Phân lập, tuyển chọn một số chủng nấm cộng sinh có khả năng phân giải photphat và kích thích sinh trưởng IAA trong sản xuất rau mầm

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KINH TẾ - KỸ THUẬT CÔNG NGHIỆP KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM PHẠM TRUNG ĐỨC PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG NẤM CỘNG SINH CÓ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI PHOTPHAT VÀ KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG IAA TRONG SẢN XUẤT RAU MẦM LUẬN VĂN THẠC SI CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM HÀ NỘI 2021 BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC KINH TẾ - KỸ THUẬT CÔNG NGHIỆP PHẠM TRUNG ĐỨC PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG NẤM CỘNG SINH CÓ KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI PHOTPHAT VÀ KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG IAA TRONG SẢN XUẤT RAU MẦM LUẬN VĂN THẠC SI Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số Người hướng dẫn khoa học 1: TS Nguyễn Thị Mai Hương Người hướng dẫn khoa học 2: TS Phạm Thị Thu Hồi HÀ NỢI 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực Tôi xin cam đoan giúp đỡ việc hồn thành luận văn cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 23 tháng 12 năm 2021 HỌC VIÊN Phạm Trung Đức i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp này, bên cạnh cố gắng nỗ lực thân, nhận giúp đỡ nhiều cá nhân tập thể Đầu tiên, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cô TS Nguyễn Thị Mai Hương, TS Phạm Thị Thu Hoài - Trường Đại học Kinh Tế Kỹ Thuật Công Nghiệp người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện tốt giúp tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Qua đây, xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô Khoa Công nghệ thực phẩm – Đại học Kinh tế Kỹ thuật Công nghiệp Cuối cùng, với lịng biết ơn, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè động viên, khích lệ giúp đỡ tơi suốt thời gian vừa qua Trong q trình thực tập, hồn thiện luận văn tơi khơng tránh khỏi sai sót, kính mong nhận ý kiến đóng góp thầy bạn để báo cáo hồn thiện Tơi xin chân thành cảm ơn! HỌC VIÊN Phạm Trung Đức ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ẢNH MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở lý luận đề tài 1.2 Cơ sở thực tiễn 1.3 Giới thiệu khu hệ nấm cộng sinh đất rễ 1.3.1 Phân loại khu hệ nấm cộng sinh đất rễ 1.3.1.1 Nấm Ectotrophicmycorrhiz) 1.3.1.2 1.3.1.3 Nấm rễ nội ng 1.4 Vai trò khu hệ nấm cộng sinh đất rễ chủ 1.4.1 Tăng khả hấp thụ Pho 1.4.2 Hình thành chất kích thích 1.4.3 Nâng cao sức chống chịu 1.4.4 Tăng khả kháng bệnh 1.5 Tổng quan công trình nghiên cứu ngồi nước có liên quan 1.5.1 Trên giới 1.5.2 Tại Việt Nam 1.6 Tình hình ni trồng phát triển dược liệu Việt Nam 1.6.1 Thực trạng nguồn dược liệu thiên nhiên 1.6.2 Tình hình phát triển dược liệu CHƯƠNG 2: MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU iii 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 30 2.2 Đối tượng nghiên cứu 30 2.3 Nội dung nghiên cứu 30 2.4 Phạm vi nghiên cứu 30 2.5 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học thực tiễn 31 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 3.1 Nguyên Vật Liệu 32 3.1.1 Mẫu thí nghiệm 32 3.1.2 Hóa chất dụng cụ thí nghiệm 32 3.1.3 Thiết bị phòng thí nghiệm 32 3.1.4 Môi trường nuôi cấy 32 3.2 Phương pháp nghiên cứu 33 3.2.1 Phương pháp thu thập mẫu 33 3.2.2 Phương pháp phân lập chủng nấm vùng rễ 33 3.3.3 Phương pháp định lượng khả phân giải photphat khó tan nấm rễ 34 3.3.4 Xác định khả sinh tổng hợp IAA nấm rễ 34 3.3.5 Xác định khả kích thích sinh trưởng thực vật chủng nấm vùng rễ 34 3.3.6 Phương pháp xác định hoạt tính enzyme phosphataza nấm vùng rễ 35 3.3.7 Đánh giá hiệu nảy mầm sản xuất rau mầm 35 3.4 Quy trình thử nghiệm nảy mầm sản xuất rau mầm 35 3.4.1 Quy trình trồng rau mầm 35 3.4.