Nghiên cứu khả năng ức chế enzyme glucsidase và hoạt tính kháng oxy hóa của cao chiết lá cây cóc đỏ (lumnitzera littorea) nghiên cứu khoa học

TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - - BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA XÉT GIẢI THƢỞNG NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN CẤP TRƢỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE VÀ HOẠT TÍNH KHÁNG OXI HĨA CỦA CAO CHIẾT LÁ CĨC ĐỎ (LUMNITZERA LITTOREA) M số ề t Thu nh m ng nh kho h : SINH HỐ Tp.Hồ Chí Minh, ngày 19 tháng 03 năm 2015 TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - - BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA XÉT GIẢI THƢỞNG NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN CẤP TRƢỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME α-GLUCOSIDASE VÀ HOẠT TÍNH KHÁNG OXI HĨA CỦA CAO CHIẾT LÁ CÓC ĐỎ (LUMNITZERA LITTOREA) M số ề t Thu nh m ng nh kho h : SINH HOÁ Sinh vi n th D nt : hi n: NGUY N TH KIM ĐƢ C : H p kho : DH11T 01- C g nh h : C gƣ i hƣ ng m H S H S HH C ăm thứ Số năm o t o: HH C n: T S NGUY N TH L THU Tp Hồ C í Minh, ngày 19 tháng 03 năm 2015 MỤC ỤC DANH MỤC BẢNG i DANH MỤC HÌNH VẼ ii ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1 TỔ QUA VỀ CH LUMNITZERA 1.1.1 Phân lo i 1.1.2 Đặ iểm hình thái 1.1.3 h n bố 1.1.4 iá trị kinh tế 1.1.5 Tình hình nghi n ứu nƣ 1.2 TỔ QUA VỀ HƢƠ v ngo i nƣ HÁ TÁCH CH ẾT 1.2.1 guy n tắ tá h hiết 1.2.2 ỹ thuật hiết lỏng -lỏng 1.2.3 ỹ thuật hiết rắn - lỏng 1.2.4 ỹ thuật hiết ph rắn 11 1.2.5 Cá yếu tố ảnh hƣởng ến trình tá h hiết nguy n li u 12 1.3 TỔ QUA VỀ ỐC TỰ DO 14 1.3.1 hái ni m gố t o 14 1.3.2 S hình th nh gố t o thể 14 1.3.3 V i trò ủ gố t 1.4 B o thể 15 H ĐÁ THÁO ĐƢỜ 20 1.4.1 hái ni m 20 1.4.2 h n lo i 20 1.4.3 hƣơng pháp iều trị 21 1.5 TỔ QUA VỀ E ZYME α – GLUCOSIDASE 22 1.5.1 Enzyme α- glucosidase 22 1.5.2 Chất ứ hế enzyme 23 1.5.3 Tình hình nghi n ứu khả ứ hế enzyme α-glucosidase 24 PHẦN II: VẬT LI U VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Vật li u 27 2.1.1 Đối tƣợng nghi n ứu 27 2.1.2 Đị iểm nghi n ứu 27 2.1.3 H hất v thiết bị 27 2.2 Quy trình iều hế o tổng 29 2.3 Quy trình iều hế o ph n o n từ o tổng ủ yC o hiết từ Đỏ 31 2.4 ghi n ứu khả kháng oxy h yC 2.5 ghi n ứu s ảnh hƣởng th i gi n ến vận tố phản ứng ủ Đỏ 33 enzyme -glucosidase 34 2.6 ghi n ứu s ảnh hƣởng ủ nồng hất ến vận tố phản ứng ủ enzyme -glucosidase 36 2.7 ghi n ứu khả ứ từ o hiết C Đỏ 38 2.8 So sánh khả ứ yC hế ho t tính ủ enzyme -glucosidase hế enzyme -glu osi se từ Đỏ v i A rbose v yC o hiết Trắng 41 PHẦN III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 ết iều hế o tổng từ yC Đỏ 44 3.2 ết iều hế o ph n o n từ 3.3 ết nghi n ứu khả kháng oxy h 3.4 ết nghi n ứu s ảnh hƣởng ủ th i gi n ến vận tố phản ứng o tổng 44 ủ o hiết yC Đỏ 44 enzyme -glucosidase 48 3.5 ết nghi n ứu s ảnh hƣởng ủ nồng hất ến vận tố phản ứng enzyme  - glucosidase 51 3.6 ết nghi n ứu khả thử ho t tính ứ ủ o hiết từ yC 3.7 So sánh khả ứ yC Đỏ v i hế enzyme -glucosidase Đỏ 52 hế enzyme -glu osi se