Trong nghiên cứu này, iod dưới dạng iodate và iodide trong các loại gia vị mặn được chiết với nước deion bằng bể rung siêu âm có điều nhiệt, sau đó xác định bằng phương pháp phổ khối plasma cảm ứng cao tần ghép nối sắc ký lỏng (LC-ICP-MS). Các điều kiện về thiết bị và quy trình chiết mẫu đã được khảo sát tối ưu.
Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị mặn phương pháp phổ khối plasma cảm ứng cao tần ghép nối sắc ký lỏng (LC-ICP-MS) Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu Trần Hoàng Giang, Đặng Thị Hiên, Đinh Viết Chiến Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia, Hà Nội, Việt Nam Tóm tắt Trong nghiên cứu này, iod dạng iodate iodide loại gia vị mặn chiết với nước deion bể rung siêu âm có điều nhiệt, sau xác định phương pháp phổ khối plasma cảm ứng cao tần ghép nối sắc ký lỏng (LC-ICP-MS) Các điều kiện thiết bị quy trình chiết mẫu khảo sát tối ưu Phương pháp xác nhận giá trị sử dụng với thông số đường chuẩn làm việc có hệ số xác định R2 ≥ 0,995, giới hạn phát (LOD) iodate iodide tương ứng 0,06 mg/kg 0,079 mg/kg; độ lệch chuẩn tương đối lặp lại (RSDr) khoảng 2,57 - 5,22%, độ thu hồi (R%) khoảng 83,5 - 108%, đáp ứng tốt yêu cầu theo quy định AOAC Nghiên cứu tiến hành phân tích 43 mẫu gia vị mặn khác bao gồm muối ăn, bột canh iod, hạt nêm, dầu hào, nước tương, nước mắm Kết cho thấy tỉ lệ cao (76,9%) mẫu muối ăn bột canh iod có hàm lượng tổng số iodate iodide thấp so với mức quy định Trong đó, mẫu gia vị mặn khác có chứa hàm lượng đáng kể iod chủ yếu dạng iodide Kết nghiên cứu góp phần đánh giá sơ thực trạng dạng tồn iod sản phẩm gia vị mặn thu thập địa bàn thành phố Hà Nội Từ khóa: myo-inositol, sắc ký trao đổi ion, HPEAC, PAD ĐẶT VẤN ĐỀ Iod nguyên tố vi lượng cần cho sống nhiều sinh vật, đặc biệt cần thiết cho sức khỏe người Tình trạng thiếu iod xảy gây nên vấn đề nghiêm trọng bệnh bướu cổ hay thiểu trí tuệ Đây tình trạng xảy nhiều nơi giới, đặc biệt nước phát triển, có Việt Nam Vì vậy, theo Nghị định 09/2016/NĐ-CP quy định việc tăng cường vi chất dinh dưỡng vào thực phẩm, muối dùng ăn trực tiếp, muối dùng chế biến thực phẩm đối tượng bắt buộc phải tăng cường iod [1] Iod thường bổ sung vào muối ăn dạng KIO3 KI với hàm lượng tương tứng iod 77 59% theo khối lượng Dạng KIO3 đặc tính bền điều kiện bảo quản phân phối nên thường sử dụng nước có khí hậu nóng ẩm, quốc gia phát triển Trong dạng KI sử dụng hầu Châu Âu số nước khu vực Bắc Mỹ Nhìn chung, nghiên cứu cơng bố cho thấy iod có vai trò thiết yếu quan trọng với người việc gây phản ứng bất lợi Theo quan An toàn thực phẩm Châu Âu (EFSA), nhu cầu iod với người mức 70 - 200 µg/ngày Các đối tượng có nhu cầu cao với iod trẻ sơ sinh Điện thoại: 0987980874 Email: chemvietchien@gmail.com Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 221 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị phụ nữ giai đoạn thai kỳ cho bú [2] Mặc dù vậy, tổng lượng iod bổ sung tối đa hàng ngày cho người trưởng thành khuyến cáo khoảng 500 - 1.000 µg/ngày Để giải tình trạng thiếu iod, loại muối ăn bột canh gia vị thường quy định bổ sung iod mức 20 - 40 