2.2.2.1 Phương pháp xác định đạm tổng số bằng phương pháp Kjeldahl.[3] 2.2.2.2 Phương pháp xác định hàm lượng vitamin C bằng phương pháp chuẩn độ iod.[3]
2.2.2.3 Phương pháp đánh giá khả năng tái hydrat hố của rong sấy.
2.2.2.4 Phương pháp xác định hoạt tính chống oxy hố (TAA) theo phương pháp của Prieto 1999).
Tiến hành
+ Xây dựng đường chuẩn
Pha dung dịch ascorbic 1mg/1ml sau đĩ lấy 30𝜇 l, 50𝜇 l, 80 𝜇l, 100𝜇 l rồi bổ sung nước cất tương ứng cho đủ 1ml sau đĩ thêm 3ml dung dịch A (H2SO4 0.6M, sodium
phosphate 28 mM và ammonium molybdate 4mM) và giữ 90 phút ở 95oC. Sau đĩ đo ở bước sĩng 695nm. Với kết quả đo được thì vẽ đường chuẩn đưa ra phương trình (đường chuẩn cĩ dạng y = ax + b).
+ Tiến hành đo mẫu
Lấy 4 gam bột rong nho đã tái hydrat hĩa (cân ở cân phân tích chính xác đến 10-4
g) sau đĩ cho 10ml nước cất vào cốc bột, bọc giấy bạc trên miệng cốc và ủ mẫu trong khoảng 2 giờ ở nhiệt độ phịng. Sau 2 giờ đem mẫu đi ly tâm, sau đĩ gạn tách dịch và bỏ phần bã đi. Lấy 100μ l dịch rong nho cho vào ống nghiệm, bổ sung 900μ l nước cất sau đĩ thêm 3ml dung dịch A. Sau khi cho dung dịch A, miệng ống nghiệm phải được bịt kín bằng giấy bạc, đem đi lăc đều (sử dụng máy lắc) rồi cho mẫu vào tủ ủ, ủ ở nhiệt độ 95oC, giữ 90 phút. Sau đĩ đem mẫu đi đo ở bước sĩng 695nm với ống đối chứng là 1000μ l nước cất và 3ml dung dịch A.
• Kết quả
Đường chuẩn của rong nho: y= 0.0067x – 0.1053 (1) với R2= 0.9915 (y: là kết quả OD đo được từ bước sĩng 695nm)
Hàm lượng hoạt tính chống oxi hĩa tổng được tính bằng cơng thức A= 𝑥
∗𝑉1 𝑚∗ 𝑉2 (2) Trong đĩ
A: hàm lượng hoạt tính chống oxi hĩa tổng (mg acid ascorbic) x: được tính ra từ cơng thức (1)
V1: là thể tích của dịch rong nho sau khi lọc (ml) V2: là thể tích dịch rong nho lấy xác định (ml)
Hình 2.3 Kết quả xây dựng đường chuẩn