ủ yC Trắng v o hiết rbose 57 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGH 61 4.1 ết luận 61 4.2 iến nghị 67 TÀI LI U THAM KHẢO 68 PHỤ LỤC iii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Ƣu v nhƣợ iểm củ phƣơng pháp hiết Soxhlet 10 Bảng 1.2: Ảnh hƣởng s stress oxy hóa .17 Bảng 2.1: Bố trí thí nghi m khả kháng oxy h cao chiết .33 Bảng 2.2: Bố trí thí nghi m nghiên cứu s ảnh hƣởng p-nitrophenyl-α-D-Glucosidase 37 Bảng 2.3: Bố trí thí nghi m nghiên cứu khả ứ ủ o hiết .38 Bảng 2.4: Bố trí thí nghi m so sánh khả ứ từ hế enzyme α-glucosidase o hiết yC hế enzyme α-glucosidase Đỏ v i a rbose v Bảng 3.1: ết khả kháng oxy h ủ Bảng 3.2: Gía trị IC50 cao chiết từ yC Trắng .42 o hiết 45 yC Đỏ chất chống oxy hóa BHT, acid ascorbic .47 Bảng 3.3: S ảnh hƣởng th i gi n ến vận tốc phản ứng .49 Bảng 3.4: ết nghi n ứu s ảnh hƣởng p-nitrophenyl-α-D-glucosidase 51 Bảng 3.5: ết khả ức chế enzyme -glucosidase củ o hiết 53 Bảng 3.6: Gía trị IC50 thể hi n khả ức chế enzyme -glucosidase cao chiết từ yC Bảng 3.7: Gía trị IC50 cao chiết củ Đỏ acarbose 55 yC Đỏ Cóc Trắng 58 i DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 : Lumnitzera littorea (Jack) Voigt .3 Hình 1.2: Lumnitzera racemosa Willd Hình 1.3: Ho ủ L littorea Hình 1.4: Ho ủ L racemosa Hình 1.5: Ho ủ h i lo i Hình 1.6: H t ủ h i lo i Hình 1.7: Q trình peroxid hóa lipid 18 Hình 2.1: yC Đỏ (Lumnitzera littorea) trƣ Hình 2.2: Quy trình iều hế o tổng yC Hình 2.3: Quy trình iều hế o ph n o n v s u phơi 27 Đỏ 29 yC Đỏ .31 Hình 2.4: Sơ nghiên cứu s ảnh hƣởng th i gi n ến vận tốc phản ứng enzyme -glucosidase 35 Hình 2.5: Sơ nghi n ứu khả ứ Hình 2.6: S huyển h hế enzyme α-glu osi se từ hất bị enzyme α-glu osi se ứ Hình 3.1: Đồ thị thể hi n khả kháng oxy h o hiết 39 hế .40 cao chiết 46 Hình 3.2: Đồ thị thể hi n s ảnh hƣởng th i gi n ến vận tốc phản ứng enzyme -glucosidase 50 Hình 3.3: Đồ thị thể hi n khả ức chế enzyme -glucosidase cao chiết từ yC Đỏ chất chuẩn acarbose 54 Hình 3.4: Đồ thị thể hi n giá trị IC50 cao chiết từ yC Đỏ Cóc Trắng so v i acarbose ức chế enzyme  - glucosidase 59 ii ĐẶT VẤN ĐỀ B nh tháo ƣ ng l m t ăn b nh nguy hiểm v ng gi tăng nh nh v i biến hứng nhƣ b nh tim m h t i biến m h máu não mù lò suy thận hi … ã trở th nh nguy n nh n g y tử vong thứ tƣ nƣ Tr n gi i ứ 10 gi y ồng hồ l i b nh tháo ƣ ng Vì vi tháo ƣ ng ng ƣợ o n ng phát triển m t ngƣ i hết nh ng biến hứng ủ nghi n ứu phƣơng pháp iều trị b nh nh kho h qu n t m Trong hƣ ng iều trị b nh tháo ƣ ng lo i hƣ ng iều trị h ứ hế ho t ng ủ enzyme α-glucosidase hi n ến hế ho t lo i thuố ứ ng ơn giản v lo i; thuố Sulphonylure s phát b n ỏ ;… ngƣ i sử ụng v tá tá ụng phụ g y rối lo n ti u h n nhằm mụ hất ứ ng sử ụng hi n n y v n ụng phụ buồn nơn ti u hảy í h h n hế tá ƣ th m nhiều l phải nghi n ứu á nh kho h hú ý n to n ho ngƣ i sử ụng Tuy nhi n nh ng hế enzyme α-glucosidase ụng phụ nhƣ thuố Bigu ni es ng ƣợ h n ho vi ung phụ nhiều tá vị giá kim y v ng n toàn cho iều trị b nh tháo ƣ ng, hế enzyme α-glucosidase m i từ nhiều nguồn Cá nh kho h