sinh tổng hợp protease
Việc sàng lọc các dòng vi sinh vật có hoạt tính sinh học mong muốn thƣờng phụ thuộc vào từng sản phẩm cụ thể. Đối với trƣờng hợp tuyển chọn dòng
A. niger sinh enzyme hoạt tính cao có thể tiến hành bằng phƣơng pháp thỏi thạch, đục lỗ trên môi trƣờng thạch có cơ chất cảm ứng. Sau khi ủ trong tủ ấm với nhiệt độ thích hợp, tiến hành đo đƣờng kính của vòng phân giải (Shivakumar, 2012).
Trong trƣờng hợp các dòng đƣợc phân lập và tuyển chọn từ tự nhiên có hiệu suất sinh tổng hợp enzyme mong muốn thấp, phải nâng cao năng suất giống bằng các biện pháp di truyền. Phƣơng pháp có hiệu quả tốt nhất trong việc chọn lọc giống năng suất cao là chọn lọc gây đột biến dƣới tác động mạnh của các tác nhân nhƣ: tia UV, tia X, tia Gamma hoặc sử dụng các hóa chất gây đột biến nhƣ ethylenimin, acid nitric, nitrosoguanidin,… (Lê Gia Hy và Khuất Hữu Thành, 2010). Tuy nhiên, việc áp dụng phƣơng pháp đột biến gene để chọn giống vi sinh vật sinh enzyme thƣờng không nhiều khi so sánh với việc tuyển chọn các dòng vi sinh vật có hoạt tính kháng sinh. Trƣờng hợp chọn lọc tự nhiên trên môi trƣờng đặc hiệu hay đột biến tự nhiên dựa trên sự cạnh tranh của các dòng vi sinh vật sinh enzyme thƣờng đƣợc áp dụng (Zhong - Tao, 2009). Quá trình tuyển chọn dòng A. niger có khả năng sinh tổng hợp protease cũng thƣờng đƣợc thực hiện dựa trên
(i) Tuyển chọn sơ bộ dòng A. niger sinh tổng hợp protease mang hoạt tính cao bằng cách sử dụng môi trƣờng thạch với pH = 5 có bổ sung các thành phần: sau thời gian ủ 24 giờ, ở 30 ± 2°C với đối chứng là nƣớc (Shivakumar, 2012).
(ii) Lên men lỏng trong môi trƣờng Czapeck Dox có 1% casein với thời gian lên men 48 giờ (Coral et al., 2003).