kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử

... X. Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) 81 1. Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota 81 2. CAT assay 82 Chương 3. Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử 84 I. Kỹ ... và RNA) 24 1. Phương pháp quang học 24 2. Phương pháp định lượng bằng điện di 24 3. Phương pháp nhỏ giọt định lượng acid nucleic 25 Chương 2. Kỹ thuật cơ bản trong tái tổ hợp DNA 26 I. Điều chế ... xác nhận huyết thống (tìm bố sinh học cho con) Làn 1: DNA bố hộ tịch, làn 2: DNA bố sinh học, làn 3: DNA của con và 4: DNA của mẹ. Con và mẹ cũng như con và bố sinh học có các băng giống nhau.

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA có trình tự đã biết dưới dạng đoạn được dòng hóa trong E coli... pháp ... Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạo Để phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các miền cơ năng trong phân tử protein (trung tâm hoạt động của ... 59 XV Phương pháp "vân tay DNA" (DNA finger print) Các kỹ thuật sinh vật học phân tử cũng ảnh hưởng nhiều đến lĩnh vực y học, chúng được trông đợi ứng dụng vào việc chẩn đoán bệnh

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... chuyển trong điện trường về phía anode nhưng với tốc độ khác nhau phụ thuộc vào độ lớn của phân tử (phân tử lượng). Gel SDS-polyacrylamide cấu tạo từ hai phần: gel tập trung và gel phân tách. ... gel phân tách đã hóa rắn thì thực hiện đổ gel tập trung. Nồng độ của gel phân tách phụ thuộc vào độ lớn của protein cần phân tách. Nồng độ acrylamide càng cao thì phân tách được các phân tử ... chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần này chỉ giới hạn trong phương pháp định

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... thực hiện phân tích được RNA. Trong S1 mapping mẫu dò DNA chỉ được đánh dấu ở đầu mút, nhưng trong trường hợp riboprobe mapping thì RNA mẫu dò được đánh dấu suốt chiều dài phân tử trong quá ... C). Sau đó, cắt phân tử DNA này một cách đặc hiệu tại vị trí đã đánh dấu. Cuối cùng, điện di sản phẩm phân giải DNA thu được trong gel polyacrylamide. Di động của các đoạn DNA trong điện trường ... khối lượng phân tử càng nhỏ thì càng phát hiện sớm và lần lượt đến phát hiện phân tử có khối lượng lớn hơn. 2. Phương pháp Maxam-Gilbert Phương pháp Maxam-Gilbert thực hiện đánh dấu hóa học từng

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần. 6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút. 7) Ngâm gel 10 phút trong Tris-HCl 0,1M pH 7,5. 8) Ngâm gel 20 phút trong ... ATGCGGTACTTCCGTACGTATAGGCCCGTATGCAAATCGGCCTTCGTT Trong đó, các đoạn lặp là các trình tự giúp ta đọc được toàn bộ độ dài của phân tử DNA. Kỹ thuật giải trình tiến bộ nhất cũng chỉ cho phép xác ... dương tính để phân tích Northern blot với mẫu dò đặc hiệu. 1. Northern hybridization (biến tính RNA bằng formaldehyde) 1) Ngâm bản gel, lược, chậu điện di trong xà phòng rồi rửa kỹ, sau đó ngâm

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... tái tổ hợp trong tế bào chủ (tế bào eukaryota) biểu hiện tính trạng là cao 86 Chương 3 KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN PHÂN TỬ I Kỹ thuật lai Southern (Southern hybridization) Kỹ thuật chuyển/lai ... DNA tương đồng trong mẫu nghiệm, là một trong những phương pháp hữu ích áp dụng trong nghiên sinh học phân tử DNA mẫu nghiệm có thể là nguyên vẹn Thêm vào đó, trong nhiều trường

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống. 7) Chuyển từng phân ... đoạn, mỗi phân đoạn 0,4 ml, sang ống Eppendorf (được khoảng 30 phân đoạn). 8) Thêm vào mỗi phân đoạn 40 µl sodium acetate (pH 5,1) 3M và một lượng ethanol bằng hai lần dung lượng mẫu (mỗi phân đoạn), ... trước khối lượng phân tử của cDNA. Làm phản ứng tổ hợp vào vector trong 3 ống. Trộn 1 µg DNA λgt 10 hoặc λgt 11 gắn đầu dính (arm-DNA λgt 10, arm-DNA λgt 11) với một lượng cDNA trong mỗi ống

