Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho (vitis vinifera l ) với sự hỗ trợ của sóng siêu âm bằng cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Học phần: THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM & XỬ LÝ SỐ LIỆU Bài Báo Khoa Học: Tối ưu hóa chiết xuất chất chống oxy hóa phenolic từ vỏ nho (Vitis vinifera L.) với hỗ trợ sóng siêu âm cách sử dụng phương pháp bề mặt đáp ứng GVHD: Nguyễn Văn Anh SVTH: Nhóm Đinh Nguyễn Huỳnh Như Đỗ Nguyễn Trúc An Ngô Thị Hồng Đào Trần Lê Thanh Ngân Nguyễn Minh Tuấn 2005180166 2005180439 2028170212 2005190365 2022190306 09DHTP4 09DHTP4 08DHDD2 10DHTP4 10DHDB2 Nội dung Cách thức tiến hành thí nghiệm  Chiết suất sóng siêu âm  Đo TPC TPC-280  Khả quét gốc tự DPPH  Thử nghiệm ORAC  Phân tích HPLC-DAD  Thiết kế thử nghiệm RSM Cách thức xử lý số liệu  Thí nghiệm đơn yếu tố  Tối ưu hóa RSM  Hệ số hồi quy phân tích bề mặt đáp ứng  Xác nhận thử nghiệm mơ hình Cách thức tiến hành thí nghiệm Hóa chất             Axit clohydric Ethanol RPE Axit gallic Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-axit tetramethylchroman-2-cacboxylic) DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl) Đệm phốt phát Fluorescein AAPH (2,20-azobit (2-methylpropionamidine) dihydrochloride) Thuốc thử folin – ciocalteu Nước cấp HPLC Axit formic Axetonitril cho HPLC Cách thức tiến hành thí nghiệm Chuẩn bị mẫu Sấy nhiệt bóng tối Nghiền thành bột Sàng rây 1,5mm Cách thức tiến hành thí nghiệm Chiết suất sóng siêu âm Được thực thiết bị siêu âm điều khiển kỹ thuật số (3300EP SONICA, Ý) với tần số cố định 40 kHz công suất siêu âm 200W Cách thức tiến hành thí nghiệm Chiết suất sóng siêu âm Các biến: Nồng độ etanol, nhiệt độ thời gian Cách tiến hành: - 0,2 g bột vỏ chiết với ml dung môi với hàm lượng ethanol cần thiết (chứa 1% axit clohydric) - Ba mẫu chuẩn bị cho lần chạy - Hỗn dịch chiết ly tâm tốc độ 15.000 vòng/phút phút - Phần phía lọc qua lọc xenlulozơ 0,45µm phân tích Cách thức tiến hành thí nghiệm Đo TPC TPC-280 Tổng hàm lượng phenol xác định hai phương pháp khác nhau: Xét nghiệm Folin – Ciocalteu (FC) Đọc trực tiếp độ hấp thu bước sóng 280nm 1ml nước, 0,02ml mẫu chiết, 0,2ml thuốc thử Folin 0,8ml dung dịch natri cacbonat 10% trộn định mức đến 3ml Độ hấp thu đo bước sóng 765nm sau 90 phút Mẫu pha loãng dung dịch ethanol 60% chứa axit clohydric 1% đo độ hấp thụ bước sóng 280 nm Tổng số phenol biểu thị đương lượng axit gallic gam vỏ nho tính theo trọng lượng khơ (mgGAE/gDW) cách sử dụng đường chuẩn với axit gallic chuẩn Cách thức tiến hành thí nghiệm Đo TPC TPC-280 Cách thức tiến hành thí nghiệm Đo lường khả quét gốc tự DPPH Cách thức tiến hành thí nghiệm Thử nghiệm ORAC Cách thức tiến hành thí nghiệm Phân tích HPLC-DAD Cách thức tiến hành thí nghiệm Thiết kế thử nghiệm RSM Cách thức xử lý số liệu Thí nghiệm đơn yếu tố Cách thức xử lý số liệu Tối ưu hóa RSM Cách thức xử lý số liệu Hệ số hồi quy phân tích bề mặt đáp ứng Cách thức xử lý số liệu Xác nhận thử nghiệm mơ hình ... Axit clohydric Ethanol RPE Axit gallic Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-axit tetramethylchroman-2-cacboxylic) DPPH (2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl) Đệm phốt phát Fluorescein AAPH (2,20-azobit (2-methylpropionamidine)... với ml dung môi với hàm l? ?ợng ethanol cần thiết (chứa 1% axit clohydric) - Ba mẫu chuẩn bị cho l? ??n chạy - Hỗn dịch chiết ly tâm tốc độ 15.000 vòng/phút phút - Phần phía l? ??c qua l? ??c xenlulozơ... Tổng hàm l? ?ợng phenol xác định hai phương pháp khác nhau: Xét nghiệm Folin – Ciocalteu (FC) Đọc trực tiếp độ hấp thu bước sóng 280nm 1ml nước, 0,02ml mẫu chiết, 0,2ml thuốc thử Folin 0,8ml dung