ứ hế enzyme α-glucosidase sinh h nhi t t tr n gi i ã ũng nhƣ ô lập hợp hất t nhi n từ nguy n li u nh u Trong i gi mù n n nguồn th ã biết tìm kiếm v sử ụng b nh nhiều ơng trình nghi n ứu ho t tính h ng hiểu biết y ỏ vật ồi Vi t ho t tính m nằm vùng khí hậu o v phong phú Từ th i x xƣ ông h y ỏ t nhi n l m thứ ăn v thuố lợi h y ể h h i ã ƣợ truyền mi ng v ghi hép ú kết th nh kinh nghi m qu nhiều h nối tiếp nh u Cho ến ng y hôm n y m y h lĩnh v o v ơng nghi p phát triển ã iều trị b nh h y nh ng kỹ thuật hi n y ỏ t nhi n v n nh ng nghi n ứu vƣợt bậ i ể ƣợ nguồn th phẩm ồi m t vị ịnh ủ n Rừng ngập mặn l m t h sinh thái huyển tiếp gi liền ặ trƣng vùng sông ven biển nhi t nh kho h qu n t m ặ bi t ận nhi t i ã ƣợ nhiều vật quý nhiều lo i l ho t tính sinh h nhƣ Mắm biển (Avicennia marina) Bần hu g biển (Clerodendrum inerme), Ơ rơ (Acanthus (Sonneratia caseolaris) n ilicifolius), Cóc trắng (Lumnitzera racemosa), v.v Trong (Lumnitzera littorea) l m t lo i th vật th n gỗ thu y C Đỏ hi Lumnitzera h B ng (Combretaceae) ph n bố h sinh thái ủ rừng ngập mặn Vi t ất go i r rừng ngập mặn òn l nơi tập hợp s ng phong phú ủ nhiều hủng th nguồn ƣợ li u iv môi trƣ ng biển v t n sá h ỏ m năm 1996 Tr n sở nh m nghi n ứu húng ề xuất ề t i:“ Nghiên cứu khả ức chế enzyme α-glucosidase hoạt tính kháng oxi hóa cao chiết Cóc Đỏ (Lumnitzera littorea)” V i ti u hí ặt r l l m ảnh hƣởng t i h sinh thái th hái nh ng gi ủ lo i vật ủ rừng ngập mặn Do yC v th ũng nhƣ kinh tế ho lo i nghi n ứu ô lập hợp hất t nhi n ỏ g p phần l m húng thu y n y ể l m ối tƣợng nghi n ứu Mụ t i g p phần l m tăng giá trị mặt kho h tiền ề ho vi ông tá nghi n ứu khơng ng h í h ủ yn y t o ho t tính sinh h nguồn nguy n li u lĩnh v ề o từ ƣợ li u phẩm 4.2 Kiến nghị Do th i gi n th nghi m thứ hi n ề t i òn h n hế n n nghi n ứu òn h n hế o nhằm ho n thi n ơng trình nghi n ứu tơi m t số ề nghị s u: ghi n ứu quy trình lập hợp hất t nhi n glucosidase kháng oxi h Sử ụng hexane ethyl sinh h từ ph n o n o hiết thu ƣợ từ et te ethyl khả ứ khả ứ hế enzyme α- o hiết o tổng v o hiết ủ ph n o n n- et te : eth nol (8:2) v eth nol ể khảo sát ho t tính hế enzyme α – amylase, tyrosinase enzyme khác 67 TÀI LI U THAM KHẢO Apostolidis E., Kwon Y.I and Shetty K (2007), Inhibitory potential of herb, fruit, and fungal-enriched cheese against key enzymes linked to type diabetes and hypertension, Innovative Food Science and Emerging Technologies, 8, 46–54 Armstrong D (2002), Oxidants and antioxidants: Ultrastructure and Molecular Biology Protocols (Methods in molecular Biology), Humana Press ,196, 145217 Australian Diabetes Council (2012), Diabetes: what you need to know, Copyright Australian Diabetes Council, 6-90 Đức Tuấn, Trần Thị Kiều O nh Cát Văn Th nh guyễn Đình Qúi (2002) Khu d tr sinh rừng ngập mặn Cần Gi , Nhà xuất Nông nghi p, trang 32-80 Ganiyu Oboh, Ayodele Jacob Akinyemi and Adedayo Oluwaseun Ademiluyi (2012), Antioxidant properties and inhibitory effect of athanolic extract of Struchium sparganophora (ewuro odo) leaf on α-amylase