CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ THẢO LUẬN
3.1KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG ĐỘ VÀ CÁC THỜI GIAN XỬ LÝ CỦA CÁC LOẠI DỊCH TRÍCH THỰC VẬT VÀ CACL 2 ĐẾN SỰ PHÁT
TRIỂN KHUẨN TY CỦA NẤM Aspergillus niger VÀ NẤM Colletotrichum sp 3.1.1Đối với nấm Aspergillus niger
* Đường kính khuẩn ty nấm (Bảng 3.1)
Theo bảng 3.1 cho thấy ở thời điểm 1 ngày sau đặt khuẩn ty (NSĐKT) đa số các nghiệm thức điều đã cho thấy khả năng ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm
Aspergillus niger. Đối với CaCl2,chưa thể hiện được khả năng ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm mà còn làm tăng khả năng phát triển của nó như nồng độ 40 mM (1,93 cm), 60 mM (1,78 cm) có đường kính lớn hơn so với đối chứng (1,60 cm). Các nồng độ từ dịch trích lá Neem đều ức chế được sự phát triển của khuẩn ty nấm và ở nồng độ 6% (1,23 cm) cho hiệu quả cao hơn nồng độ 2% (1,45 cm), 4% (1,37 cm). Đối với dịch trích cỏ Cứt Heo chỉ ghi nhận được nồng 6% (1,45 cm) là ức chế được sự phát triển của khuẩn ty nấm. Các sự khác biệt điều ở mức ý nghĩa 5% .
Tại thời điểm 2 NSĐKT, CaCl2 chỉ có nồng độ 20 mM (3,68 cm) ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm ghi nhận khác biệt so với đối chứng (4,12 cm), hai nồng độ còn lại vẫn chưa thế hiện được khả năng ức chế hiệu quả đến sự phát triển của khuẩn ty nấm, ở nồng độ 40 mM, 60 mM (4,05 cm và 4,20 cm) tuy có ĐKKT nhỏ hơn đối chứng (4,12 cm) nhưng không cho khác biệt ý nghĩa mức 5%. Đối với dịch trích lá Neem hiệu quả ức chế tiếp tục được duy trì và nồng độ đạt hiệu quả nhất là nồng độ 6% (2,90 cm) so với nồng độ 2%, 4% (3,07 cm và 3,13 cm). Dịch trích từ cỏ Cứt Heo cũng đã thể hiện khả năng ức chế đến sự phát triển của khuẩn ty nấm Aspergillus niger ở tất cả các nồng độ và ở nồng độ 6% (3,02 cm) được thể hiện khả năng ức chế mạnh nhất so nồng độ 2%, 4% (3,68 cm và 3,40 cm). Các sự khác biệt điều ở mức ý nghĩa 5% .
Sang thời điểm 3 NSĐKT, CaCl2 nồng độ 20 mM (5,25 cm) vẫn thể hiện khả năng ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm và ở nồng độ 40 mM (5,40 cm) đã thể hiện được khả năng ức chế khác biệt ý nghĩa so với đối chứng (5,75 cm), ở nồng độ 60 mM (5,98 cm) vẫn không thể hiện khả năng ức chế hiệu quả. Ở dịch trích lá Neem tất cả các nồng độ điều duy trì tốt khả năng ức chế sự phát triển của khuẩn ty nấm và hiệu quả giữa các nồng độ 2%, 4%, 6% là tương đương nhau lần lượt là 4,63 cm; 4,67 cm và 4,35 cm. Đối với dịch trích cỏ Cứt Heo các nồng độ điều duy trì được khả năng ức chế đối với nấm và nồng độ thể hiện mạnh nhất là nồng độ 6% (4,33 cm) so với nồng độ 2% (5,08 cm) , 4% (5,25 cm) và đối chứng (5,75 cm). Các sự khác biệt điều ở mức ý nghĩa 5% .
