CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ THẢO LUẬN
3.1.2Đối với nấm Colletotrichum sp
*Khảo sát đường kính khuẩn ty nấm (Bảng 3.3)
Theo bảng 3.3 cho thấy ở thời điểm 2 NSĐKT các nghiệm thức điều cho thấy hiệu quả ức chế đường kính khuẩn ty nấm khác biệt ở mức ý nghĩa 5% trừ dịch trích cỏ Cứt Heo nồng độ 4% (1,22 cm). CaCl2 ở nồng độ 2%, 4% (0,65 cm và 0,58 cm) đều cho hiệu quả ức chế cao tương đương nhau. Dịch trích lá Neem ở nồng độ 4% (0,88 cm) cho hiệu quả vượt trội hơn so với 2 nồng độ còn là 2%, 6% (0,97 cm; Nghiệm thức
Hiệu quả ức chế nấm Aspergillus niger (%)
1NSĐKT 2NSĐKT 3NSĐKT 4NSĐKT CaCl2 – 20 mM 0,74 b 10,83 b 8,57 a 22,89 a CaCl2 – 4 0mM 0,00 c 1,54 c 5,93 a 16,62 a CaCl2 – 60 mM 0,00 c 0,00 c 0,00 b 1,81 c Neem – 2% 9,91 b 25,58 a 19,25 a 31,77 a Neem – 4% 15,27 b 26,92 a 18,62 a 23,16 a Neem – 6% 24,05 a 30,85 a 24,09 a 31,93 a Cỏ Cứt Heo – 2% 0,00 c 11,03 b 8,60 a 19,44 a Cỏ Cứt Heo – 4% 1,85 b 18,01 b 11,49 a 7,89 b Cỏ Cứt Heo – 6% 10,21 b 28,12 a 24,52 a 24,84 a Đối chứng 0,00 c 0,00 c 0,00 b 0,00 c Mức ý nghĩa * * * * CV(%) 12,92% 11,94% 11,37% 18,75%
24
1,10 cm). Dịch trích cỏ cứt heo ở các nồng độ 2%, 4% (0,53 cm và 0,62 cm) đều cho hiệu quả ức chế tương đương nhau so với đối chứng (1,27 cm).
Thời điểm 3 NSĐKT, khả năng ức chế của CaCl2 không tốt như 2 NSĐKT, chỉ còn nồng độ 20 mM (1,55 cm) cho hiệu quả ức chế khác biệt ở mức ý nghĩa 5%. Dịch trích lá Neem tiếp tục cho thấy hiệu quả ức chế khác biệt ý nghĩa và nồng độ hiệu quả nhất vẫn là 4% (1,12 cm) so với 2% (1,27 cm), 6% (1,23 cm). Dịch trích cỏ Cứt Heo ở nồng độ 6% (1,42cm) vẫn cho thể hiện ức chế cao hơn nồng độ 2% (1,53 cm), 4% (1,57 cm) nhưng đều cho hiệu quả ức chế khác biệt ý nghĩa so với đối chứng (1,82 cm).
Sang đến 4 NSĐKT, CaCl2 khả năng ức chế tăng trở lại, tất cả các nồng độ đều có hiệu quả ức chế khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng (3,65 cm) và nồng độ 20 mM (2,30 cm) tiếp tục cho hiệu quả ức chế cao hơn nồng độ 40 mM (2,62 cm), 60 mM (2,58 cm). Dịch trích lá Neem vẫn thể hiện được khả năng ức chế khác biệt ý nghĩa, tại nồng độ 4% (1,53 cm), 6% (1,58 cm) có hiệu quả ức chế tương đương nhau và cao hơn nồng độ 2% (168 cm). Dịch trích cỏ Cứt Heo ở tất cả các nồng độ đều cho hiệu quả ức chế khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng (3,65 cm), nồng độ 6% (1,70 cm) vẫn cho hiệu quả ức chế cao nhất.