mg/kg Tuy nhiên, ảnh hưởng mẫu hay trình chế biến, bảo quản, iod thường bị chuyển hóa dạng tồn tượng thăng hoa thành I2 Thực trạng muối ăn thiếu iod xảy nước ta năm 2019, Chi cục Quản lý chất lượng Nông - Lâm Thủy sản tỉnh Điện Biên lấy mẫu giám sát chất lượng muối ăn bột canh gia vị Kết cho thấy 8/11 mẫu không đạt chất lượng (hàm lượng 1,33 - 17,7 mg/kg mức thấp quy định 20 - 50 mg/kg) 3/11 mẫu hồn tồn khơng phát iod Chi cục Quản lý chất lượng Nông - Lâm Thủy sản tỉnh Hải Dương sau tiến hành kiểm tra đột xuất sở sản xuất bột canh iod phát công nhân sử dụng muối tinh sấy thường thay cho muối tinh sấy iod, dẫn đến sản phẩm bột canh không chứa iod [3] Như vậy, bên cạnh yếu tố cố tình vi phạm doanh nghiệp, vấn đề hao hụt iod q trình bảo quản nguyên nhân dẫn đến tượng muối ăn khơng có iod, có khơng đảm bảo chất lượng theo quy định Thực trạng muối ăn thiếu iod xảy nước ta năm 2019, Chi cục Quản lý chất lượng Nông - Lâm Thủy sản tỉnh Điện Biên lấy mẫu giám sát chất lượng muối ăn bột canh gia vị Kết cho thấy 8/11 mẫu không đạt chất lượng (hàm lượng 1,33 - 17,7 mg/kg mức thấp quy định 20 - 50 mg/kg) 3/11 mẫu hồn tồn khơng phát iod Chi cục Quản lý chất lượng Nông - Lâm Thủy sản tỉnh Hải Dương sau tiến hành kiểm tra đột xuất sở sản xuất bột canh iod phát công nhân sử dụng muối tinh sấy thường thay cho muối tinh sấy iod, dẫn đến sản phẩm bột canh không chứa iod [3] Như vậy, bên cạnh yếu tố cố tình vi phạm doanh nghiệp, vấn đề hao hụt iod trình bảo quản ngun nhân dẫn đến tượng muối ăn khơng có iod, có khơng đảm bảo chất lượng theo quy định Iod sản phẩm bị chuyển hóa dạng chủ yếu iodate iodide Trong đó, dạng iodide bền vững xem thể độc tính đánh giá LD50 chuột qua đường uống iodate khoảng 500 - 1.100 mg/kg [4-5] iodide 3.320 mg/kg thể trọng [6] Do đó, để hiểu chất hao hụt hàm lượng iod, với việc xác định hàm lượng iod tổng số, phân tích dạng tồn iod sản phẩm thực cần thiết Các phương pháp xác định dạng iodide iodate quan tâm phát triển sớm Một số phương pháp trước thường sử dụng chiết chọn lọc sau phân tích thiết bị sắc ký ion với detector xung ampe [7], sắc ký ion với detector độ dẫn UV-Vis [8-9], sắc ký loại trừ kích thước (SEC) hay sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) kết hợp với phổ khối plasma cao tần cảm ứng (ICP-MS) [10-11] Trong phương pháp này, kết hợp sắc ký lỏng (LC) phổ khối cảm ứng plasma (ICP-MS) mang lại nhiều đặc tính ưu việt có độ nhạy, độ xác cao khả xử lí nhiều mẫu phức tạp với độ đặc hiệu cao Vì vậy, nghiên cứu này, phương pháp LC-ICP-MS lựa chọn để nghiên cứu khảo sát điều kiện phân tích đồng thời hàm lượng iodide iodate nhằm tìm hiểu đánh giá sơ dạng tồn iod số loại gia vị mặn thu thập thị trường VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu Các hóa chất, thuốc thử sử dụng nghiên cứu thuộc loại tinh khiết phân tích dùng cho sắc ký khối phổ 222 Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến Chuẩn sử dụng chuẩn đơn iodide (I-) 1.000 ppm (Merck), chuẩn iodate 1.000 ppm chuẩn bị từ muối KIO3 (≥ 99,7%, Merck) Tất hóa chất khác dùng nghiên cứu EDTA (≥ 99%), KH2PO4 (≥ 99%), K2SO4 (≥ 99%), acid boric (≥ 99,5%), sodium-1-octane sulfonate (OSA, ≥ 99%), dung dịch ammoniac (25%) mua từ hãng Merck (Việt Nam) Nước sử dụng nước cất deion (18,2 MΩ.cm) Khí argon có độ tinh khiết 99,999% (Messer) Ngồi dung dịch chuẩn hóa thiết bị hãng Perkin Elmer sử dụng Nghiên cứu thực 43 mẫu gia vị mặn loại (muối ăn, bột canh iod, hạt nêm, dầu hào, nước tương, nước mắm) thu thập cửa hàng siêu thị địa bàn thành phố Hà Nội Các mẫu bảo quản nguyên bao bì nhà sản xuất, điều kiện nhiệt độ thường, tránh ánh sáng trực tiếp trước tiến hành phân tích 2.2 Thiết bị, dụng cụ Bể rung siêu âm (Elmer) sử dụng để chiết iod từ mẫu Dịch chiết mẫu lọc qua màng lọc 0,45µm (Minisart) trước chuyển vào lọ đựng mẫu nhựa (Agilent) để phân tích Các dạng iod phân tách hệ sắc ký lỏng (Flexar Quanternary LC pumps) sử dụng cột anion NI-424 (5 µm × 4,6 mm × 100 mm, Shodex) trước phát định lượng hệ thống ICP-MS Nexion 350X (Perkin Elmer) Các thiết bị dụng cụ thông thường khác phịng thí nghiệm sử dụng nghiên cứu 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp xử lí mẫu Mẫu lỏng pha lỗng trực tiếp với nước deion sử dụng micropipet bình định mức Các mẫu dạng rắn sệt cân khoảng - 2g cân phân tích xác đến ± 0,0001g vào ống ly tâm 50 mL Thêm vào mẫu khoảng 40 mL nước deion, rung siêu âm khoảng 20 phút nhiệt độ ≤ 30 oC chuyển mẫu vào bình định mức 50 mL, định mức đến vạch với nước deion lắc Mẫu sau lọc qua màng lọc 0,45 µm pha lỗng thích hợp trước phân tích hệ thống LC-ICP-MS 2.3.2 Điều kiện thiết bị Các điều kiện hệ thiết bị LC-ICP-MS nghiên cứu tối ưu riêng phần Điều kiện ICP-MS tối ưu theo hướng dẫn nhà sản xuất nhằm đạt độ nhạy, độ xác khối cao với iod Điều kiện LC tối ưu nhằm đạt độ nhạy độ phân giải cao với dạng iodate iodide bao gồm: pha động sử dụng thành phần OSA 0,9 mM acid boric 10 mM nước điều chỉnh pH đến 8,0 sử dụng dung dịch NH4OH 10% Tốc độ pha động 0,85 mL/phút điều kiện phân tích đẳng dịng Thể tích tiêm mẫu 20 µL 2.3.3 Thẩm định phương pháp Phương pháp xác nhận giá trị sử dụng với thông số khoảng tuyến tính, giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ), độ chụm độ Giá trị LOD ước tính cách thực thêm chuẩn chất phân tích vào mẫu trắng, muối ăn khơng chứa iod, mà cho tỉ lệ tín hiệu chất nhiễu (signal to noise) S/N = 3, giá trị LOQ ước tính tỉ lệ S/N = 10 Độ lặp lại thực ba mẫu thực có chứa iod nước tương, hạt nêm bột canh gia vị, mẫu phân tích lặp lại 06 lần Xác định độ thu hồi cách thêm chuẩn chất phân tích vào Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 223 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị mẫu thử mức nồng độ khác khoảng 5,0 - 12,5 mg/kg KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tối ưu điều kiện phân tích ICP-MS Trong trường hợp iod, đồng vị tồn ổn định tự nhiên 127I (100%) Các đồng vị khác iod đồng vị phóng xạ tổng hợp Đồng vị bị ảnh hưởng trùng khối nên lựa chọn chế độ đo chuẩn (khơng sử dụng khí va chạm) để đạt độ nhạy tốt Các thơng số khác có ảnh hưởng đến độ xác, độ nhạy, độ ổn định phép phân tích cơng suất plasma, lưu lượng khí nebulizer, độ sâu plasma, tối ưu tự động