Mục tiêu nghiên cứu của bài viết là khảo sát đặc điểm hình thái, vi học của Ráy gai nhằm cung cấp cơ sở dữ liệu về thực vật học để giúp nhận diện, kiểm nghiệm dược liệu.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌC LOÀI RÁY GAI (LASIA SPINOSA (L.) THWAITES), HỌ RÁY (ARACEAE) Trần Thị Thu Trang1, Trương Thị Đẹp1 TÓM TẮT Mở đầu: Ráy gai dùng y học dân gian nhiều nước để trị bệnh gan, viêm khớp… chưa có tài liệu nghiên cứu giải phẫu lồi Việt Nam Mục tiêu: Khảo sát đặc điểm hình thái, vi học Ráy gai nhằm cung cấp s liệu thực vật học để giúp nhận diện, kiểm nghiệm dược liệu Đối tượng phương pháp: Phân tích, mơ tả, chụp hình đặc điểm hình thái, giải phẫu bột toàn loài Ráy gai TP Hồ Chí Minh Xác định tên khoa học lồi cách so sánh đặc điểm khảo sát với tài liệu Kết quả: Hình thái: Thân rễ hình trụ Phiến xẻ lơng chim, thùy thn dài Tồn có nhiều gai nhọn Bơng mo có mo dài, m gốc Hoa đều, lưỡng tính, mẫu 4-6 Phiến hoa hình thìa, có nhị ngắn, bao phấn Bầu ơ, nỗn, đính Giải phẫu: Rễ cấu tạo cấp 1, nội bì có đai Caspary, 13-14 bó dẫn Thân rễ có bần, mơ mềm chứa tinh bột, nhiều bó dẫn cấp Phiến cấu tạo dị thể; mô mềm có tinh thể calci oxalat hình kim Bột thân rễ có nhiều hạt tinh bột thn dài, tễ dạng vạch hay điểm, kích thước 20-50 µm X 10-20 µm; tinh thể calci oxalat hình kim dài 100-120 µm Kết luận: Các đặc điểm hình thái, giải phẫu bột thân rễ Ráy gai - Lasia spinosa (L.) Thwaites giúp nhận dạng kiểm nghiệm mặt vi học Từ khóa: asia spinosa, đặc điểm hình thái, giải phẫu, bột thân rễ ABSTRACT BOTANICAL CHARACTERISTICS OF LASIA SPINOSA (L.) THWAITES (ARACEAE) Tran Thi Thu Trang, Truong Thi Dep * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Vol 25 - No - 2021: 29 - 36 Background: Lasia spinosa (L.) Thwaites is used in traditional medicine of many countries for treatment of hepatopathy, rheumatism… However, literatures related to anatomy of species haven’t been recorded in Vietnam Objectives: In this study, morphological and anatomical characteristics of Lasia spinosa (L.) Thwaites were performed for plant identification Methods: Morphological anatomical characteristics and micrology characteristics of used parts powder of Lasia spinosa (L.) Thwaites in Ho Chi Minh City are analysed, described and photoghraphed The scientific name of this species was determined by comparing morphological and anatomical characteristics with those of literatures Results: Morphology: Cylindrical rhizome Deeply divided leaf blade, oblong lobes Stem and leaves with many stout prickles Spadix has a long spathe with the open base Flower: regular, bisexual, 4-6 merous Oblong tepals with triangular hooded apex; locular ovary, ovule, apical placentation; short filaments, bilocular anthers Anatomy: Root: Primary structure with 13-14 vascular bundles, endodermis with casparian strip Rhizome: many cork layers, a lot of starch granules in parenchyma, many primary vascular bundles eaves’mesophyll is differentiated into two kinds of cells; parenchyma contains the calcium oxalate raphides Rhizome powder: the calcium oxalate raphides 100-120 µm in size, starch granules 20-50 µm X 10-20 µm in size, oblong