4. đối tượng và phạm vi nghiên cứu của ựề tài
3.1.1. Thành phần NPV ký sinh trên một số loài sâu bộ cánh vảy hại rau ở
hại rau ở vùng Hà Nội và phụ cận
3.1.1. Thành phần NPV ký sinh trên một số loài sâu bộ cánh vảy hại rau ở vùng Hà Nội và phụ cận vùng Hà Nội và phụ cận
NPV của từng loài sâu hại có nhiều nguồn. Các chủng này có thể rất khác nhau về ựộc tắnh ựối với sâu vật chủ của chúng. Có chủng ựộc tắnh trừ sâu hại rất cao, có chủng lại thấp, ựồng thời có những chủng có thể hoàn toàn không có ựộc tắnh. Các chủng NPV ngoài tự nhiên cũng không ngừng biến ựổi. Các chủng virus ở các ựịa ựiểm khác nhau cũng rất khác nhau về ựộ ựộc do ảnh hưởng của nhiều yếu tố như vật chủ, khắ hậu thời tiết, ựất ựai,Ầ Bên cạnh ựó, ựộc tắnh của các chủng thường giảm ựáng kể sau một thời gian ngắn bảo quản và sử dụng. Việc thu thập và lựa chọn những chủng có ựộc tắnh cao là một việc làm cần ựược tiến hành thường xuyên ựể cung cấp nguồn vật liệu cho việc nghiên cứu sản xuất chế phẩm trừ sâu từ virus ựồng thời ựưa vào bảo tồn nguồn quỹ gen vi sinh vật.
Như ựã biết, NPV gây bệnh cho côn trùng thuộc 7 bộ trong ựó, bệnh do NPV gây ra trên côn trùng bộ cánh vảy ựược tập trung nghiên cứu rất nhiều. Vì vậy, chúng tôi ựã tiến hành thu thập các mẫu sâu hại bị nhiễm NPV trên rau ở ngoại thành Hà Nội và phụ cận mang về phòng ly tâm và làm sạch. Các mẫu thu thập ựược ựánh số ựể phục vụ cho việc ựánh giá ựộc tắnh và bảo quản.
Trường đại Học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp 32
Bảng 3.1. Thành phần các nguồn NPV thu thập ựược
trên một số loài sâu hại rau vùng Hà Nội và phụ cận (Viện BVTV, 2013)
TT Mẫu Sâu hại vật chủ Cây trồng địa ựiểm
1 HaNPV1 Heliothis armigera - Viện BVTV
2 HaNPV2 Heliothis armigera Cà chua Vân Nội, đông Anh 3 HaNPV3 Heliothis armigera Cà chua đa Tốn, Gia Lâm 4 SlNPV1 Spodoptera litura - Viện BVTV
5 SlNPV2 Spodoptera litura Cải bắp Vân Nội, đông Anh 6 SlNPV3 Spodoptera litura Cải bắp đa Tốn, Gia Lâm 7 SeNPV1 Spodoptera exigua Hành Tây Tựu, Từ Liêm 8 SeNPV2 Spodoptera exigua Hành Thuần Hưng, Khoái
Châu, Hưng Yên
HaNPV1 và SlNPV1 là các nguồn virus chúng tôi kế thừa lại từ các mẫu của các ựề tài nghiên cứu trước ựây của Viện Bảo vệ thực vật. HaNPV1 và SlNPV1 ựã ựược bảo quản lạnh ở -20oC trong 12 năm. 2 mẫu này ựược sử dụng ựể ựánh giá ựộc tắnh song song với các mẫu ựược thu mới khác nhằm mục ựắch kiểm tra ựộ ựộc sau bảo quản và so sánh với ựộc tắnh của các mẫu NPV mới ựược thu thập.
Sâu xanh bị bệnh thu trên cà chua ở Vân Nội, đông Anh và đa Tốn, Gia Lâm. Sâu chết phần cuối thân bám trên cành, ựầu trúc xuống ựất. Các mẫu sâu xanh chết do virus cơ thể mềm nhũn, thân có màu hồng sữa, các ựốt thân bị sưng phồng lên, lớp da ngoài rất dễ vỡ. Khi lớp biểu bì bị nứt vỡ có dịch trắng mùi thối chảy ra ngoài. Sau khi ựã tiến hành tách chiết virus, các nguồn virus này ựược kắ hiệu là HaNPV2 (ựối với nguồn virus thu tại Vân Nội, đông Anh) và HaNPV3 (nguồn virus thu tại đa Tốn, Gia Lâm).
Trường đại Học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp 33
Các mẫu sâu khoang bị bệnh virus NPV thường hoạt ựộng rất yếu ớt, màu sắc nhạt hơn sâu khỏe. Các ựốt thân bị căng phồng ra, toàn thân như bị trương phù, ựầy nước. Lớp da ngoài mỏng, rất dễ vỡ. Các mô bên trong bị thối rữa, cơ thể mềm nhũn, máu trở nên ựục. Sâu chết có màu nâu sẫm. nhiên, các mẫu sâu khoang bị bệnh cơ thể có màu nâu sẫm. Sâu chết từ dưới cuối bụng dần lên ựến ựầu nên phần cuối thân và ựôi chân sau thường dắnh vào cành lá, ựầu buông thõng xuống ựất. Sâu chết biểu bì nứt vỡ, có dịch thối chảy ra ngoài. Sau khi tách virus từ các mẫu sâu bị bệnh này, các nguồn virus thu tại các 2 ựịa ựiểm trên (bảng 3.1) ựược kắ hiệu là SlNPV2 và SlNPV3.
Tương tự, các mẫu sâu keo da láng bị nhiễm NPV cũng có biểu hiện tương tự là hoạt ựộng yếu ớt, các ựốt thân và toàn cơ thể trương phù, da mỏng rất dễ vỡ, khi vỡ có dịch thối chảy ra ngoài. Cơ thể sâu bị bệnh thường có màu xanh xám. Thường bắt gặp nhiều hơn 1 sâu bệnh trong 1 lá hành. đã tiến hành li tâm và làm sạch NPV thu ựược từ các mẫu sâu bệnh kắ hiệu là SeNPV1 và SeNPV2 tương ứng với 2 nguồn virus ựược thu mới trên sâu xanh da láng hại hành tại Tây Tựu, Từ Liêm và Thuần Hưng, Khoái Châu, Hưng Yên.
Nhận thấy khi so sánh màu sắc và mùi ựặc trưng của các nguồn HaNPV1, SlNPV1 ựã qua bảo quản và các nguồn HaNPV2, HaNPV3, SlNPV2, SlNPV3, SeNPV1, SeNPV2 mới ựược thu thập không nhận thấy có sự khác biệt.
Trường đại Học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp 34
Hình 2. Các nguồn NPV thu thập ựược trên sâu xanh, sâu khoang, sâu keo da láng
Như vậy, ngoài 2 nguồn virus ựã có, chúng tôi ựã thu thập mới ựược 6 nguồn virus tại các ựịa ựiểm khác nhau. Các nguồn virus này ựược sử dụng làm vật liệu nghiên cứu cho nội dung ựánh giá ựộc lực của các nguồn virus trên các loài sâu hại nghiên cứu là sâu xanh, sâu khoang, sâu keo da láng ựồng thời ựưa vào bảo quản ựể bảo tồn nguồn gen vi sinh vật.