I CAM OAN
2. 3B nh Gumboro
3.4.1 Ph ng pháp kim tra virus Gumbor ob ng p hn ng k tta
th ch (Agar gel precipitation, AGP)
Nguyên lý: k t h p c hi u gi a kháng nguyên hòa tan và kháng th t ng
ng s hình thành ph c h p kháng nguyên - kháng th . Ph c h p kháng nguyên - kháng th t n m t m c nh t nh thì có s bão hòa, lúc này s x y ra hi n
ng k t t a.
N u thi u 1 trong 2 thành ph n này thì s k t t a không x y ra. S k t t a bi u hi n b ng ch t c n màu tr ng xám trông r t rõ r t. S k t h p này òi h i u ki n nhi t , pH thích h p và môi tr ng có ch t n gi i.
Chu n b th ch
Hòa tan 1,6g agarose vào 100ml n c sinh lý 0,85%, un cho th ch tan. Sau ó, th ch lên lame m t l p dày kho ng 3mm gi lame nhi t 4 - 100C/10 phút cho th ch ông l i.
Dùng d ng c c th ch b ng kim lo i có ng kính 3mm, c m i l 7 c m, t l gi a và 6 l xung quanh, m t lame c 2 c m.
Ti n hành
L gi a m i c m cho kháng th chu n (xét nghi m ch n oán kháng nguyên), các l xung quanh b trí theo chi u kim ng h , 1 l v trí 12 gi cho kháng nguyên chu n (huy n d ch virus Gumboro) làm i ch ng d ng, 1 l cho kháng nguyên âm tính làm i ch ng âm, 4 l còn l i cho huy n d ch c n ch n oán. Sau ó cho vào
m 370C t 6-24 gi , em ra c k t qu .
c k t qu
N u th y gi a kháng th và huy n d ch c n ch n oán xu t hi n v ch k t t a gi ng nh kháng th chu n và kháng nguyên chu n thì k t lu n ph n ng d ng tính. Ng c l i n u gi a kháng th và huy n d ch c n ch n oán không xu t hi n v ch k t
a thì ph n ng âm tính.
Ng c l i ch n oán m u huy t thanh c a gà có kháng th kháng virus Gumboro, có th làm ph n ng ng c l i b ng cách cho kháng nguyên chu n vào l chính gi a, 1 l v trí 12 gi cho kháng th chu n (kháng th kháng virus Gumboro) làm i ch ng d ng, 1 l kháng th âm tính làm i ch ng âm, các l còn l i cho huy t thanh c n ki m tra. N u th y gi a kháng nguyên chu n và huy t thanh c n ch n oán xu t hi n v ch k t t a màu tr ng gi ng nh gi a kháng nguyên chu n và kháng th chu n thì k t lu n ph n ng d ng tính. Ng c l i, gi a các l huy t thanh c n ch n oán và kháng nguyên c n ch n oán không xu t hi n v ch k t t a nào thì k t lu n ph n ng âm tính.
Hình 3.1 M u th ch dùng làm ph n ng AGP