and α- glucosidase activities, Afr J Tradit Comphement Altern Med, (3), 342-349 Ganiyu Oboh, Ayodele Jacob Akinyemi and Adedayo Oluwaseun Ademiluyi and Fatai Olumide Bello (2013), Inhibition of α- amylase and α-glucosidase activities by ethanolic extract of Amaranthus cruentus leaf as affected by blanching, (17), 1026-1032 Han L., Huang X.S., Sattler I., FU H.Z., Grabley S and W.H Lin (2007), Two new constituents from mangrove Bruguiera gymnorrhiza, Journal of Asian Natural Products Research, (4), 327–331 Lê Công Khanh (1986), Rừng ngập mặn rừng nhi t i tr n ất chua phèn, Nhà xuất Thành phố Hồ Chí Minh, trang 40-80 Lin T C., Hsu F L and Cheng J T 1993), Journal of Natural Products, 56, 629 68 10 isette D’Souz Solim bi W hi ull & r bh Dev (2010) Antib teri l phenolics from the mangrove Lumnitzera racemosa, Indian Journal of Marine Sciences, 39 (2), 294-298 11 Melo E B De omes A S inhibitors: Chemi l stru ture C rv lho (2006) “α and β- glucosidase n biologi l tivity” Tetr he ron 62, 10277-10302 12 Miaomiao Guo, Renchao Zhou, Yelin Huang, Jianhua Ouyang, Suhua Shi (2011), Molecular confirmation of natural hybridization between Lumnitzera racemosa and Lumnitzera littorea, Aquatic Botany, 95, 59-64 13 Nguyễn Đứ ƣợng (2012), Công ngh enzyme, Nhà xuất Đ i H c Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, trang 34-60 14 Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), hƣơng pháp ô lập hợp chất h u ơ, Nhà xuất Đ i H c Quốc Gia TP.HCM, trang 20-53 15 Olayinka A Aiyegoro and Anthony I Okoh (2010), Preliminary phytochemical screening and In vitro antioxidant activities of the aqueous extract of Helichrysum longifolium DC, BMC Complementary and Altemative, 2010, 10, 21-29 16 Ph m Hoàng H (1999), Cây cỏ Vi t Nam, 2, Nhà xuất trẻ, trang 110 17 h m Thị Tr n Ch u Enzym v ứng ụng h n Tuấn ghĩ (2009) Công ngh sinh h h xuất iáo Dụ Vi t tập 3: m trang 56-80 18 Premnathan M (1992), A survey of some Indian marine plants for antiviral activity, Botanica Marina 35, 321–324 19 Priyarani M., Padmakumari K.P., Sankarikutty B., Lijo cherian O., Nisha V.M and Raghu K.G (2011), International Journal of Food Sciences and Nutrition, 62 (2): 106-110 20 Saad Shabbudin, Taher Muhammad, Susanti Deny, Qaralleh Haitham, Binti Nurul Afifah and Rahim Abdul (2011), Antimicrobial activity of mangrove plant (Lumnitzera littorea), Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, 523– 525 69 21 Sundaram Ravikumar, Murugesan Gnanadesigan (2011), Hepatoprotective and antioxidant activity of a mangrove plant Lumnitzera racemosa, Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, 348-352 22 Trần Mỹ Linh, Lê Quỳnh Liên, Ninh Khắc Bản (2013), Ho t tính ức chế nấm vi khuẩn gây b nh ba loài th c vật ngập mặn Aegiceras corniculatum, Avicennia marina Lumnitzera racemosa t i vƣ n quốc gia Xuân Thủy, H i nghị khoa h c toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 5, trang 1127-1131 23 Verma N., Singh A P., Amresh G., Sahu P K (2010), “Different approaches for treatment of type