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ IAA đến nảy mầm rau cải mầm 36 3.4.3 Ảnh hưởng chủng nấm cộng sinh có khả sản sinh chất kích thích IAA đến sinh trưởng rau cải mầm 37 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 38 iv CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 4.1 Thu thập xử lý mẫu vùng rễ đất trồng số (cỏ ngọt, đinh lăng, bạch chỉ) số vùng phía Bắc Việt Nam 39 4.2 Phân lập khu nấm vùng rễ mẫu thu thập 40 4.3 Tuyển chọn chủng có khả phân giải photphat sản sinh chất kích thích sinh trưởng IAA chủng phân lập 44 4.3.1 Đánh giá hoạt tính enzyme phosphatase chủng nấm vùng rễ phân lập .44 4.3.2 Đánh giá khả phân giải photphat khó tan 46 4.3.3.Đánh giá khả sản sinh chất kích thích sinh trưởng IAA chủng nấm 47 4.3.4 Xác định khả đối kháng chủng nấm vùng rễ .49 4.4 Đánh giá đa dạng sinh học 50 4.5 Thử nghiệm đánh giá hiệu phân giải phophat sản sinh chất kích thích sinh trưởng IAA chủng phân lập sản xuất rau mầm .55 4.5.1 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến nảy mầm rau cải mầm 55 4.5.2 Ảnh hưởng chủng nấm cộng sinh có khả sản sinh chất kích thích IAA đến sinh trưởng rau cải mầm 56 KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 58 Kết luận 58 Kiến nghị 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT T vi DANH MỤC BẢNG BIỂU Commented [D1]: Thứ tự: xếp Danh mục bảng biểu đặt trước Danh mục hình vẽ đồ thị Bảng 2.1 Thành p Bảng 4.1 Sự hấp t Bảng 5.1 Ký hiệu Bảng 5.2 Đặc điểm Bảng 5.3 Đánh giá Bảng 5.4 Khả năn Bảng 5.5 Khả năn Bảng 5.6 Khả năn Bảng 5.7: Bảng đá photpha Bảng 5.8 Ảnh hưở mầm hạt Bảng 5.9 Ảnh hưở rau cải m vii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Hình 2.2 Hình 4.1 Hình 5.1 Hình 5.2 Hình 5.3 Hình 5.4 Hình 5.5 Hình 5.6 Hình 5.7 Hình 5.8 Hình 5.9 Hinh 5.10 Hình 5.11 Hình 5.12 Hinh 5.13 Hình 5.14 viii - Phân bố theo khu vực : Cỏ có 04 chủng rễ 03 chủng đất, Đinh Lăng có 06 chủng đất 05 chủng đất, Bạch có 06 chủng rễ 03 chủng đất - Các chủng có màu sắc đa dạng, có 14 chủng màu trắng (52%), chủng màu đen (22%),3 chủng màu xám(11%) lại chủng màu xanh vàng (7.5%) Dựa kết đánh giá khả phân giải photphat chủng nấm, khả sản sinh chất kích thích sinh trưởng IAA, khả đối kháng chủng lựa chọn từ bảng 4.4 bảng 4.5, 4.6 Chúng thu kết sau: Bảng 4.7: Bảng đánh giá đa dạng sinh học dựa vào khả phân giải photphat khả sản sinh chất IAA TT 51 Hình 4.8: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng CN7 Hình 4.9: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng ĐL1 52 Hinh 4.10: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng ĐL3 Hình 4.11: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng BC1 53 Hình 4.12 : Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng BC6 Hình 4.13: Đặc điểm hình thái khuẩn lạc chủng BC7 54 4.5 Thử nghiệm đánh giá hiệu phân giải phophat sản sinh chất kích thích sinh trưởng IAA chủng phân lập sản xuất rau mầm 4.5.1 Ảnh hưởng nồng độ IAA đến nảy mầm rau cải mầm Tiến hành ngâm hạt rau cải mầm dung dịch nuôi cấy 3.3.5 thí nghiệm xử lý riêng rẽ chủng nấm cộng sinh vùng rễ với nồng độ IAA là: ppm; 10 ppm; 15 ppm; 20 ppm Thời gian ngâm hạt trước gieo công thức giờ Đối chứng ngâm nước lã Kết khảo sát ảnh hưởng xử lý IAA cho hạt trước gieo sau ngày thí nghiệm trình bày Bảng 4.8 Bảng 4.8: Ảnh hưởng nồng độ mầm hạt rau cải sau ngày thí nghiệm Chủng VSV Nồng độ (ppm) Lưu ý: Trong cột số có chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa thống kê mức 5% (p