3.1.3.1. Khảo sát tốc độ dòng xác định hàm lượng Vitamin B1
Pha dung dịch chuẩn làm việc Vitamin B1 có nồng độ 2,0 ppm.Tiến hành vận hành thiết bị ở các điều kiện như đã khảo sát và theo các tài liệu đã tham khảo:
- Pha động: Methanol (HPLC)
- Cột sắc ký: Cột C18 (250 x 4,6 mm, 5 μm I.D.). - Tốc độ dòng: Thay đổi tốc độ từ 0,8 - 1,3 mL/phút. - Thể tích tiêm mẫu: 10 μL.
- Detector: Bước sóng kích thích 365nm và bước sóng phát xạ là 435nm. Kết quả khảo sát thể hiện trong bảng 3.5.
Bảng 3.5. Kết quả khảo sát tốc độ dòng của Vitamin B1
V (ml/phút) 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3
Spíc - 2,0ppm 2645734 2725472 2812783 2719934 2674839 2546723
%RSD 3,3769 3,2781 3,1764 3,2848 3,3402 3,5082 Như vậy qua kết quả khảo sát, dựa vào các tài liệu tham khảo nên chúng tôi chọn tốc độ dòng tại giá trị 1,0 ml/phút. Đây là tốc độ đảm bảo cho độ hấp thụ cao, độ lặp tốt, phù hợp với phép phân tích.
3.1.3.2. Khảo sát tốc độ dòng xác định hàm lượng Vitamin B6
Pha dung dịch chuẩn làm việc Vitamin B6 có nồng độ 2,0 ppm. Tiến hành vận hành thiết bị ở các điều kiện như đã khảo sát:
- Hệ pha động: Methanol: axit phosphoric 0,01M điều chỉnh đến pH 2,5. - Cột sắc ký: Cột C18 (250 x 4,6 mm, 5 μm I.D).
- Tốc độ dòng: Thay đổi tốc độ dòng từ 0,8 - 1,3 mL/phút. - Thể tích tiêm mẫu: 10 μL.
- Detector: Bước sóng kích thích 290nm và bước sóng phát xạ là 395nm. Kết quả khảo sát thể hiện trong bảng 3.6.
Bảng 3.6. Kết quả khảo tốc độ dòng của Vitamin B6
V (ml/phút) 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3
Spíc - 2,0ppm 1936727 2017384 2051554 2043829 2017282 1954673
%RSD 2,4395 2,3420 2,3029 2,3116 2,3421 2,4171 Như vậy qua kết quả khảo sát, dựa vào các tài liệu tham khảo nên chúng tôi chọn tốc độ dòng tại giá trị 1,0 ml/phút. Đây là tốc độ đảm bảo cho độ hấp thụ cao, độ lặp tốt, phù hợp với phép phân tích.