diabetes mellitus with special reference to traditional medicines: a review” The Pharma Research, 3, 27-50 24 Selvam V (2007), Trees and shrubs of the Maldives, FAO Regional Office for Asia and the Pacific Printed by Thammada Press Co., Ltd., Bangkok, 195 25 Chapman V.J (1975), Mangrove vegetation, Auckland University, New Zealand, 447 70 PHỤ LỤC Bảng 1: Kết k ả k oxy óa cao chiết Cao n-hexane ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 10694.8 2138.96 9390539.38 0.0000 Within groups 0.00273333 12 0.000227778 Total (Corr.) 10694.8 17 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 33.9867 0.00871355 33.9732 34.0001 B 54.09 0.00871355 54.0766 54.1034 C 72.0633 0.00871355 72.0499 72.0768 D 91.2767 0.00871355 91.2632 91.2901 E 98.5767 0.00871355 98.5632 98.5901 F 99.8233 0.00871355 99.8099 99.8368 -Total 18 74.9694 Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 33.9867 X B 54.09 X C 72.0633 X D 91.2767 X E 98.5767 X F 99.8233 X -Contrast Difference iii Cao ethyl acetate ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 13243.5 2648.7*********** 0.0000 Within groups 0.000266667 12 0.0000222222 Total (Corr.) 13243.5 17 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 25.1467 0.00272166 25.1425 25.1509 B 47.6867 0.00272166 47.6825 47.6909 C 67.8467 0.00272166 67.8425 67.8509 D 88.73 0.00272166 88.7258 88.7342 E 97.15 0.00272166 97.1458 97.1542 F 98.5767 0.00272166 98.5725 98.5809 -Total 18 70.8561 Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 25.1467 X B 47.6867 X C 67.8467 X D 88.73 X E 97.15 X F 98.5767 X -Contrast Difference Ethyl acetate : ethanol (8:2) ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 17898.8 3579.7721478609.98 0.0000 Within groups 0.002 12 0.000166667 Total (Corr.) 17898.8 17 iv Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 15.6133 0.00745356 15.6018 15.6248 B 30.6933 0.00745356 30.6818 30.7048 C 47.2433 0.00745356 47.2318 47.2548 D 83.1833 0.00745356 83.1718 83.1948 E 94.6233 0.00745356 94.6118 94.6348 F 95.2933 0.00745356 95.2818 95.3048 -Total 18 61.1083 Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 15.6133 X B 30.6933 X C 47.2433 X D 83.1833 X E 94.6233 X F 95.2933 X -Contrast Difference Cao ethanol ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 21611.6 4322.3270728912.87 0.0000 Within groups 0.000733333 12 0.0000611111 Total (Corr.) 21611.6 17 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 10.1067 0.00451335 10.0997 10.1136 B 18.74 0.00451335 18.733 18.747 C 31.6133 0.00451335 31.6064 31.6203 D 63.6833 0.00451335 63.6764 63.6903 E 94.0233 0.00451335 94.0164 94.0303 F 97.0133 0.00451335 97.0064 97.0203 -Total 18 52.53 v Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 10.1067 X B 18.74 X C 31.6133 X D 63.6833 X E 94.0233 X F 97.0133 X -Contrast Difference Bảng 2: Gía trị IC50 cao c ết từ Cóc Đỏ v c ất c ống oxy óa BHT, acid ascorbic ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.28635E6 257270.000000000000 0.0000 Within groups 0.000333333 12 0.0000277778 