúng trong y học cũng như nông nghiệp. Cụ thể: chúng có tác dụng độc tế bào, kháng ung thư, kháng trùng, diệt côn trùng và diệt nấm.
- Sesquiterpen lacton phân bố chủ yếu trong các cây thuộc thảo và cây bụi. Đặc biệt tập trung trong họ Aeteraceae. Trong cây chúng tập trung chủ yếu trong lá, hoa, nói chung là các bộ phân trên mặt đất.
- Các sesquiterpen lacton là chất phân cực trung bình, chúng tan tốt trong CHCl3
và dietyl ete, tan ít hơn trong Metanol và etanol lạnh nhưng tan nhiều ở nóng. Dựa vào tính chất này, người ta chiết sesquiterpen lacton theo các cách sau:
a> Chiết bằng CHCl3
Chiết soxhlet bằng ete dầu để loại béo
Chiết với CHCl3 cất thu hồi CHCl3
+ Hòa tan cao trong EtOH đun nóng + Thêm lượng tương đương dd Pb(CH3COO)2
5% rồi axit hóa bằng CH3COOH
+ Để yên 1 ngày lọc bỏ tủa + Cất loại etanol
Bột dược liệu khô
Dược liệu đã loại chất béo
Cao CHCl3
Dịch etanol – nước ở môi trường axit
+ Chiết bằng CHCl3
+ Lớp CHCl3 được làm khan, thu hồi dung môi
+ Tinh chế bằng CHCl3 và cho chảy qua cột Alumin axit
b> Chiết bằng cồn và nước nóng
- Bột dược liệu được chiết ngấm kiệt bằng cồn, bã còn lại cho vào nước đun sôi chiết trong 1-2h. Dịch chiết cồn cất thu hồi cồn, cao thu được hòa vào dịch nước.
- Chiết sesquiterpen lacton từ dung dịch nước bằng CHCl3 (hoặc BuOH), cất thu hồi dung môi được cao. Đun cao này với benzen, lọc nóng để lạnh, sesquiterpen lacton sẽ kết tủa, lọc lấy tủa và tinh chế qua cột oxit alumin.
c> Chiết bằng cồn: (EtOH hoặc MeOH)
- Bột dược liệu được chiết nóng với cồn, dịch chiết cất thu hồi bớt cồn còn khoảng ¼ thể tích, thêm vào một lượng tương đương nước. Dung ete dầu chiết loại chất béo vài lần sau đó chiết sesquiterpen lacton bằng CHCl3.
- Dịch chiết CHCl3 rửa nước, làm khan và cất thu hồi dung môi, cắn thu được tiến hành tinh chế như cách 1.
d> Chiết bằng dung dịch kiềm nóng
Vòng lacton trong môi trường kiềm đun nóng sẽ bị mở ra và tạo thành dạng muối tan trong nước. Dung dịch muối này nếu gặp axit vòng lacton sẽ đóng lại và kết tủa trong nước. Dựa vào phản ứng này người ta chiết sesquiterpen lacton bằng nước kiềm đun nóng. Sau đó axit hóa dịch chiết để kết tủa sesquiterpen lacton
Cặn dầu sesquiterpen thô
32