shape, point or line hilum Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS.DS Trần Thị Thu Trang ĐT: 0389912433 B - Khoa học Dược Email: thutrang@ump.edu.vn 29 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Conclusions: The morphological anatomical characteristics and rhizome powder of Lasia spinosa (L.) Thwaites help to identify species more exactly Keywords: Lasia spinosa, morphology, anatomy, rhizome powder ĐẶT VẤNĐỀ Khảo sát đặc điểm giải phẫu Ráy gai - Lasia spinosa (L.) Thwaites thuộc họ Ráy (Araceae) thuốc dùng y học dân gian nhiều nước Đông Nam Á, Ấn Độ, Sri Lanka để chữa ho, đau bụng, phù thũng, tê thấp, lưng, đầu gối đau, bàn chân tê buốt, bệnh gan, di chứng sốt rét(1) phế nhiệt, nước tiểu vàng đỏ, đau thắt(2), viêm khớp dạng thấp, táo bón, lọc máu, nhiễm giun(3), trị bệnh trĩ, cao huyết áp, chó dại cắn(4) Các nghiên cứu giới cho thấy có hoạt tính chống giun sán, kháng khuẩn, kháng viêm, chống oxy hóa, giảm đường huyết, giảm lipid máu, chống khối u(3,5) Đặc điểm hình thái giải phẫu sở để nhận diện loài Ráy gai để kiểm nghiệm dược liệu phương pháp vi học Tuy nhiên, chưa có tài liệu nghiên cứu giải phẫu loài Việt Nam Do vậy, báo mơ tả đặc điểm hình thái vi học loài Ráy gai thu hái TP Hồ Chí Minh, Việt Nam nhằm xác định tên khoa học loài cung cấp sở liệu thực vật học để giúp nhận diện kiểm nghiệm dược liệu Cắt ngang rễ, thân rễ, phiến lá, cuống lá, bẹ thành lát mỏng dao lam Rễ cắt khoảng 1/3 phía Phiến lá, cuống bẹ cắt khoảng 1/3 phía phiến, cuống bẹ không sát đáy; phiến cắt phần gân phần phiến hai bên gân Nhuộm vi phẫu son phèn lục iod Quan sát vi phẫu kính hiển vi quang học (hiệu Olympus, model CH20) nước, chụp ảnh mô tả cấu trúc Bột dược liệu: Bộ phận dùng cắt nhỏ sấy nhiệt độ 60-70 oC đến khơ, nghiền rây qua rây số 32 (đường kính lỗ rây 0,1 mm) Quan sát thành phần bột nước cất kính hiển vi quang học Mô tả chụp ảnh thành phần ĐỐI TƯỢNG- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU Vật liệu nghiên cứu Mẫu tươi có đầy đủ phận rễ, thân rễ, hoa loài Ráy gai thu hái vào tháng 4-5 năm 2018 dọc theo bờ kênh rạch, ao hồ quận Thủ Đức, huyện Nhà Bè, TP Hồ Chí Minh Tên khoa học lồi Lasia spinosa (L.) Thwaites thuộc họ Ráy (Araceae), xác định cách dựa vào đặc điểm hình thái phân tích cây, so với tài liệu(1,2,4,6-8) Khảo sát đặc điểm hình thái Các đặc điểm hình thái quan sát mắt thường, kính lúp hay kính hiển vi soi nổi; mơ tả chụp hình đặc điểm khảo sát 30 KẾT QUẢ Đặc điểm hình thái Thân cỏ cao 1,2-1,5m, sống dai nhờ thân rễ Thân rễ hình trụ, màu xanh lục, có nhiều gai nhọn, tiết diện gần trịn, mặt cắt ngang màu nâu đỏ, có nhiều đốm nâu nhạt Lá đơn, mọc cách Phiến xẻ lông chim lần, thùy thuôn dài, đầu nhọn; kích thước 30-40 cm x 55-60 cm Cuống dài 55-70 cm Bẹ hình lịng máng, dài 13-15 cm Tồn có nhiều gai nhọn Cụm hoa: Bơng mo nách Mo hình trứng thn dài, kích thước 32,5-34 cm x 4,5-4,7 cm, mặt màu đỏ thẫm; mặt màu vàng cam gốc, phần chuyển dần sang màu đỏ thẫm, mép uốn lượn Mo mọc thẳng đứng, cuộn xoắn non, mở phần gốc 7-8 cm trưởng thành Bơng nạc, hình trụ, dài 2,5-3 cm, đường kính 0,5-1 cm, gồm nhiều hoa xếp khít suốt bề dài bơng Hoa đều, lưỡng