Hợp chất FM4.2 được phân lập dưới dạng chất rắn màu trắng, đnc 213oC, độ quay cực [α]D25 -153,6o (c 0,46; MeOH). Phổ khối phun mù điện tử ESI-MS cho pic ion phân tử proton hóa ở m/z 155 [M+H]+. Phổ IR có dải hấp thụ ở νmax 3421 (cm-1) đặc trưng cho dao động hóa trị nhóm NH, dải hấp thụ νmax 1744; 1660 (cm-1) đặc trưng cho dao động hóa trị của nhóm cacbonyl (C=O).
Phân tích phổ 13C-NMR và DEPT của chất FM4.2 cho thấy phân tử có 7 cacbon bao gồm 4 nhóm metylen ở δC 23,3 (C-4); 29,4 (C-5); 46,3 (C-3); 46,9 (C- 9). Độ chuyển dịch hoá học của 2 nhóm metylen ở δC 46,3 (C-3); 46,9 (C-9) cho
43
phép xác định 2 nhóm metylen này có liên kết với nguyên tử nitơ; 1 nhóm metin sp3 liên kết với nitơ ở δC 59,8 (C-6); 2 nhóm cacbonyl tại δC 166,5 (C-1); 172,0 (C-7).
Phổ 1H-NMR xuất hiện tín hiệu của 1 nhóm metin gắn với nitơ tại δH 4,25 (1H, td, J = 2,0; 9,0 Hz; H-6). Tín hiệu của 8 proton ở δH 1,98 (1H, m, H-4α); 2,01 (1H, m, H-5α); 2,05 (1H, m, H-4β); 2,34 (1H, m, H-5β); 3,56 (2H, m, CH2-3); 3,76 (1H, d, J = 17,0 Hz; H-9α); 4,13 (1H, dt, J = 17,0 Hz; H-9β) cũng được quan sát thấy trên phổ 1H-NMR. Dựa vào phổ HSQC cho phép xác định 8 proton này thuộc về 4 nhóm metylen, đồng thời dựa vào độ chuyển dịch hóa học của chúng cho phép xác định có 2 nhóm metylen liên kết với nitơ (CH2-3 và CH2-9).
Trên phổ HMBC cho tương tác xa giữa H-6 với C-5, C-3 và C-7; tương tác giữa H-3 với C-6, C-5, C-4, C-1 cho phép xác định liên kết giữa C-6 với C-1 và C-3 qua nguyên tử nitơ. Đồng thời tương tác giữa H-9 với cacbonyl C-1 và C-7 cho phép xác định liên kết giữa C-9 với C-7 qua nguyên tử nitơ. Từ các dữ liệu phổ 1D, 2D-NMR, độ quay cực [α]D25 -153,6o (c 0,46; MeOH) và so sánh với tài liệu tham khảo cho phép xác định chất FM4.2 là Cyclo-(Pro-Gly), cấu hình tuyệt đối được xác định là 6S [19, 41].
Hình 4.8. Một số tương tác chính trên phổ HMBC ( ) của chất FM4.2