Chương 3
Vi sinhvậttrongsảnxuấtsinh khối ( Biomasse)
1. Định nghiã:
Thuật ngữ sinhkhối (biomasse) chỉ toàn bộ khối lượng tế bào visinhvật được thu
hoạch từ quá trình nuôi cấy VSV trong các nồi lên men (Fermentor) có chứa môi
trường dinh dưỡng phù hợp và được thông khí đầy đủ.
2. Mục đích sử dụng:
Sinhkhối VSV thu nhận được trong quá trình lên men công nghiệp trong các fermetor
được sử dụng với nhiều mục đích khác nhau :
1. Dùng làm nguồn thức ăn cho người và vật nuôi. Thí du :
" Sinhkhối tế bào nấm men, vi khuẩn, tảo, nấm được dùng làm thức ăn
" Sinhkhối hemicellulose thu hoạch do lên men nước dứa (Nata de coco)
2. Dùng làm nguồn giống khởi động (Starter culture) trong các quá trình lên men :
" Giống khởi động để lên men sữa chua: Lactobacillus bulgaricus….
" Men làm nổi bánh mì : nấm men Saccharosemyces cerevisiae
3. Được sử dụng làm các chế phẩm sinh học :
" Chế phẩm diệt côn trùng : là sinhkhối của tế bào vi khuẩn còn sống : Bacillus
thuringesis.
" Chế phẩm phân visinh cố định đạm. Nitrazin là sinhkhối tế bào vi khuẩn
Rhizobium.
4. Dùng làm dược phẩm để điều trị. Thí du :
" Dược phẩm Subtilin là sinhkhốivi khuẩn sống Bacillus subtilus dùng điều trị
tiêu chảy.
Dược phẩm Biolactyl là te bào vi khuẩn lactic còn sống dùng trong điều trị rối loạn tiêu
hoá gây tiêu chảy
b Các yếu tố kỹ thuật:
Lên men chìm trong các fermentor có hệ thống sụt khí và khuấy đảo mội trường:
" Nồng độ đường trong dịch nuôi cấy phải bảo đảm 2-4%
" Muối ure 3g/l.
" Superphosphat 4g/l.
" Nhiệt độ nuôi cấy 28-300C.
" Thời gia nuôi cấy 18-36 giờ.
" PH môi trường 4,5-5,5
3. Sảnxuất Protein đơn bào (Single cell protein)
3.1 Định nghĩa:
Protein đơn bào đầu tiên được dùng để chỉ dạng protein thu từ sinhkhối tế bào nấm
men. Nhưng về sau thuật ngữ nầy được mở rộng để chỉ protein thu từ sinhkhối tế bào
vi khuẩn, nấm sợi, tảo, và ngay cả nấm có quả thể. Đặc biệt thành phần hoá học của
protein đơn bào không chỉ đơn thuần là protein mà còn là toàn bộ những sản phẩm sinh
học do VSV tạo ra trong tế bào bao gồm các sản phẩm trao đổi chất bậc 1 và 2 như :
lipid, glucid, acid hưu cơ, acid amin, vitamie, enzime, hormon.
Tóm lại, Protein đơn bào ( Single cell protein) là một thuật ngữ được gọi theo qui ước
dùng để chỉ vật chất tế bào visinhvật được sử dụng làm nguồn thức ăn cho người và
động vật.Thuật ngữ này thật ra không hoàn toàn chính xác, vì thông thường sản phẩm
20
được tạo ra không phải là một protein thuần khiết mà là các tế bào đã được xử lý, thuộc
nhiều loại visinhvật khác nhau, cả đơn bào lẫn đa bào.
3.2 Tiêu chuẩn visinhvật được dùng để sảnxuất protein đơn bào:
" VSV sử dụng được nguồn nguyên liệu rẻ tiền, thường là phụ phẩm của nông
công nghiệp, như rỉ đường, dịch kiềm sulphit, tinh bột , bã miá, rơm rạ….
" Visinhvật có tốc độ tăng trưởng cao.Thí dụ : vi khuẩn 0,3- 2 giờ.
" Hàm lượng protein trong tế bào phải cao (đạt trên 50-60% chất khô).
" Chất lượng protein phải cao, nghĩa là phải có đầy đủ acid amin không thay thế
với tỷ lệ cân đối.