tính Bao hoa: 4-6 phiến hoa gần đều, rời, đính vịng; phiến có hình thìa, kích thước 0,1-0,2 cm x 0,1-0,3 cm, 2/3 bên màu vàng nhạt, bên màu hồng cam Bộ nhị: 4-6 nhị, đều, rời, đính vịng, đối diện phiến hoa Chỉ nhị hình phiến B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 dẹp gốc hẹp, loe dần phía trên, dài 0,1-0,2 cm, màu nâu Bao phấn ơ, hình bầu dục, nứt dọc, hướng ngồi, đính đáy, màu vàng nhạt Hạt phấn màu vàng, hình bầu dục, có rãnh, dài 22-27 µm Bộ nhụy: Bầu hình trứng ngược, cao 0,2-0,3 cm, 2/3 phía màu hồng, phía màu vàng, mặt ngồi có đốm trắng; nỗn tạo bầu ơ, chứa nỗn, đính nỗn đầu nhụy hình đĩa, màu cam Quả mọng, có gai ngắn đỉnh Hạt 1, khơng phơi nhũ (Hình 2) Đặc điểm giải phẫu Rễ Vi phẫu gần trịn Vùng vỏ: Tầng lơng hút tế bào hình đa giác, vách tẩm chất bần, rải rác có lơng hút Tầng suberoid 4-5 lớp tế bào hình đa giác, lớp ngồi có kích thước to, vách tẩm chất bần mỏng Mô mềm vỏ chia vùng: mô mềm vỏ ngồi đạo, tế bào hình đa giác gần trịn; mơ mềm vỏ gồm 27-28 lớp tế bào, có nhiều khuyết to Nội bì có đai caspary rõ Vùng trung trụ: Trụ bì 1-2 lớp tế bào vách cellulose Hệ thống dẫn gồm 13-14 bó libe xen kẽ với 13-14 bó tiền mộc xếp vịng, cách tia tủy Bó libe tạo thành cụm nhỏ Bó tiền mộc gồm 3-5 mạch gỗ, phân hóa hướng tâm 29-31 mạch hậu mộc thường nằm riêng lẻ 2-3 mạch dính xếp lộn xộn khắp vùng mô mềm tủy Tia tủy 1-3 dãy tế bào mơ mềm hình đa giác dẹp, vách cellulose Mơ mềm tủy tế bào hình đa giác, xếp khít nhau, vách cellulose uốn lượn Tinh thể calci oxalat hình cầu gai, hình khối hay hình kim có rải rác tế bào mơ mềm vỏ tủy (Hình 3) Thân rễ Vi phẫu gần trịn, vị trí gai lồi nhọn Biểu bì lớp tế bào hình đa giác, mặt ngồi có lớp cutin cưa Mơ dày góc 2-4 lớp tế bào hình đa giác Mơ mềm có tế bào hình đa giác gần trịn, khơng phân biệt rõ ranh giới vùng vỏ vùng B - Khoa học Dược Nghiên cứu trung trụ Mô mềm vỏ xếp tạo thành đạo hay khuyết nhỏ Mô mềm tủy xếp tạo thành khuyết lớn, chứa đầy hạt tinh bột hình thn dài Nhiều bó libe gỗ cấp xếp rải rác khắp mô mềm tủy, riêng lẻ bó với libe gỗ thường xếp thành cụm gồm đến nhiều bó; cụm có libe giữa, mạch gỗ xếp thành hình cung, hình vịng, hai cụm đối diện hay thành ba cụm góc quanh libe Trên libe thường có cụm mơ cứng, tế bào hình đa giác, khơng đều, vách tẩm chất gỗ, xếp khít Tinh thể calci oxalat hình kim riêng lẻ hay tập trung thành bó hay hình cầu gai có rải rác mơ dày mơ mềm (Hình 1) Lá Gân phẳng mặt trên, lồi trịn mặt Biểu bì biểu bì gồm lớp tế bào hình đa giác, mặt ngồi hóa cutin cưa mỏng, rải rác có lỗ khí Trên biểu bì đơi gặp gai cấu tạo nhiều tế bào Mơ dày góc 1-2 lớp mơ dày góc 2-3 lớp tế bào hình đa giác Dưới mơ dày 3-5 lớp mơ mềm khuyết, tế bào hình đa giác, kích thước nhỏ, chứa nhiều lục lạp Mô mềm đạo khuyết, tế bào hình đa giác gần trịn, rải rác vùng mơ mềm có nhiều khuyết lớn Nhiều bó libe gỗ cấp kích thước khơng đều, vào tâm kích thước lớn, xếp lộn xộn; gỗ có 3-18 mạch gỗ gần trịn nằm vùng mơ mềm gỗ vách cellulose Trên gỗ libe cụm mơ cứng gồm 2-6 lớp tế bào hình đa giác, vách tẩm chất gỗ mỏng Tinh thể calci oxalat hình cầu gai có rải rác tế bào mơ mềm, tập trung nhiều tế bào bìa khuyết hình kim có tế