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... 4 ºC. Với DNA động vật có thể bảo quản 4 - 5 năm trong điều kiện này. 40 IV. Phương pháp đánh dấu DNA Ban đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay ... không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dưới đây mô tả kỹ thuật đánh dấu mẫu dò bằng đồng vị phóng xạ và kỹ thuật phi phóng xạ sử dụng digoxygenin 11-dUTP (DIG-dUTP). ... ở 4 °C trong 3 giờ 7) Chiết xuất bằng phenol-chloroform (1:1),... đương nhiên, trong trường hợp tế bào tổ chức chỉ chứa ít mRNA đích thì việc phân đoạn theo phân tử lượng trong mật

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có khuynh hướng ... Bật đèn tử ngoại để đối chiếu nồng độ nucleic acid mẫu với nucleic acid chuẩn mà xác định nồng độ mẫu Sau đó, có thể dùng pipet để hút thu hồi mẫu 28 Chương 2 KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI ... tủa gồm nhiều phân tử protein khác nhau. Trong khi đó DNA vẫn tiếp tục là chất tan trong nước và có thể hút sang ống chứa khác. Thao tác loại bỏ protein, lipid và các chất khác tan trong dung

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế 2006 TS. PHẠM HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế Năm 2006 LỜI ... thực hiện trong sinh học phân tử. Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển sinh học phân tử được các nhà ... quá trình sinh học vi mô đã trở thành cách thức chủ yếu để loài người nhận thức thế giới sinh học. Sinh học phân tử phát triển trên cơ sở kiến thức đa ngành. Có thể nói Sinh học phân tử là kết

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... 78 78 168 X Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota CAT assay Chương Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử I Kỹ thuật lai Southern ... finger print xác nhận huyết thống (tìm bố sinh học cho con) Làn 1: DNA bố hộ tịch, 2: DNA bố sinh học, 3: DNA 4: DNA mẹ Con mẹ bố sinh học có băng giống Trong trường hợp probe kết hợp trực tiếp ... xác nhận kết bám, khu trú tế bào người cho thể người nhận *Các bước kỹ thuật: 1) Các mẫu DNA (của con, bố hộ tịch bố sinh học mẹ) phải xử lý Chiết xuất tinh chế DNA, đo hàm lượng (khoảng µg DNA

Ngày tải lên: 18/05/2021, 12:55

... Kỹ thuật sinh học phân tử Tác giả PGS Phạm Hông Sơn * Kỹ thuật sinh học phân tử Chương NHỮNG THAO TÁC CƠ BẢN I Dụng cụ hóa chất Dụng cụ Nhìn chung, phòng thí nghiệm thực thí nghiệm sinh học phân ... kỹ thuật, giáo trình đương nhiên giới thiệu bước kỹ thuật thường thực sinh học phân tử Nhưng quan trọng thông qua bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm điểm nghiên cứu phát triển sinh học phân ... trình sinh học vi mô trở thành cách thức chủ yếu để loài người nhận thức giới sinh học Sinh học phân tử phát triển sở kiến thức đa ngành Có thể nói Sinh học phân tử kết phối hợp tư hóa học với

Ngày tải lên: 14/04/2017, 14:08

... PHƢƠNG PHÁP VÀ KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SHPT GV: Nguyễn Thị Ngọc Yến Mục tiêu  Công cụ SHPT cách sử dụng  Một số phương ... tế bào động vật  Đạn sinh học: “súng bắn gen” đưa ADN gắn hạt vàng xuyên qua màng tế bào Chọn lọc dòng tái tổ hợp     Kỹ thuật bổ sung anpha Sử dụng đề kháng kháng sinh Chọn lọc trực tiếp ... SangerCoulson cải tiến Phƣơng pháp Maxam-Gilbert PP hóa học: dựa vào thủy giải đặc trưng ADN o Tạo ADN sợi đơn từ đoạn ADN cần giải trình tự o Đánh dấu phân tử ADN đầu o Thực ống phản ứng riêng biệt: G:

Ngày tải lên: 07/07/2017, 02:52

... trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất Đại học Huế 2006 Simpo PDF Merge and Split Unregistered Version - http://www.simpopdf.com TS PHẠM HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH ... kỹ thuật, giáo trình đương nhiên giới thiệu bước kỹ thuật thường thực sinh học phân tử Nhưng quan trọng thông qua bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm điểm nghiên cứu phát triển sinh học phân ... trình sinh học vi mơ trở thành cách thức chủ yếu để loài người nhận thức giới sinh học Sinh học phân tử phát triển sở kiến thức đa ngành Có thể nói Sinh học phân tử kết phối hợp tư hóa học với