" Khả năng tiêu hóa cao của protein. Khả năng nầy thường bị hạn chế bởi thành
phần nitơ phi protein như : acid nucleic, trong nhân tế bào, glucopeptid trong thành tế
bào.
" Sự an toàn về độc tố.
" Về mặt kỹ thuật, nên chọn những chủng VSV dể tách sinh khối. Chọn chủng có
khả năng chiụ nhiệt để giảm chi phí cho việc làm nguội. Tính không mẫn cảm với sự
tạp nhiễm.
3.3. Các visinhvật dùng trongsảnxuất protein đơn bào
1.Sinh khối SCP từ nấm men:
Rĩ đường - Sacchromyces cerevisiae
Dung dịch đường - Candida utilis.
- Candida tropicalis.
Dịch kiềm sulphit -Cryptococcusdifuens
- Candida utilis.
- Candida tropicalis
-C. robusta, C. crusei.
Tinh bột và nước thải -Endomycopsis+ C. utilis.
tinh bột -E. fibuligera+ C. tropicalis.
Dịch thuỷ phân cellulose - Candida utilis.
- Candida tropicalis
Bã rượu - Candida utilis.
- Candida tropicalis
Nhũ thanh ( Whey) -Torula cremoris.
- T. lactosa
n- alkan -Candida tropicalis
-C. gudlliermondii.
Metan và metanol - Hansenula capsulata.
-C. methanolica
Nước thải chứa dầu mở - Candida utilis
Nước phân chuồng - Sacchromyces sp…
21
2.Sinh khối SCP từ nấm sợi:
Nhược điểm chính của nấm men là không có các enzime cellulase và amilase, nên khi sử
dụng các nguồn nguyên liệu là tinh bột và cellulose ta phải phối hợp với nấm sợi. Nấm
sợi thường sinh trưởng chậm hơn nấm men. Thời gian nhân đôi của chúng phải trên 10
giờ.Hàm lượng protein trong nấm sợi khá thấp (khoảg 30%). Nhưg nấm sợi lại có ưu
điểm là dể tách sinhkhối và tính tạo hương vị dặc biệt.
Để dùng trong thực phẩm, người ta thường sử dụng nhiều loài Morchella (M. crassique,
M.esculata, M.hortesis) Loài này có vị ngon phù hợp để chế biến thực phẩm (thường
dùng để chế súp). Tuy nhiên khó khăn lớn nhất là nuôi cấy Morchella rất tốn kém và dể
bị nhiễm.
Hiện nay nhiều nơi sử dụng hổ hợp giống Trichoderma viridea và nấm men
Saccharosemyces cerevisiae để sảnxuất protein. Ngoài ra người ta còn sử dụng hổn hợp
Trichoderma viridea với Candida utilis, giữa Endomycopsis fibuliger và Cadida utilis.
3.Sinh khối SCP từ vi khuẩn
Vi khuẩn dùng để sảnxuấtsinhkhối proteitn được nuôi trên carbur hydro. Người ta
thương sử dụng các giống Pseudomonas. Flavobacterium, Mycobacterium, Nocardia.
Các giống vi khuẩn này có khả năng đồng hóa các alkan (C6 - C18), carbur hydro béo
và thơm khác.
Đối với nguyên liệu sử dụng là metan, người ta dùng các giống Methylomonas
methanica, Methylococens capsulatus. Ngoài ra nhiều nơi còn sử dụng các loài vi khuẩn
khí nổ trong trường hợp tự dưỡng CO2. Thuộc về vi khuẩn khí nổ có các đại diện của
giống Hydrogenomonas fagilia, H. entropha. như : metan, etan, propan v.v… tạo sinh
khối giàu protein là :Pseudommas, Methaomonas, Corynebacterium, Brevibacrerium,
Mycobacterium v.v… Người ta đã nuôi Mycobacterium trên 1kg metan, thu được 1kg
sinh khối có hàm lượng prorein rất cao 60-70%, gluxit 20-40%, lipit 2-4%, còn 2-6% là
chất khoáng và vitamin, đặc biệt có vitamin B12.