bào có kích thước lớn Phiến lá: Biểu bì biểu bì giống Mô mềm giậu 1-2 lớp tế bào Dưới tế bào biểu bì có 1-3 tế bào mô mềm giậu Vùng mô mềm khuyết dày gấp 2,5-3 lần vùng mô mềm giậu Trong thịt rải rác có bó libe gỗ kích thước nhỏ xếp thành hàng, cấu tạo tương tự bó mạch gân Tinh thể calci oxalat rải rác, có dạng: tinh thể hình kim 31 Nghiên cứu mơ mềm tinh thể hình cầu gai vùng mơ mềm giậu (Hình 3) Cuống Vi phẫu gần trịn Biểu bì tương tự gân Mơ dày góc 3-13 lớp tế bào hình đa giác Mơ mềm đạo; rải rác có nhiều khuyết lớn Các bó dẫn kích thước khơng đều, vào to, xếp lộn xộn Mỗi bó có libe ngồi, gỗ Bao quanh bó libe gỗ thường lớp tế bào hình đa giác chứa tinh bột Tinh thể calci oxalat có dạng: hình cầu gai rải rác mô mềm, tập trung nhiều tế bào bìa khuyết; hình kim rải rác tế bào mơ dày có kích thước lớn Bẹ Vi phẫu lồi tròn mặt dưới, mặt lõm bên kéo dài thành cánh mỏng không Cấu tạo giống gân phiến Tuy nhiên, biểu bì khơng có mơ mềm giậu biểu bì có 1-2 lớp mơ dày góc; cánh, khơng có mơ dày, bó dẫn xếp thành 1-2 hàng Đặc điểm bột dược liệu Bột màu xanh đậm, có nhiều xơ màu vàng nhạt, không mùi, vị nhạt Quan sát kính hiển vi có thành phần sau: mảnh mơ mềm; mảnh mơ mềm giậu với biểu bì; mảnh biểu bì có mang lỗ khí; tinh thể calci oxalat hình cầu gai kích thước 17-50 µm; tinh thể calci oxalat hình khối kích thước 36-38 µm X 17-18µm; mảnh biểu bì tế bào hình đa giác; mảnh mạch xoắn, mảnh mạch vạch; sợi vách mỏng đứng riêng lẻ hay tập trung thành bó; nhiều tinh thể calci oxalat hình kim dài 57-85 µm riêng lẻ hay tập trung thành bó (Hình 4) Bột rễ màu nâu nhạt, có nhiều xơ, khơng mùi, vị nhạt Quan sát kính hiển vi có thành phần sau: mảnh mơ mềm; mảnh mạch vạch; tinh thể calci oxalat hình cầu gai kích thước 17-40 µm, nhiều tinh thể calci oxalat hình kim dài 40-50µm riêng lẻ hay tập trung thành bó (Hình 4) 32 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Bột thân rễ màu nâu cam, không mùi, vị nhạt Quan sát kính hiển vi có thành phần sau: mảnh biểu bì tế bào hình đa giác; mảnh mơ mềm chứa tinh bột tế bào hình gần trịn; mảnh mạch xoắn; mảnh mạch vạch; sợi vách mỏng đứng riêng lẻ hay tâp trung thành bó; tinh thể calci oxalat hình kim dài 100-120 µm riêng lẻ hay tập trung thành bó; tinh thể calci oxalat hình cầu gai kích thước 50-65 µm; hạt tinh bột hình thn dài hay hình trứng thn dài, tễ dạng vạch hay điểm, kích thước 20-50 µm X 1020 µm (Hình 4) BÀNLUẬN Đặc điểm hình thái lồi Ráy gai thu hái TP Hồ Chí Minh, ngồi cịn gặp Khu Bảo tồn Bình Châu – Phước Bửu, Bà Rịa – Vũng Tàu, hoàn toàn giống với đặc điểm loài Lasia spinosa (L.) Thwaites kiểu hình thái xẻ nêu tài liệu nước(1,2,4) tài liệu nước ngoài(6,7) Điều cho thấy kiểu hình thái phổ biến Ráy gai miền Nam Việt Nam Trên giới có tài liệu(8) nghiên cứu giải phẫu rễ cuống loài Ấn Độ, đặc điểm giải phẫu rễ, cuống nghiên cứu giống với phần mô tả vi phẫu rễ, mà đề tài thực Bên cạnh đó, đặc điểm cấu tạo giải phẫu thân rễ lần mô tả chi tiết với ảnh chụp vi phẫu Đề tài khảo sát bột phận dùng làm thuốc thân rễ mà Việt Nam chưa tài liệu mô tả Các kết góp phần nhận diện, kiểm nghiệm dược liệu tạo tiền đề cho nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng