chuyển gen vào tế bào e coli
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5
Ngày tải lên :
27/10/2012, 10:53
... Tris Acetate EDTA
Taq Thermus aquaticus
Kb kilobase
dATP deoxyadenosine triphosphate
dGTP deoxyguanosine triphosphate
dCTP deoxycytidine triphosphate
dTTP deoxythymidine triphosphate
Tris- ... Multiple cloning Site
OD Optical Density
PCR Polymerase Chain Reaction
RE Restriction Enzyme
RNA Ribonucleic acid
RFLP Restriction fragment length polymorphism
SDS Sodium dodecyl sulfate
TAE ... hoạt tính endonuclease nhằm làm tăng lƣợng plasmid tích lũy trong
tế bào. Thông thƣờng ngƣời ta sẽ gây đột biến trên gen endA (endA) là gen mã hóa cho
endonuclease I. Việc mất endonuclease này...
- 23
- 1.3K
- 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α
Ngày tải lên :
31/10/2012, 09:35
... polypeptide duy nhất với ba hoạt động
enzym: DNA polymerase (tổng hợp) 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ và
exonuclease 5’ 3’.
Enzym DNA fragment Klenow là enzym DNA polymerase I bị cắt ... lactose), gen điều hoà I hoạt động (I có promoter
riêng) để tạo ra repressor; repressor nhận biết và lyên kết với operator, cản sự lyên kết
gen điều hoà
Gen điều
hoà
Vùng cấu trúc
gen
của ... hoá permerase) và lacA
(mã hoá acetylase). Một trình tự nucleotide gọi là promoter (vùng khởi động: P), đánh
dấu điểm khởi đầu sao chép của cả 3 gen. Một trình tự nucleotide gọi là operator...
- 74
- 3.3K
- 15
Chuyển gen gfp vào tế bào vi khuẩn Pseudomanas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần
Ngày tải lên :
19/11/2012, 15:13
...
Yeoung-Seuk Bae và Guy R. Knudsen, 1999 sử dụng Polyethylene-glycol đồng
biến nạp gen tổng hợp β-Glucuronidase (GUS) và gen tổng hợp GFP (Fluorescent
Protein Genes ) vào nấm Trichoderma harzianum ... promoter “nopaline Synthase” của Agrobacterium tumerfaciens.
hpr gen khng hydromycine của Streptomuces hygroscopius.
uidA gen “β-glucurnidase” của Escherichia coli.
Reporter gen có thể đƣợc sử dụng ... đom đóm.
Hệ thống marker gen
Marker gen là những gen dùng để chọn lọc. Cc plasmid đƣợc sử dụng trong
chuyển nạp gen chứa đựng bên trong nó: reporer gen và những marker gen mang tính
chọn lọc....
- 81
- 1.1K
- 9
Chuyển Gene gfp vào tế bào vi khuẩn
Ngày tải lên :
05/11/2012, 13:58
... promoter “nopaline Synthase” của Agrobacterium tumerfaciens.
hpr gen khng hydromycine của Streptomuces hygroscopius.
uidA gen “β-glucurnidase” của Escherichia coli.
Reporter gen có thể đƣợc sử dụng ... đom đóm.
Hệ thống marker gen
Marker gen là những gen dùng để chọn lọc. Cc plasmid đƣợc sử dụng trong
chuyển nạp gen chứa đựng bên trong nó: reporer gen và những marker gen mang tính
chọn lọc. ... reporter gen và marker gen.
Hệ thống reporter gen:
Bất cứ một gen lạ nào đƣợc chuyển nạp, nó chỉ có thể đƣợc thể hiện khi có một
chuỗi promoter thích hợp kèm theo nó. Việc chọn lọc promoter...
- 81
- 909
- 5
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
Ngày tải lên :
16/11/2012, 16:15
... promoter. Khi có lactose (và không có glucose), lactose lyên
kết với repressor và làm biến đổi hình thể của repressor, do đó repressor không lyên
kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase ... phần gel chứa band DNA cần đƣợc tinh sạch cho vào
eppendoft 1.5ml ( đã cân trọng lƣợng trƣớc).
Bƣớc 3: Cho capture buffer vào eppendorf chứa gel trên với tỷ lệ 10 mg gel ≈ 10µl
capture buffer. ... độc lập với bộ gen của tế
bào. Tế bào có khả năng tiếp nhận vector tái tổ hợp gọi là tế bào chủ. Tế bào chủ
thƣờng đƣợc chọn lọc và cải tạo để tạo thành các chủng chủ có kiểu gen và các đặc...
