- Phòng bệnh bằng vacxin
g) Sự phân bố của chủng virus PRRSV-HY-09 trong các cơ quan của lợn gây bệnh thực nghiệm chủng PRRSV-HY-
bệnh thực nghiệm chủng PRRSV-HY-09
Phương pháp nhuộm hoá miễn dịch tổ chức (Immunohistochemistry – IHC) được thực hiện trên nguyên tắc sự kết hợp giữa kháng nguyên và kháng thể, phương pháp này cho phép xác định được sự có mặt của virus trong tổ chức bệnh lý bằng việc tạo phức màu nâu đỏ trên lát cắt tổ chức được nhuộm hoá miễn dịch.
Để hiểu được sự phân bố virus trên các cơ quan tổ chức của lợn mắc PRRS, đồng thời làm cơ sở cho việc chọn mẫu bệnh phẩm tiến hành phân lập virus PRRS, chúng tôi tiến hành nhuộm hoá miễn dịch tổ chức sau khi mổ khám lợn với các mẫu phổi, hạch lâm ba, lách, thận, ruột của các lợn thí nghiệm. Kết quả được trình bày trong bảng 4.10.
Bảng 4.10. Sự phân bố virus trong một số cơ quan của lợn được gây nhiễm thực nghiệm chủng virus PRRSV-HY-09
Lợn
Cơ quan Phổi Hạch
lâm ba Lách Gan Thận Ruột Não Tim
Dạ dày
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 66 TN2 +++ +++ ++ + + + + + + TN3 ++ +++ + + - + + + + TN4 ++ ++ + + + + - + - TN5 ++ ++ - + + - + + + TN6 ++ ++ + - + + + + - ĐC1 - - - - ĐC2 - - - - Ghi chú: + Virus phân bốở mức độ ít
++ Virus phân bốở mức độ trung bình +++ Virus phân bốở mức độ nhiều - Không có virus
Kết quả cho thấy các tiêu bản vi thể của các cơ quan ở lợn TN1, TN2 đều xuất hiện màu nâu đỏ đặc trưng, tức là đều có mặt virus PRRS. Nhìn vào bảng 4.10, ta thấy virus phân bố nhiều nhất ở phổi và hạch lâm ba phổi, đặc biệt trong các đại thực bào phế nang và các nang lâm ba. Ở gan, lách, thận, ruột, não virus phân bố với mức độ ít và trung bình. Kết quả của chúng tôi cũng phù hợp với nghiên cứu của Rossow và cs (1998), Titan và cs (2007). Riêng đối với lợn TN3, TN4, TN5, TN6 chúng tôi theo dõi thời gian đào thải của virus ra khỏi cơ thể, sau đó mới tiến hành mổ khám và làm tiêu bản nên các cơ quan không còn hoặc còn rất ít virus.
Đối với lợn đối chứng thì kết quả nhuộm hóa mô không thấy có sự xuất hiện của virus ở các cơ quan.
Như vậy, kết quả nhuộm hóa mô miễn dịch cho thấy sự phân bố của virus ở các cơ quan ở cả 6 lợn được gây bệnh thực nghiệm là khác nhau và cả 6 lợn đều mắc PRRS. Chúng tôi đã gây nhiễm thành công chủng PRRSV-HY-09.
Virus tập trung phân bố nhiều nhất ở phổi và hạch lâm ba ở phổi do virus có ái lực cao với đại thực bào, đặc biệt là đại thực bào vách phế nang ở phổi. Khi vào cơ thể, đích tấn công đầu tiên chính là đại thực bào vách phế nang ở phổi, và
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 67
gây các triệu chứng điển hình ở phổi. Điều này là cơ sở khoa học để giải thích tại sao lợn bị mắc PRRS thường có biểu hiện ho, viêm phổi nặng. Nguyên nhân chính là do virus tập trung ở phổi với số lượng lớn và phá huỷ nghiêm trọng chức năng của phổi vì đích tấn công của vius là các đại thực bào phế nang, tại đây chúng nhân lên và phá huỷ các tế bào này gây nên bệnh tích đặc trưng ở phổi. Kết quả này của chúng tôi phù hợp với Murakami Y, Kato A (1994), Shimizu M, Yamada S (1994).
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68
MỘT SỐ HÌNH ẢNH NHUỘM HÓA MÔ MIỄN DỊCH (IHC)
Hình 4.31. Virus tập trung ở phổi (IHC 10X) Hình 4.32 Virus tập trung ở phổi (IHC 10X) Hình 4.33. Virus tập trung ở hạch (IHC 20X) Hình 4.34. Virus tập trung ở hạch (IHC 20X)
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69
Phần V. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
5.1. Kết luận
Từ những kết quả mà chúng tôi thu thập được qua việc gây bệnh thực nghiệm chủng PRRSV-HY-09 cho lợn, chúng tôi có một số kết luận sau:
1. Chủng PRRSV-HY-09 có độc lực, có khả năng gây Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (PRRS) trên lợn thí nghiệm. Triệu chứng lâm sàng chủ yếu là sốt, ho, khó thở, giảm ăn, phát ban, sưng phù mí mắt.
2. Bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn mắc PRRS tập trung ở phổi, phổi viêm, xuất huyết. Hạch lâm ba sưng, tụ máu. Thận xuất huyết điểm. Lách nhồi huyết.
3. Bệnh tích vi thể chủ yếu của lợn mắc PRRS: Phổi xuất huyết, phế quản phế viêm. Hạch lâm ba xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm. Thận có hiện tượng viêm kẽ thận, thâm nhiễm tế bào viêm. Não sung huyết.
4. Virus phân bố nhiều nhất ở phổi và hạch lâm ba phổi, ít nhất ở thận và dạ dày.
5.2. Kiến nghị
Để đề tài nghiên cứu trên được hoàn thiện hơn nữa, chúng tôi mong muốn: 1. Tiến hành gây bệnh thực nghiệm với các chủng virus khác: Các chủng mới trong nước phân lập ở các địa phương mới có dịch, Châu Âu, Bắc Mỹ, Trung Quốc để hiểu sâu về bệnh PRRS.
2. Tiến hành nghiên cứu trên lợn ở các lứa tuổi khác nhau, đặc biệt cần nghiên cứu trên lợn nái sinh sản.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70
TÀI LIỆU THAM KHẢO