Total (Corr.) 1.28635E6 17 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 15.9733 0.00272166 15.9691 15.9775 B 20.5667 0.00272166 20.5625 20.5709 C 31.14 0.00272166 31.1358 31.1442 D 41.01 0.00272166 41.0058 41.0142 E 4.06333 0.00272166 4.05914 4.06753 F 739.193 0.00272166 739.189 739.198 -Total 18 141.991 vi Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -E 4.06333 X A 15.9733 X B 20.5667 X C 31.14 X D 41.01 X F 739.193 X Contrast Difference Bảng 4: Kết ng ên cứu ản ƣởng p-nitrophenyl-α-D- glucosidase ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.00162228 0.000324456 1168.04 0.0000 Within groups 0.00000333333 12 2.77778E-7 Total (Corr.) 0.00162561 17 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 0.0193333 0.00030429 0.0188645 0.0198021 B 0.0276667 0.00030429 0.0271979 0.0281355 C 0.0353333 0.00030429 0.0348645 0.0358021 D 0.0433333 0.00030429 0.0428645 0.0438021 E 0.045 0.00030429 0.0445312 0.0454688 F 0.0436667 0.00030429 0.0431979 0.0441355 -Total 18 0.0357222 vii Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 0.0193333 X B 0.0276667 X C 0.0353333 X D 0.0433333 X F 0.0436667 X E 0.045 X -Contrast Difference Bảng 5: Kết k ả ức c ế enzyme -glucos dase cao c ết Cao n-hexane ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3325.99 1108.6644346576.33 0.0000 Within groups 0.0002 0.000025 Total (Corr.) 3325.99 11 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 27.2733 0.00288675 27.2686 27.278 B 42.4233 0.00288675 42.4186 42.428 C 54.55 0.00288675 54.5453 54.5547 D 72.7233 0.00288675 72.7186 72.728 -Total 12 49.2425 Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 27.2733 X B 42.4233 X C 54.55 X D 72.7233 X -Contrast Difference viii Ethyl acetate ANOVA Table for Col_3 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2429.25 809.74924292474.25 0.0000 Within groups 0.000266667 0.0000333333 Total (Corr.) 2429.25 11 Table of Means for Col_3 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 19.2333 0.00333333 19.2279 19.2388 B 30.7567 0.00333333 30.7512 30.7621 C 42.3067 0.00333333 42.3012 42.3121 D 57.6867 0.00333333 57.6812 57.6921 -Total 12 37.4958 Multiple Range Tests for Col_3 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -A 19.2333 X B 30.7567 X C 42.3067 X D 57.6867 X -Contrast Difference Bảng 3.6: Gía trị IC50 thể khả ức chế enzyme -glucosidase cao chiết từ Cóc Đỏ acarbose ANOVA Table for Col_5 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 24089.2 6022.31********* 0.0000 Within groups 0.000333333 10 0.0000333333 Total (Corr.) 24089.2 14 ix Table of Means for Col_5 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 34.7733 0.00333333 34.7681 34.7786 B 71.1633 0.00333333 71.1581 71.1686 C 80.7667 0.00333333 80.7614 80.7719 D 143.283 0.00333333 143.278 143.289 E 33.4333 0.00333333 33.4281 33.4386 -Total 15 72.684 Multiple Range Tests for Col_5 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -E 33.4333 X A 34.7733 X B 71.1633 X C 80.7667 X D 143.283 X -Contrast Difference Bảng 