Đến thời điểm 4 NSĐKT, hiệu quả ức chế vẫn được duy trì khá tốt. CaCl2 ở nồng độ 60 mM vẫn không thể hiện khả năng ức chế đối với sự phát triển của khuẩn
20
ty nấm và ở nồng độ 20 mM (5,82 cm), 40 mM (6,28 cm) vẫn giữ được khả năng ức chế sự phát triển khuẩn ty nấm. Dịch trích lá Neem vẫn giữ được hiệu quả tương đương nhau ở hai nồng độ 2% (5,13 cm), 6% (5,13 cm) so với đối chứng (7,55 cm), ở nồng độ 4% (5,77cm) tuy vẫn giữ được hiệu quả ức chế nhưng đã giảm so với nồng độ 2%, 6%. Dịch trích từ cỏ Cứt Heo nồng độ 4% (6,95 cm) có hiệu quả ức chế giảm so với với nồng độ 2% (6,08 cm), 6% (5,67 cm) nhưng vẫn ghi nhận được khả năng ức chế khác biệt ý nghĩa so với đối chứng (7,55 cm). Các khác biệt đều ở mức ý nghĩa 5% .
Như vậy, có thể thấy khả năng ức chế đối với nấm Aspergillus niger vẫn được duy trì khá tốt đến thời điểm 3 NSĐKT. Tuy nhiên ở nồng độ 4% của cả hai loại dịch trích tuy vẫn giữ được hiệu quả ức chế nhưng hiệu quả đã bắt đầu giảm tại thời điểm 4 NSĐKT. Nhìn chung, từ 9 nghiệm thức khảo sát điều cho thấy được khả năng ức chế với sự phát triển của khuẩn ty nấm Aspergillus niger trừ CaCl2
nồng độ 60 mM. Dựa vào kết quả đã nghi nhận được ở bảng 3.1và kết quả phân tích trên ta bước đầu chọn được 3 nghiệm thức (đại diện cho hai loại dịch trích và CaCl2) có khả năng ức chế cao và ổn định hơn so với các nghiệm thức còn lại. Các nghiệm thức tương ứng là: CaCl2 (20 mM), dịch trích lá Neem (6%), cỏ Cứt Heo (6%). Những nghiệm thức này được xem là có triển vọng và được chọn làm tác nhân phòng trừ sinh học với nấm Aspergillus niger trong các thí nghiệm tiếp theo.
21
Bảng 3.1 đường kính (cm) khuẩn ty nấm Aspergillus niger dưới sự ảnh hưởng
của nồng độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2
Ghi chú: * khác biệt ớ mức ý nghĩa 5%
Các số liệu trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay nhiều chữ cái khác nhau thì khác biệt không ý nghĩa thống kê ở mức 5% qua phép thử Duncan.
Nghiệm thức Đường kính khuẩn ty nấm Aspergillus niger
1NSĐKT 2NSĐKT 3NSĐKT 4NSĐKT CaCl2 – 20mM 1,60 c 3,68 b 5,25 c 5,82 c CaCl2 – 40mM 1,93 a 4,05 a 5,40 c 6,28 c CaCl2 – 60mM 1,78 b 4,20 a 5,98 a 7,40 a Neem – 2% 1,45 f 3,13 d 4,63 d 5,13 d Neem – 4% 1,37 f 3,07 d 4,67 d 5,77 c Neem – 6% 1,23 g 2,90 e 4,35 d 5,13 d Cỏ cứt heo – 2% 1,65 c 3,68 b 5,25 c 6,08 c Cỏ cứt heo – 4% 1,58 c 3,40 c 5,08 c 6,95 b Cỏ cứt heo – 6% 1,45 f 3,02 d 4,33 d 5,67 c Đối chứng 1,63 c 4,12 a 5,75 a 7,55 a Mức ý nghĩa * * * * CV(%) 9,26% 4,70% 6,80% 11,27% Đối chứng CaCl2- 20mM Cỏ Cứt Heo-6% Lá Neem-6%
22 * Khảo sát hiệu quả ức chế (Bảng 3.2)
Khảo sát hiệu quả ức chế (HQƯC) khuẩn ty nấm Aspergillus niger với sự tác động của nồng độ và các thời gian xử lý của hai loại dịch trích thực vật và CaCl2. Nhìn chung HQƯC của các dịch trích thực vật và CaCl2 cho hiệu quả không ổn định qua từng thời gian khảo sát. Kết quả cụ thể được ghi nhận ở bảng 3.2.
