Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 95 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
95
Dung lượng
6,9 MB
Nội dung
Đặc điểm sinh học virút CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Đặc điểm virút - Virút: yếu tố di truyền không tế bào, gồm nucleic acid bao bọc vỏ protein - Kích thước nhỏ (0,02 – 0,03 m), nhân tế bào chủ - Ở tế bào chủ gọi virion - Tế bào vi khuẩn, động vật, thực vật bị nhiễm virút chuyên biệt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Virion - Bộ gen nhỏ (190kb), DNA mạch kép, DNA mạch đơn, RNA mạch kép RNA mạch đơn - Một số virút có gen phân đoạn thành vài phân tử - Vỏ protein (capsid):cấu tạo tiểu phần (capsomere) tạo hình chuỗi xoắn vỏ 20 mặt - Nucleocapsid: phức hợp capsid gen - Một số virút có cấu trúc đuôi đầu đinh giúp xâm nhiễm tế bào chủ - Virút động vật có màng bao có nguồn gốc từ tế bào chủ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Nuối cấy định lượng virút - Nuôi cấy tế bào chủ - Định lượng kỹ thuật plaque (vòng tan) CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Sự nhân virút tế bào chủ - Các bước xâm nhiễm nhân virút tế bào chủ + Nhận diện, bám dính (attachment) + Xâm nhập (penetration) + Biểu gen sớm + Sao mã + Biểu gen muộn tạo protein vỏ + Lắp vỏ capsid (assembly) nạp gen (packaging) + Phóng thích virút khỏi tế bào - Đặc trưng tăng trưởng virút: đường cong tăng trưởng đơn bậc (one-step-growth curve) + Pha tiềm tàng (latent phase): thời gian dài + Pha trưởng thành (maturation phase): nhanh - Hệ số nhân (burst size): số lượng phần tử virút phóng thích từ tế bào - Thời gian chu kỳ nhân bản: 20-60 phút (phage), 8-40 (virút động vật) CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Sự xâm nhiễm virút vào tế bào chủ - Hai bước xâm nhiễm vào tế bào chủ: + Gắn (attachement) chuyên biệt lên thụ quan bề mặt tế bào + Xâm nhập (penetration): chuyển gen vào tế bào chất - Hệ thống phòng vệ tế bào chủ: không receptor, enzyme cắt giới hạn - Xâm nhập không chuyên biệt: ẩm bào (endocytosis) CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Phiên mã dịch mã vi rút - Gen sớm (early gene): gen mã hóa protein sớm (early protein) biểu trước xảy mã gen vi rút - Gen muộn (late gene): gen mã hóa protein muộn (late protein) biểu sau xảy mã gen vi rút - Phiên mã gen sớm: xảy sau xâm nhập vi rút vào bên tế bào chủ - Quy ước +/- mạch nucleic acid vi rút ª ssDNA+, ssRNA+: mạch có trình tự tương ứng với mRNA ª ssDNA-, ssRNA-: mạch có trình tự bổ sung với mRNA CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Tạo đột biến - Đột biến điểm (site-directed mutagenesis): đột biến in vitro sai khác base: + Dùng oligonucleotide có base biến đổi + Gắn oligonucleotide lên khuôn DNA ban đầu + Kéo dài oligonucleotide DNA polymerase thành DNA mạch kép + Gắn vào vector thể đưa vào tế bào chủ + Kết quả: thay amino acid chuyên biệt phân tử protein + Dùng để kiểm tra thực nghiệm giả thiết mối quan hệ cấu trúc bậc vơiù chức phân tử protein - Đột biến hộp (cassette mutagenesis): thay đổi đoạn DNA (cassette) + Một đoạn DNA gen ban đầu lấy khỏi gen + Thay DNA tổng hợp, thay đổi vài cặp base - Đột biến phá vỡ gen: thay đoạn DNA gen ban đầu đoạn có tính kháng kháng sinh CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Ứng dụng thực tiễn kỹ thuật di truyền - Sản xuất sản phẩm trao đổi chất vi sinh vật - Sản xuất vắcxin phòng chống virus - Sản xuất protein động vật hữu nhũ - Tạo thực vật, động vật chuyển gen - Phân lập ứng dụng nguồn gen vi sinh xử lý môi trường - Tạo thuốc điều hòa thể gen - Liệu pháp gen chữa trị bệnh di truyền CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Sản xuất protein hữu nhũ tái tổ hợp vi sinh vật - Insulin - Vắcxin tái tổ hợp - Vaécxin DNA - Cytokine CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Ứng dụng trồng - Vector tạo dòng tế bào thực vật - Ứng dụng công nghệ sinh học TV CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Ứng dụng vật nuôi y học - Động vật chuyển gen - Di truyền học người CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Các nguyên tắc kỹ thuật di truyền (1) - Hóa học DNA: qui trình ly trích, giải trình tự, tổng hợp DNA - Enzyme học DNA: enzyme cắt giới hạn, ligase, DNA polymerase - Sao chép DNA: chế chép DNA, chép độc lập vector - Plasmid giao nạp: plasmid, chế chép, chuyển gen plasmid - Phage ôn hòa: chế chép, sát nhập phage ôn hòa, chế tải nạp - Biến nạp: phương pháp chuyển DNA trần vào tế bào - Hóa học enzyme học RNA: phương pháp thao tác với mRNA, cấu trúc, chế chế biến mRNA CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Các nguyên tắc kỹ thuật di truyền (2) - Sao chép ngược: RTase, tổng hợp DNA từ mRNA - Phiên mã: nhân tố tham gia điều hòa phiên mã, promoter chế điều hòa operon - Dịch mã: bước dịch mã, gắn ribosome lên mRNA, vai trò mã khởi đầu ý nghóa khung đọc - Hóa học protein: phương pháp ly trích, tinh chế, thử hoạt tính giải trình tự amino acid - Sự tiết protein biến đổi sau dịch mã: chế tiết protein, biến đổi sau dịch mã - Bộ mã di truyền: mã di truyền, tính toàn năng, mã ngoại lệ CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt ... https://fb.com/tailieudientucntt Virút động vật dạng ssRNAMột số virút quan trọng: + Rhabdovirus: rabies virus gây bệnh dại, vesicular stomatitis gây vi? ?m miệng + Orthomyxovirus: influenza virus gây cúm + Paramyxovirus:... https://fb.com/tailieudientucntt Virút động vật dạng ssRNA+ Khá đa dạng, họ Picornavirus có vai trò quan trọng: + Ở người: Poliovirus, gây bại liệt; Rhinovirus, gây cảm; Hepatitis A virus, gây vi? ?m gan siêu vi A + Ở động vật: ... pox virus, adenovirus, iridovirus - Họ virút có gen ssDNA: parvovirus CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt Papovavirus: SV40 - Một số gây ung thư động vật, simian virus 40 (SV40)