Ngày tải lên: 21/06/2022, 11:43

... đầu Sinh học phân tử khoa học nghiên cứu tượng sống mức độ phân tử Phạm vi nghiên cứu môn học có phần trùng lặp với số mơn học khác sinh học đặc biệt di truyền học hóa sinh học Sinh học phân tử ... nay, sinh học phân tử sinh học tế bào xem tảng quan trọng công nghệ sinh học Nhờ phát triển công cụ sinh học phân tử enzyme cắt hạn chế, DNA ligase, vector tạo dòng, lai phân tử, kỹ thuật PCR sinh ... học phân tử ngày đạt nhiều thành tựu ứng dụng quan trọng Giáo trình sinh học phân tử cung cấp kiến thức cho sinh viên với nội dung sau: - Cấu trúc chức gen - Cấu trúc genome - Các trình tái bản,

Ngày tải lên: 15/11/2018, 00:26

... khối lượng, phân tử có điện tích lớn di chuyển cực ngược dấu nhanh p dụng nguyên lý trên, kỹ thuật sinh hóa sinh học phân tử, người ta sử dụng kỹ thuật điện di nhằm phân tích protein hay phân tích ... 3- Kỹ thuật điện di CHƯƠNG III – KỸ THUẬT ĐIỆN DI Phương pháp điện di phương pháp phổ biến phân tích sinh hóa, dùng phân tích nucleic acid protein Kỹ thuật điện di có nhiều ứng dụng sinh học phân ... chuyển phân tử môi trường điện di Trong điện trường, phân tử tích điện thuộc pha lỏng di chuyển phía cực Vận tốc di chuyển phân tử tùy thuộc tỷ lệ điện tích khối lượng phân tử Như phân tử có khối

Ngày tải lên: 28/03/2016, 23:25

... phát triển, sinh trưởng hình thành thể giới thiệu chương Để học kiến thức chuyên sâu lĩnh vực sinh học phân tử, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy, cô Khoa Sinh học Trường Đại học Tổng ... giả Một gen khơng có chức sinh học • RACE (Rapid Amplification of ADNc ends): Kỹ thuật PCR nhân phần đầu phân tử ADNc • Ras protein: Phân tử monomer tương tác với GTP, phân bố tế bào chất, tham ... đổi q trình biến đổi phân tử ARN thành phân tử có chức sinh học • intein: Đoạn ngắn sợi polypeptide bị cắt sau dịch mã kết thúc Đây cách thức biến đổi sau dịch mã để có phân tử protein có hoạt

Ngày tải lên: 14/02/2019, 19:27

... ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM BÁO CÁO THỰC HÀNH KỸ THUẬT DI TRUYỀN VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ Nhóm Giảng viên: TS Nguyễn Huy Thuần Họ tên sinh viên: Đỗ Thị Hào MSSV: ... trúc bao bọc tế bào, để phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng sinh học phân tử Điều quan tâm thu nhận phân tử DNA trạng thái nguyên vẹn không bị phân hủy Cách pha hóa chất - Dung dịch đệm CTAB: + CTAB ... bảo vệ DNA khỏi phân hủy enzyme giúp bảo quản lâu Hạn chế TE có có mặt EDTA ức chế enzyme phản ứng sinh học phân tử sau Cho nên sử dụng TE nồng độ lỗng, khơng ức chế phản ứng sinh học sau Sử dụng

Ngày tải lên: 01/11/2022, 15:02

... ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM BÁO CÁO THỰC HÀNH KỸ THUẬT DI TRUYỀN VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ Nhóm Giảng viên: TS Nguyễn Huy Thuần Họ tên sinh viên: Đỗ Thị Hào MSSV: ... trúc bao bọc tế bào, để phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng sinh học phân tử Điều quan tâm thu nhận phân tử DNA trạng thái nguyên vẹn không bị phân hủy Cách pha hóa chất - Dung dịch đệm CTAB: + CTAB ... bảo vệ DNA khỏi phân hủy enzyme giúp bảo quản lâu Hạn chế TE có có mặt EDTA ức chế enzyme phản ứng sinh học phân tử sau Cho nên sử dụng TE nồng độ loãng, không ức chế phản ứng sinh học sau Sử dụng

Ngày tải lên: 15/06/2023, 11:50

... khuyết điểm của học sinh cho cha mẹ các em biết để cùng nhau phối hợp giáo dục. - Kiểm điểm học sinh trong giờ sinh hoạt lớp . - Phối hợp với công an Phường trong việc giáo dục học sinh cá biệt.và ... sống của nhiều học sinh còn gặp khó khăn. Cơ sở vật chất của trường còn nghèo nàn, nhièu phòng học đã xuống cấp, cơ sở vật chất của một số phòng học đã cũ và còn thiếu Một số em học sinh ở nhà, ... nề nếp học sinh + Đoàn kết giữa các học sinh trong lớp và học sinh trong toàn trường, không thù hằn, không bè phái, không gây gổ đánh nhau +Thi đua giữ gìn vệ sinh trường

Ngày tải lên: 27/06/2015, 15:52