Tại thời điểm 1 NSĐKT, CaCl2 chỉ ở nồng độ 20 mM cho HQƯC khác biệt ý nghĩa so với đối chứng (0%) nhưng rất thấp chỉ đạt 0,74%. Đối với dịch trích từ lá Neem tất cả các nồng độ đều cho HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng trong đó nồng độ 6% (24,05%) cho HQƯC cao nhất so với nồng độ 2% (9,91%) và 4% (15,27%). Dịch trích từ cỏ Cứt Heo có 2 nồng độ cho HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng (0%) là 4% (1,85%) và 6% (10,21%). Khác biệt ở mức ý nghĩa 5%.
Sang thời điểm 2 NSĐKT, CaCl2 nồng độ 20 mM vẫn duy được HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng và HQƯC đã tăng lên 10,83% cao hơn rất nhiều so với thời điểm 1 NSĐKT, 2 nồng độ 40 mM, 60 mM vẫn chưa cho thấy HQƯC khác biệt ý nghĩa. Đối với dịch trích từ lá Neem nồng độ 2% (25,58%), 4% (26,92%), 6% (30,85%) cũng ghi nhận được HQƯC tăng lên và cho khác biệt ý nghĩa với đối chứng và ở nồng độ 6% cho HQƯC cao nhất đạt 30,85%. Dịch trích cỏ Cứt Heo cũng đều cho thấy được HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng và ở nồng độ 6% (28,12%) cho HQƯC cao hơn nồng độ 2% (11,03%) và 4% (18,01%). Khác biệt ở mức ý nghĩa 5%.
Vào thời điểm 3 NSĐKT đối với CaCl2 có hai nồng độ là 20 mM và 40 mM đạt HQƯC lần lượt là 8,57%; 5,93% khác biệt ý nghĩa với đối chứng. Đối với dịch trích từ lá Neem ở nồng độ 6% tiếp tục cho HQƯC cao hơn so với nồng độ 2%, 4% lần lượt là 24,09% với 19,25%, 18,62% và cũng khác biệt ý nghĩa với đối chứng (0%). Dịch trích từ cỏ Cứt Heo vẫn duy trì được HQƯC khác biệt ý nghĩa với đối chứng, ở nồng độ 6% tiếp tục cho HQƯC cao hơn so với nồng độ 2%, 4% lần lượt là 24,84% và 19,44%, 7,89%.
Đến thời điểm 4 NSCK. CaCl2 nồng độ 20 mM (22,89%) tiếp tục thể hiện HQƯC cao hơn so với CaCl2 nồng độ 40 mM (16,62%) cho khác biệt ý nghĩa với đối chứng (0%). Dịch trích từ là Neem vẫn giữ được HQƯC ổn định và tương đương nhau nhưng ở nồng độ 2% (31,78%) và 6% (31,93%) HQƯC cao hơn so với nồng độ 4% (23,16%). Dịch trích từ cở cứt heo ở nồng độ 6% (24,84%), nồng độ 2% (19,44%) và 4% (7,89%).
Với mục đích khảo sát khả năng ức chế của nồng độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2 đối với nấm Aspergillus niger theo nhiều khía cạnh khác nhau, dựa trên kết quả ghi nhận về HQƯC ta dễ dàng nhận ra được CaCl2 nồng độ 20 mM cho HQƯC rất sớm ngay từ thời điểm ban đầu và giữ được tính ổn định và HQƯC đã tăng lên 22,89% tại thời điểm 4NSCK,tương tự dịch
23
trích lá Neem nồng độ 6%, cỏ Cứt Heo nồng độ 6% cho thấy HQƯC vượt trội so với các nồng còn lại.
Bảng 3.2 Hiệu quả ức chế (%) khuẩn ty nấm Aspergillus niger dưới sự ảnh hưởng của nồng
độ và các thời gian xử lý của các loại dịch trích thực vật và CaCl2
Ghi chú: * khác biệt mức ý nghĩa 5%
Các số liệu trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay nhiều chữ cái khác nhau thì khác biệt không ý nghĩa thống kê ở mức 5% qua phép thử Duncan. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Tóm lại: dựa vào kết quả khảo sát đường kính khuẩn ty nấm và hiệu quả ức chế ta chọn được CaCl2 (20 mM), dịch trích lá Neem (6%) và dịch trích cỏ Cứt Heo (6%) là ba nồng độ cho hiệu quả ức chế tốt nhất với nấm Aspergillus niger dùng để bố trí thí nghiệm tiếp theo.