Tại các thời điểm 5 NSĐKT, 6 NSĐKT, 7 NSĐKT, tất các nghiệm thức đều duy trì được hiệu quả ức chế sự phát triển đường kính khuẩn ty nấm khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng. CaCl2 nồng độ 20 mM vẫn cho hiệu quả ức chế cao nhất, dịch trích lá Neem nồng độ 4%, 6% có hiệu quả ức chế tương đương nhau và cao hơn nồng độ 2%. Dịch trích cỏ Cứt Heo có hiệu quả ức chế tương đương nhau giữa các nồng độ.
*Tóm lại: Như vậy, có thể thấy tất cả các nghiệm thức thí nghiệm đều có khả năng ức chế sự phát triển của nấm Colletotrichum sp vào thời điểm 4 NSĐKT và tính ổn định cao và kéo dài. Dựa vào kết quả tại bảng 3.3 tạm thời ta chọn được 3 nghiệm thức đại diện cho hai loại dịch trích và CaCl2 có khả năng ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm Colletotrichum sp hiệu quả nhất và có tính ổn định kéo dài là: CaCl2
(20 mM), dịch trích lá Neem (4%), dịch trích cỏ Cứt Heo (6%). Những nồng độ này được xem là có triển vọng và được chọn làm tác nhân phòng trừ sinh học với nấm Colletotrichum spp. trong các thí nghiệm tiếp theo.
25
Bảng 3.3 Đường kính (cm) khuẩn ty nấm Colletotrichum sp dưới sự ảnh hưởng của của nồng
độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2
Nghiệm thức Đường kính khuẩn ty nấm Colletotrichum sp
2NSĐKT 3NSĐKT 4NSĐKT 5NSĐKT 6NSĐKT 7NSĐKT CaCl2 – 20 mM 0,65 e 1,55 b 2,30 c 2,80 c 3,08 c 3,65 c CaCl2 – 40 mM 0,58 e 1,90 a 2,62 b 3,02 b 3,58 b 4,11 b CaCl2 – 60 mM 1,08 b 1,83 a 2,58 b 3,05 b 3,68 b 4,33 b Neem – 2% 0,97 c 1,27 d 1,68 e 2,13 e 2,77 d 2,90 e Neem – 4% 0,88 d 1,12 e 1,53 f 2,02 e 2,43 e 2,90 e Neem – 6% 1,10 b 1,23 d 1,58 f 2,03 e 2,50 e 2,93 e Cỏ Cứt Heo – 2% 0,53 e 1,53 b 1,93 d 2,38 d 2,77 d 3,23 d Cỏ Cứt Heo – 4% 1,22 a 1,57 b 2,00 d 2,43 d 2,83 d 3,21 d Cỏ Cứt Heo – 6% 0,62 e 1,42 c 1,70 e 2,25 d 2,65 d 3,35 d Đối chứng 1,27 a 1,82 a 3,65 a 3,72 a 4,13 a 4,16 a Mức ý nghĩa * * * * * * CV(%) 14,36% 15,33% 10,56% 7,02% 6,84% 6,83%
Ghi chú: * khác biệt mức ý nghĩa 5%
Các số liệu trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay nhiều chữ cái khác nhau thì khác biệt không ý nghĩa thống kê ở mức 5% qua phép thử Duncan.
Đối chứng CaCl2-20 mM
Lá Neem-4% Cỏ Cứt Heo-6%
26
* Khảo sát hiệu quả ức chế khuẩn ty nấm Colletotrichum sp (Bảng 3.4)
Khi khảo sát hiệu quả ức chế (HQƯC) khuẩn ty nấm Colletotrichum sp dưới sự ảnh hưởng của nồng độ và các thời gian xử lý của hai loại dịch trích thực vật và CaCl2. Nhìn chung vẫn ghi nhận được HQƯC khuẩn ty nấm Colletotrichum sp kéo dài suốt thời gian khảo sát và có thời điểm HQƯC đạt mức cao nhất là 58% (4NSĐKT).