7: Gía trị IC50 cao c ết p ân oạn n-hexane, ethyl acetate, et yl acetate: et anol (8:2), et anol Cóc Đỏ v Cóc Trắng Cao n-hexane ANOVA Table for Col_2 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 46498.9 23249.5*********** 0.0000 Within groups 0.0002 0.0000333333 Total (Corr.) 46498.9 Table of Means for Col_2 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 34.7667 0.00333333 34.7609 34.7724 B 186.573 0.00333333 186.568 186.579 C 33.4333 0.00333333 33.4276 33.4391 -Total 84.9244 x Multiple Range Tests for Col_2 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -C 33.4333 X A 34.7667 X B 186.573 X -Contrast Difference Cao ethyl acetate ANOVA Table for Col_3 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 11252.0 5626.01*********** 0.0000 Within groups 0.0002 0.0000333333 Total (Corr.) 11252.0 Table of Means for Col_3 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 71.1567 0.00333333 71.1509 71.1624 B 119.813 0.00333333 119.808 119.819 C 33.4333 0.00333333 33.4276 33.4391 -Total 74.8011 Multiple Range Tests for Col_3 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -C 33.4333 X A 71.1567 X B 119.813 X -Contrast Difference xi Cao ethyl acetate : ethanol (8:2) ANOVA Table for Col_4 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 14014.7 7007.37*********** 0.0000 Within groups 0.0002 0.0000333333 Total (Corr.) 14014.7 Table of Means for Col_4 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 80.7733 0.00333333 80.7676 80.7791 B 130.087 0.00333333 130.081 130.092 C 33.4333 0.00333333 33.4276 33.4391 -Total 81.4311 Multiple Range Tests for Col_4 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -C 33.4333 X A 80.7733 X B 130.087 X -Contrast Difference Cao ethanol ANOVA Table for Col_5 by Col_1 Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 56895.6 28447.8*********** 0.0000 Within groups 0.0002 0.0000333333 Total (Corr.) 56895.6 xii Table of Means for Col_5 by Col_1 with 95.0 percent LSD intervals -Stnd error Col_1 Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit -A 143.283 0.00333333 143.278 143.289 B 227.633 0.00333333 227.628 227.639 C 33.4333 0.00333333 33.4276 33.4391 -Total 134.783 Multiple Range Tests for Col_5 by Col_1 -Method: 95.0 percent Duncan Col_1 Count Mean Homogeneous Groups -C 33.4333 X A 143.283 X B 227.633 X -Contrast Difference xiii ... sử ụng thí nghi m 32 2.4 Nghiên cứu khả k oxy óa cao chiết từ Cóc Đỏ 2.4.1 Mục đích hảo sát khả kháng oxy h C Đỏ từ h nr kháng oxy h ph n o n ủ ƣợ ph n o n khả kháng oxy h ph n o n o hiết ƣợ... 1996 Tr n sở nh m nghi n ứu húng ề xuất ề t i:“ Nghiên cứu khả ức chế enzyme α-glucosidase hoạt tính kháng oxi hóa cao chiết Cóc Đỏ (Lumnitzera littorea)? ?? V i ti u hí ặt r l l m ảnh hƣởng t i... ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - - BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CỦA SINH VIÊN THAM GIA XÉT GIẢI THƢỞNG NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN CẤP TRƢỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