... gen đơn di n sinh vật cụ thể Chuẩn bị gen library: tinh DNA tổng số, đánh dấu điểm phân cắt giới hạn phần (a partial restriction digest), kết tạo đoạn clone vào vector thich hợp (H8 .5) , thường ... gliadin lúa mì xác định để probe genomic library tạo thể lai không với thân gen mà với gen khác (H8.16c) Tất chúng liên quan với cDNA gliadin, có trình tự khác biệt không đáng kể.Đó gliadins ... (H8 .5) , thường vector thay lamda, cosmid, YAC Hình 8 .5: Chuẩn bị gen library từ vector cosmid Phân cắt DNA tế bào Sau3A thành đoạn có độ dài khoảng 35kb, gắn kết đoạn vào cosmid Bảo quản invito, nhiễm...
... khuẩn mang gen nấm men Ví dụ: YIp5 pBR322 chứa gen URA3 (hình 7.6(a)) Gen mã hoá cho orotidine -5 -photphate decarbocylase (enzyme xúc tác sinh tổng hợp pyrimidine nucleotide) sử dụng marker chọn ... plasmid gen LEU12 đột biến nấm men, kết toàn plasmid đưa vào nhiễm sắc thể nấm men (hình 7 .5) Hình 7 .5 Recombination plasmid gen LEU2 NST hòa hợpYEp13 DNA NST nấm men Sau có copy gen LEU2, giữ ... giữ lại nấm men cần thiết Thứ số lượng copy vector tế bào YEps YRps có số copy cao (20 -50 copy với YEps 5- 100 copy với YRps) Trái lại, YIps thường có copy tế bào Số copy lớn thu nhiều sản phẩm...
... Bolivar Rodirge người phát triển PBR322 ) 322 – để phân biệt plasmid với loại plasmid khác tạo đợt thí nghiệm (1 số plasmid gọi PBR3 25, PBR327, PBR328, ……) 6.1.2) Đặc tính có lợi PBR322: Bản đồ di truyền ... pG EM3Z-sự dòch mã Invitro DNA clone (H.6.5a): Chương H6 .5 pGEM3Z (a) sơ đồ vector pGEM3Z (b) tổng hợp RNA invitro gồm vị trí căt ( EcoRI, …………, HindIII) pGEM3Z giống vector pUC, mang gene ampR ... vector phát triển Những vector tạo với mục đích sử dụng ban đầu, clone đoạn DNA lớn kích 15 Chương thước 5- 25kb kích thước lớn vector plasmid hay M13 6.3.1) Những đoạn DNA gen loại bỏ mà không làm...
... tái biểu tế bào cấy vào đĩa môi trường có kháng sinh, chúng có đủ lượng enzyme để tồn (Hình 5. 5) Hình 5. 5: Biểu kiểu hình Ủ 370C 1h trước nuôi cấy đĩa làm tăng khả sống sót cá thể biến nạp môi trường ... đọn DNA vào plasmid phá nguyên vẹn số gen di n phân tử Do đó, thể tổ hợp (recombinant) nhận di n đặc tính mã hóa gen bất hoạt không di n tế bào chủ (Hình 5. 6) Nguyên lý chung chèn bất hoạt minh ... khả tổng hợp beta galactosidase (Hình 5. 9a) thể tái tổ hợp kháng Ampicillin không tổng hợp beta galactosidase (Hình 5. 9b) Sự sàng lọc cho di n hay không di n thực tế dễ dàng Chỉ cần thử nghiệm...
... phosphate di n đầu 5 (5 - terminus) phân tử DNA (hình 4.6 (a)) Polynucleotide kinase (từ E.coli bị nhiễm T4 phage, có tác động ngược với Alkaline phosphatase, thêm vào nhóm phosphate đầu 5 tự (hình ... giống, đầu 5 -P biến đổi, loại P vào OH ( hình 4.25a) Kết adaptor không gắn lại với (hình 4.25b) Vì mà adaptor nối với DNA mà không nối chúng lại với Sau biến đổi trở lại tạo trở lại đầu 5 -P nhờ ... để cắt µg λDNA.BglII thường sử dụng nồng độ đơn vị/ µl, 0 ,5 µl đủ để cắt DNA.Vì vậy, thành phần cuối hỗn hợp phản ứng 0 ,5 µl BglII + 1 ,5 µl nước, cho thể tích cuối 20 µl (hình 4.11 (c)) Nhân tố...