- 74
- 2.5K
- 5
Nghiên cứu quy trình chuyển gen vào giống thuốc lá C9-1 nhằm tạo cây thuốc lá chuyển gen kháng bệnh khảm lá
Ngày tải lên :
31/10/2012, 10:44
... Virus resistance and
gene silencing in plants can be induced by simultaneous expression of sense
and antisense RNA. Proc Natl Acad Sci USA 95(23):13959-64.
[44] 42Wesley SV, Helliwell CA, ... RNA-
interference in rice against Rice tungro bacilliform virus results in its
decreased accumulation in inoculated rice plants. Transgenic Res. 17(5):
897-904
[41]Vanderschuren H, Alder A, ... Rouse DT, Liu Q,
Gooding PS, Singh SP, Abbott D, Stoutjesdijk PA, Robinson SP,
Gleave AP, Green AG, Waterhouse PM (2001) Construct design for
efficient, effective and high-throughput gene silencing...
- 51
- 1.2K
- 6
Phát hiện một số gen độc lực của E.Coli phân lập được từ phân và thịt bò, heo bằng kỹ thuật multiplex-PRC
Ngày tải lên :
18/03/2013, 08:22
...
E. coli
)
- ETEC (Enterotoxigenic E. coli)
- EAggEC hay EAEC (Enteroaggregative E. coli)
- EIEC (Enteroinvasive E. coli)
Có ba cơ chế chung về khả năng gây tiêu chảy của E. coli:
(1) Sản ... bệnh), E. coli được
chia thành 5 nhóm chính:
- STEC (Shiga toxin-producing E. coli) hoặc VTEC (Verotoxigenic E. coli)
và EHEC (Enterohaemorrhagic E. coli)
- EPEC (Enteropathogenic
E. coli
) ... hại tế bào ruột – locus of enterocyte
effacement, LEE). Vùng LEE của STEC/EHEC chứa những gen mã hóa cho
intimin, mã hóa receptor của intimin Tir (translocated intimin receptor) và một số
gen...
- 66
- 2K
- 7
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn ADN vào tế bào vi khuẩn Ecoli DH5a
Ngày tải lên :
07/04/2013, 21:46
... lactose), gen điều hoà I hoạt động (I có promoter
riêng) để tạo ra repressor; repressor nhận biết và lyên kết với operator, cản sự lyên kết
gen điều hoà
Gen điều
hoà
Vùng cấu trúc
gen
của ... của operon Lac (lactose operon). Operon Lac là đoạn DNA chứa:
Ba gen cấu trúc lacZ (mã hoá β- galactosidase), lacY (mã hoá permerase) và lacA
(mã hoá acetylase). Một trình tự nucleotide gọi ... glucose), lactose lyên
kết với repressor và làm biến đổi hình thể của repressor, do đó repressor không lyên
kết với operator: operon Lac mở, RNA polymerase lyên kết với promoter và trƣợt dài
theo...
- 74
- 2.7K
- 7
ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR TRONG VIỆC PHÁT HIỆN CÁC GEN ĐỘC LỰC CỦA E.COLI GÂY TIÊU CHẢY Ở NGƯỜI
Ngày tải lên :
22/04/2013, 11:57
... 2. ETEC; 3. EHEC1;
M. Marker ФX 174 cắt bằng Hae III; 1. EPEC; 2. ETEC; 3. EHEC1;
4. EAEC; 5. EHEC2; 6. EIEC; 7. EC
4. EAEC; 5. EHEC2; 6. EIEC; 7. EC
Bảng 3.1. Kết quả khuếch đại các gen độc ... của 5 nhóm E. coli
EPEC EHEC1 EHEC2 EAEC EIEC ETEC EC
eae + + + - - - -
vt1 - + - - - - -
vt2 - - + - - - -
IpaH - - - - + - -
EAST1 - - - + - - -
elt - - - - - + -
Ghi chú: EHEC1 và EHEC2 là hai ... tễ Trung ương cung cấp, gồm có: EPEC, EHEC1, EHEC2, EIEC,
ETEC, EAEC và EC (chủng đối chứng không có gen độc lực).
ETEC, EAEC và EC (chủng đối chứng không có gen độc lực).
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN...
- 17
- 797
- 2