Thời điểm 2NSĐKT, CaCl2 nồng độ 20 mM (48,13%), 40 mM (53%) ghi nhận được HQƯC cao trên 48% và khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng (0%), nhưng ở nồng độ 60 mM (13,01%) có HQƯC khác biệt không ý nghĩa so với đối chứng. Dịch trích từ lá Neem ghi nhận được hai nồng độ đạt HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng là nồng độ 2% (22,18%) và 4% (29,38%). Dịch trích từ cỏ Cứt Heo có HQƯC khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng là hai nồng độ 2%, 6% (57,23%; 51,28%) đạt HQƯC rất cao trên 50%.
Tại thời điểm 3NSCK, HQƯC khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng chỉ được ghi nhận ở CaCl2 nồng độ 20 mM (12,61%). Đối với dịch trích lá Neem đều ghi nhận được HQƯC khác biệt ý nghĩa tại các nồng độ 2%, 4%, 6% lần lượt là 29,79%, 37,76% và 31,16%. Dịch trích cỏ Cứt Heo đều cho HQƯC khác biệt ý nghĩa, nồng độ 6% (21,96% ) cho HQƯC cao hơn nồng độ 2% (13,84%) và 4% (12,68%).
Đến thời điểm 4NSĐKT thì tất cả các loại dịch trích thực vật và CaCl2 đều cho HQƯC khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng, CaCl2 nồng độ 20 mM (37%) có HQƯC cao hơn 2 nồng độ 40 mM (28,24%) và 60 mM (29,04%). Dịch trích từ lá Neem cho HQƯC rất cao trên 50%, ở nồng độ 4% đạt được HQƯC lên đến 58% và tại hai nồng độ 2%, 6% cũng cho HQƯC cao tương ứng là 53,85%, 56,57%. Dịch trích cỏ Cứt Heo nồng độ 6% (53,51%) tiếp tục cho HQƯC cao nhất so với nồng độ 2% (46,83%) và 4% (45,16%).
Vào các thời điểm 5NSĐKT, 6NSĐKT, 7NSĐKT thì CaCl2 nồng độ 20 mM tiếp tục là nồng độ có HQƯC cao hơn so với 2 nồng độ 40mM, 60mM. tuy nhiên HQƯC đã giảm hơn dần theo từng thời điểm (31,01%; 25,42%; 20,73%) và CaCl2
nồng độ 60 mM tại thời điểm 7NSĐKT thì HQƯC đã không còn khác biệt ý nghĩa so với đối chứng. Dịch trích từ lá Neem và cỏ cứt heo tuy HQƯC đã giảm nhưng vẫn khác biệt ý nghĩa 5% so với đối chứng.
*Kết luận: Với mục đích khảo sát HQƯC của nồng độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2 đối với nấm Colletotrichum sp ta chọn được CaCl2 nồng độ 20 mM, dịch trích từ lá Neem ở nồng độ 4% và cỏ Cứt Heo nồng độ 6% là 3 nghiệm thức có HQƯC cao nhất là có thời gian kéo dài hơn so với các nghiệm thức còn lại.
27
Bảng 3.4 Hiệu quả ức chế (%) khuẩn ty nấm Colletotrichum sp dưới sự ảnh hưởng của nồng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2.
Ghi chú: * khác biệt mức ý nghĩa 5%
Các số liệu trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay nhiều chữ cái khác nhau thì khác biệt không ý nghĩa thống kê ở mức 5% qua phép thử Duncan
* Sơ kết: dựa vào kết quả khảo sát đường kính khuẩn ty nấm và hiệu quả ức chế ta chọn được CaCl2 (20 mM), dịch trích lá Neem (4%) và dịch trích cỏ Cứt Heo (6%) là ba nồng độ cho hiệu quả ức chế tốt nhất với nấm Colletotrichum sp dùng để bố trí thí nghiệm tiếp theo.
3.2 ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CỦA VIỆC XỬ LÝ DỊCH TRÍCH LÁ NEEM, CỎ CỨT HEO VÀ CACL2 SAU KHI LÂY BỆNH NHÂN TẠO TRÊN TRÁI