... tâm gradient độ đậm nhờ Ethidiumbromide-casein chloride: Đây đảo ngược đặc biệt kỹ thuật ly tâm cân gradient độ đậm Một mật độ gradient tạo ly tâm dd CsCl với tốc độ cao.( H 3.12a) Gradient tạo ... nghiệm Sự di chuyển xuống cân bằng khuyếch tán Vì mật độ gradient thiết lập với mật độ CsCl cao phía đáy ống nghiệm Những đại phân tử di n dd CsCl ly tâm tạo dãy tách biệt theo gradient ( H.3.12 ... không mong muốn Ta tinh hạt phage CsCl với phương pháp ly tâm độ đậm gradient Các hạt phage gradient CsCl có mật độ 1. 45- 1 .50 g/cm3.(h3.20) Việc lấy phage giống lấy DNA mô tả trước đây.(p43 H3.14)...
... gọi gen “tra” ) Tra gene di n plasmid tiếp hợp vắng mặt plasmid không tiếp hợp Tuy nhiên số trường hợp, plasmid không tiếp hợp kết hợp di chuyển với plasmid tiếp hợp di n tế bào Vài loại plasmid ... plasmid có trị số copy đặc trưng, thấp (đặc biệt phân tử lớn) cao (khoảng 50 nữa) Nói chung, công cụ tạo dòng hữu ích cần phải di n tế bào với số lượng thật nhiều để thu số lượng lớn phân tử DNA tái ... mang số gen cần cho tái phage, bao quanh lớp vỏ bảo vệ có chất protein (gọi capsid) (hình 2 .5) Hình 2 .5 Sơ đồ dạng cấu trúc phage (a) Dạng đầu đuôi (vd: ) (b) Dạng sợi (vd: M13) Tất phages xâm...
... tạo dòng gen di n giải hình 1.2 Trong ví dụ, đoạn DNA tạo dòng thành phần hỗn hợp có nhiều đoạn gen khác Mỗi đoạn DNA mang gen phần gen Tập hợp đoạn DNA hỗn hợp chứa toàn thông tin di truyền sinh ... trình thực nhờ khả hấp thụ tự nhiên tế bào chủ plasmid phân tử DNA virus (được trình bày chương 5) 1.4.3 Sự đa dạng vector tạo dòng Ngày vector sử dụng tạo dòng vô đa dạng Hầu hết chúng có nguồn ... nghiệm tạo dòng riêng biệt Chươngchương giới thiệu dạng vector quan trọng ứng dụng chúng Chương 1 .5 TẠI SAO VIỆC TẠO DÒNG GEN LẠI QUAN TRỌNG Hình 1.1 cho ta thấy tạo dòng gen phương pháp tương đối...
... mở hồ sơ tuyển Mở hồ sơ chọn, xét chọn Đại di n Bộ Khoa học Công nghệ, Hội đồng khoa học côngnghệ tư vấn tuyển chọn, xét chọn, quan liên quan đại di n tổ chức, cá nhân đăng ký tham gia Tên bước ... có xác nhận tham gia phối hợp) + Danh mục tài liệu, văn có hồ sơ Số hồ sơ: 16 (bộ), đó: 01 gốc 15 hồ sơ gốc Tên mẫu đơn, mẫu tờ khai Văn qui định Đơn đăng ký chủ trì thực đề tài khoa học công ... học côngnghệ dự án nhập côngnghệ giao Cá nhân chủ trì nhiệm vụ cấp nhà nước giai đoạn 200120 05 2006-2010 không tham gia tuyển chọn, xét Quyết định số chọn chủ trì nhiệm vụ khoa học công nghệ...
... CỦA DI TRUYỀN DNA mã di truyền • Thông tin di truyền thực sở vận động vật chất di truyền thông qua trình phân bào thụ tinh • Vật chất di truyền acid nucleic • Cơ chế truyền đạt thông tin di truyền ... amin • Mã di truyền mã ba, nucleotide DNA mã hoá acid amin protein • Đặc điểm mã di truyền Mã di truyền mã ba Mã đọc RNAm theo chiều 5' → 3' Mã di truyền có tính toàn năng, tức mã di truyền ... khuôn 3' - 5' DNA * Giai đoạn kéo dài: di n chuỗi có khác nhau: - Tổng hợp chuỗi sớm: khuôn 3' - 5' DNA - Tổng hợp chuỗi muộn: mạch khuôn 5' - 3' DNA *Giai đoạn kết thúc: trình kéo dài tiếp di n hết...
... kích thước 18- 25 kb pBR322 pBR322 pBR322 4361 bp 4361 bp 4/6/2011 Các vector tạo dòng Cosmid: • Là vector plasmid chứa gene cos phage λ Tái giống plasmid • Chèn đoạn DNA lớn ( 35- 45 kb) Các vector ... hình minh họa Các vector tạo dòng Phage λ: • DNA sợi đôi thẳng • Kích thước: 48 ,5 kb • Chèn DNA có kích thước 18- 25 kb Electron micrograph of bacterial phage from the host E coli Các vector tạo ... enzymes (Enzyme cắt giới hạn) • Ligase (Enzyme nối) Cho trình tự DNA: 5 … CCTAGATCTTTAACC…TAGATCTAA…3’ 3’…GGATCTAGAAATTGG…ATCTAGATT 5 A) Xử lý DNA với enzyme giới hạn BgIII (A/GATCT) Sẽ thu đoạn DNA...