làm thuốc Ráy gai Việt Nam KẾT LUẬN Các đặc điểm hình thái rễ, thân rễ, lá, hoa, cấu tạo giải phẫu rễ, thân rễ, lá, cuống lá, bẹ thành phần bột rễ, thân rễ, Ráy gai - Lasia spinosa (L.) Thwaites kiểu hình thái xẻ mô tả cách chi tiết, giúp nhận dạng kiểm nghiệm vi học loài B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Hình Đặc điểm giải phẫu thân rễ Lasia spinosa (L.) Thwaites Hình Đặc điểm hình thái Lasia spinosa (L.) Thwaites B - Khoa học Dược 33 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Hình Đặc điểm giải phẫu rễ, Lasia spinosa (L.) Thwaites 34 B - Khoa học Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Nghiên cứu Hình Đặc điểm bột rễ, thân rễ Lasia spinosa (L.) Thwaites B - Khoa học Dược 35 Nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Hoàng Hộ (2000) Lasia spinosa (L.) Thwaites In: Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt Nam, V3, pp.346 Nhà Xuất Bản Trẻ, TP HCM Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, et al (2006) Ráy gai In: Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, et al Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, V2, pp.617-618 NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Kumar M, Mondal P, Borah S, et al (2013) Physico-chemical evaluation, preliminary phytochemical investigation, fluorescence and TLC analysis of leaves of the plant Lasia spinosa (Lour) Thwaites International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 5(2):306-310 Võ Văn Chi (2012) Ráy gai In: Võ Văn Chi Từ điển thuốc Việt Nam, V2, pp.152-153 Nhà Xuất Bản Y Học, Hà Nội Kankanamg SU, Amarathunga DN (2017) Phytochemical and ethno-pharmacological properties of Lasia spinosa (Kohila): A review World Journal of Pharmaceutical Research, 6(13):1-9 36 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Li H, Zhu G, Boyce P, et al (2010) Araceae In: Li H, Zhu G, Boyce P, et al Flora of China URL: http://www.efloras.org/florataxon.aspx?flora_id=2&taxon_id= 200027287 (access on 25/11/2020) Kumari T, Rajapaksha R, Karunarathne L, et al (2017) Morphological characterization of Lasia spinosa (L.) Thw.: Screening of indigenous crop genetic resources for future food and nutritional security Sri Lanka Journal of Food and Agriculture, 3(2):29-36 Hore P (2015) Studies on karyomorphology and in vitro propagation of Lasia spinosa (Lour.) Thwaites Gauhati University, India Ngày nhận báo: 27/11/2020 Ngày phản biện nhận xét báo: 05/01/2021 gày báo đăng: 20/08/2021 B - Khoa học Dược ... khoa học loài Lasia spinosa (L.) Thwaites thuộc họ Ráy (Araceae), xác định cách dựa vào đặc điểm hình thái phân tích cây, so với tài liệu(1,2,4,6-8) Khảo sát đặc điểm hình thái Các đặc điểm hình... spinosa (L.) Thwaites Hình Đặc điểm hình thái Lasia spinosa (L.) Thwaites B - Khoa học Dược 33 Nghiên cứu Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 25 * Số * 2021 Hình Đặc điểm giải phẫu rễ, Lasia spinosa (L.). .. exactly Keywords: Lasia spinosa, morphology, anatomy, rhizome powder ĐẶT VẤNĐỀ Khảo sát đặc điểm giải phẫu Ráy gai - Lasia spinosa (L.) Thwaites thuộc họ Ráy (Araceae) thuốc dùng y học dân gian nhiều