Với nguyên liệu hydrocacbua - (dầu từ mỏ) người ta có thể sảnxuất một lượng rất lớn
sinh khối từ nấm men và vi khuẩn giàu protein. Điều cần thiết là phải tinh sạch và chế
biến sao cho có thể dùng làm thức ăn một cách rộng rãi và hợp khẩu vị cho con người.
4.Sinh khối SCP từ tảo.
Trong các phương pháp sinh tổng hợp protein chúng ta không quên khả năng của các
loài tảo. Tảo là thực vật bậc thấp, sử dụng năng lượng mặt trời và muối vô cơ để phát
triển, tăng sinhkhối khá nhanh và giàu protein. Ngày nay người ta đã nghiên cứu và sử
dụng nhiều loại tảo để tạo ngưồn protein, đáng chú ý là tảo Chlorella, Scenedesmus,
Spirulina … Tảo Chlorella, Scenedesmus tạo đơn bào sinhsản nhanh, cho hàm lượng
protein cao từ 50-55% (sản lượng gấp 10 lúa mì). Nhiều nước đã có nhà máy sảnxuất
tảo này trên quy mô công nghiệp (Mỹ, Liên Xô, Tiệp, Đức, Bungari, Nhật …) dùng
protein tảo để trộn vào bánh mì, kẹo bánh, và pha trộn trong nấu thức ăn cho người.
Từ năm 1963, người ta đã tìm thấy một loài tảo đa bào ở Châu Phi có tên là Spirulina,
kích thước gấp 100 lần Chlorella, giàu protein. Nhân dân các vùng Châu Phi và Mỹ la
tinh từ lâu đã sử dụng làm thức ăn cho người như làm nước chấm, nấu cháo, chế biến
thức ăn v.v….Hàm lượng protein tảo này rất cao từ 60-73%, gluxit 5-7%, khoáng 4,7-
6% chứa cả vitamin B kể cả B12, tiền vitamin A (coro-ten) xanlofil … Năm 1968, một
hội nghị quốc tế về tảo Spirulina họp ở Thụy Điển đã kết luận lợi ích của tảo này và bắt
đầu nghiên cưú sảnxuất tảo này làm thức ăn cho trẻ em sơ sinh, cho vận động viên, và
22
cho người nói chung, áp dụng nhiều, trên qui mô sảnxuất lớn công nghiệp (có cơ sở sản
xuất hàng vạn tấn/năm)
Nuôi tảo trong fermentor thuỷ tinh
Nấm bậc cao
Một số loài nấm có quả thể cũng cung cấp nguồn protein đáng kể (30-50%) như: nấm
mở, nấm rơm, nấm mèo (mộc nhĩ v.v…). Có thể nuôi chúng trên rơm, rạ, cây mục, mạt
cưa, phế thải, lò sát sinh, vỏ chuối, rỉ đường … Các nuớc sảnxuất nhiều nấm ăn như
Úc, Đài Loan, Indonexia … ở Úc sảnxuất 3000 tấn/năm.
Tuy nhiên việc nuôi nấm ăn, cũng còn khó khăn hơn các loài khác, khó công nghiệp
hóa, do vậy vẫn có là loại thức ăn quý, hiếm đặc sản.
Kết luận : qua những vấn đề đã nêu trên chúng ta thấy rằng trong thế giới sinhvật
phong phú, chúng ta có thể sử dụng nhiều nhóm VSV khác nhau để tổng hợp protein
cho người và động vật. Đây là một biện pháp nhanh, hiệu quả kinh tế cao, góp phần
đáng kể vào việc giải quyết nạn "thiếu đói" protein của loài người hiện nay. Rõ ràng
rằng trong tương lai không xa, chúng ta có thể có thịt, có giò lụa, jămbon, xúc xích,
bitết, patê … từ nấm men cũng như từ các visinh vật, hay từ các loài tảo, và nấm khác
nhau không phải đơn thuần từ thịt của các động vật nuôi như hiện nay.
23
. Chương 3
Vi sinh vật trong sản xuất sinh khối ( Biomasse)
1. Định nghiã:
Thuật ngữ sinh khối (biomasse) chỉ toàn bộ khối lượng tế bào vi sinh vật được. loại vi sinh vật khác nhau, cả đơn bào lẫn đa bào.
3.2 Tiêu chuẩn vi sinh vật được dùng để sản xuất protein đơn bào:
" VSV sử dụng được nguồn nguyên liệu