... nhà nghiên cứu thường sử dụng 4-acetyl-2,6-dimethoxylphenol với nồng độ từ 50 – 200 M Chuyển gene vào lục lạp tế bào Thơng tin di truyền thực vật di n ba loại quan tử khác tế bào: nhân, ty thể ... tế bào lá, phơi nảy mầm lúa indica Một số dòng lúa indica chuyển gene từ xung điện phơi hạt trưởng thành tách rời chuyển gene từ điện xung tế bào huyền phù tạo Sự di truyền gene nói ghi nhận Mặc ... plastid, có khoảng 10,000 gene plastid / tế bào Kết nghiên cứu di truyền gene lục lạp giai đoạn đầu đối tượng tảo xanh Chlamydomonas reinhardii thuốc Nicotiana tabacum tiền đề nghiên cứu lĩnh vực chuyển...
... kích thước 18- 25 kb pBR322 pBR322 pBR322 4361 bp 4361 bp 4/6/2011 Các vector tạo dòng Cosmid: • Là vector plasmid chứa gene cos phage λ Tái giống plasmid • Chèn đoạn DNA lớn ( 35- 45 kb) Các vector ... hình minh họa Các vector tạo dòng Phage λ: • DNA sợi đôi thẳng • Kích thước: 48 ,5 kb • Chèn DNA có kích thước 18- 25 kb Electron micrograph of bacterial phage from the host E coli Các vector tạo ... enzymes (Enzyme cắt giới hạn) • Ligase (Enzyme nối) Cho trình tự DNA: 5 … CCTAGATCTTTAACC…TAGATCTAA…3’ 3’…GGATCTAGAAATTGG…ATCTAGATT 5 A) Xử lý DNA với enzyme giới hạn BgIII (A/GATCT) Sẽ thu đoạn DNA...
... 35. 789.000 tiền công ty … Hoàng Linh 111 31/12 … Kết chuyển DT quý … … … 1 .58 4.661 .58 8 … … HNB46:0 51 1 … Số dư đầu kỳ 0 Phát sinh kỳ 5. 278.434 .56 2 5. 278.434 .56 2 Lũy kế 15. 768. 653 .24 15. 768. 653 .241 ... triệu USD) 250 2 15. 78 200 158 .83 150 100.91 100 50 70 .52 17.74 8.76 2001 2002 SV: Nguyễn Thị Thùy Linh 2003 2004 20 05 2006 Lớp: Kế toán 47D Như nhân tăng từ 307 người năm 20 05 lên 55 7 người năm ... đối ứng Số hiệu Số tiền Nợ Có 156 11 12. 356 .000 7.3 45. 000 156 11 … 8. 450 .000 … 156 11 … 8.120.000 … … 156 11 … … Số dư đầu kỳ Phát sinh kỳ Lũy kế 0 5. 3 45. 690.000 60.2 35. 600.00 Hà Nội ngày … tháng …...
... tổng hợp nucleotide phosphorylase (Greenberg Marago, 1 955 ), DNA - polymesase ( Kornberg,1 956 ), RNA - polymesase (Spieglman, Hurwist, 14 1 958 - 1961) nghiên cứu điều hòa sinh tổng hợp protein enzyme ... (Berzelius, 18 35) qua việc coi enzyme hoạt động thể sống (Pasteur, 1 856 ) đến việc khẳng định cách dứt khoát chất hóa học enzyme protein (Sumner, Northrop (1926, 1930) đến gần với phát RNA có 15 hoạt ... xúc tác tồn nhiều dạng khác nhau, xúc tác thể, cho phản ứng, có sai khác số tính chất độ di động điện di Năm 1969 người ta tổng hợp enzyme ribonuclease (Denkewalter Hirschmann, Gutte Merrifield)...
... có chất xúc tác platin lượng hoạt hóa 11,7 Kcal/mol, có enzyme catalase xúc tác lượng hoạt hóa 5, 5 Kcal/mol Nhiều dẫn liệu thực nghiệm cho thấy trình tạo thành phức hợp enzyme chất biến đổi phức ... tác trung tâm hoạt động enzyme là: Arg - 1 45, Tyr - 248 Glu - 270 Cơ chế phản ứng xúc tác Carboxypeptidase A xác định sở kết nghiên cứu phản ứng với dipeptid glycyltyrosine Quá trình phân giải ... Khi tiếp xúc với chất, nhóm trung tâm hoạt động enzyme thay đổi vị trí không gian Nhóm guanidin Arg - 1 45 nhóm carboxyl Glu - 270 dịch chuyển 2Å, nhóm hydroxyl Tyr - 248 dịch chuyển 12Å từ chỗ gần...