hệ thống (sử dụng phần mềm dung dịch chuẩn hóa thiết bị hãng Perkin Elmer cung cấp) Kết thể Bảng Bảng Các thông số tối ưu tự động thiết bị ICP-MS Thông số Công suất RF Giá trị chọn Thông số Giá trị chọn 1200 W Số lần quét khối 20 lần 0,82 ml/phút Số lần đo lặp lần 19,0 L/phút Độ sâu plasma Chỉnh tối ưu 500 ms Kiểu đo Lưu lượng khí nebulizer Lưu lượng khí tạo plasma Thời gian chờ (dwell time) Tiêu chuẩn (khơng sử dụng khí) 3.2 Tối ưu điều kiện phân tích sắc ký lỏng 3.2.1 Ảnh hưởng thành phần pha động Pha động đóng vai trị quan trọng việc rửa giải phân tách dạng khác iod Tham khảo số tài liệu phân tích dạng iod [12] phù hợp với cột sắc ký ion hãng Shodex sử dụng nghiên cứu này, pha động lựa chọn khảo sát là: pha động gồm natri - Octanesulfonate (OSA) 0,9 mM, acid boric 20 mM pha động gồm KH2PO4 mM, K2SO4 15 mM, EDTA mM, điều chỉnh pH = Tiến hành phân tích dung dịch chuẩn hỗn hợp iodate iodide có nồng độ 20 ppb sử dụng hai pha động trên, kết thu sắc đồ Hình 224 Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến Hình Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp Iodate Iodid 20 ppb (a) pha động 0,9 mM OSA 20 mM boric acid (b) pha động mM KH2PO4, 15 mM K2SO4, mM EDTA Sắc ký đồ Hình cho thấy, thời gian rửa giải gần tương đương, điều kiện phân tích pha động 1, tín hiệu chiều cao pic ghi nhận 02 chất phân tích tốt Do pha động bao gồm OSA 0,9 mM acid boric 20 mM nước lựa chọn để tiến hành khảo sát 3.2.2 Ảnh hưởng tốc độ dòng pha động Tốc độ dòng pha động khảo sát mức: 0,65, 0,75, 0,85, 1,0 mL/phút điều kiện pha động lựa chọn Kết cho thấy, tốc độ dòng tăng, thời gian lưu chất phân tích có giảm khơng đáng kể, khơng phải yếu tố định đến độ phân giải chất phân tích trường hợp Do đó, tốc độ dòng pha động 0,85 mL/phút phù hợp với lưu lượng dịng khí nebulizer thơng số chọn sau khảo sát 3.2.3 Ảnh hưởng nồng độ acid boric pha động Thực khảo sát ảnh hưởng acid boric pha động tiến hành phân tích dung dịch chuẩn hỗn hợp iodate iodide có nồng độ 20 ppb điều kiện tốc độ dòng giữ cố định 0,85 mL/phút Thực nghiệm ghi nhận được, tăng nồng độ acid boric pha động từ 10 đến 30 mM, tín hiệu chất phân tích có xu hướng giảm dần Mặc dù vậy, ba trường hợp khảo sát khơng có khác biệt đáng kể thời gian lưu tín hiệu pic dạng iodide thu bị tù, chân pic doãng so với dạng iodate (như Hình 1a) Do nồng độ acid boric khơng phải yếu tố có ảnh hưởng lớn đến khả rửa giải iod nhằm cải thiện độ nhạy dạng iodide Nồng độ acid boric 10 mM lựa chọn cho khảo sát để rửa giải iodide sớm nhằm tăng cường độ nhạy tiết kiệm thời gian phân tích 3.2.4 Ảnh hưởng pH pha động Nghiên cứu ảnh hưởng pH thực dựa pha động với thành phần lựa chọn trước Thay đổi giá trị pH khoảng - 8, điều chỉnh dung dịch ammonia 10% Kết khảo sát thể Hình Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 225 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị Hình Sắc ký đồ phân tích dung dịch chuẩn hỗn hợp 10 ppb giá trị pH khác Dựa kết khảo sát, thời gian lưu chất phân tích có giảm nhanh lực liên kết dạng iod với pha tĩnh giảm điều kiện pH tăng dần Trong tất trường hợp, sắc ký đồ dạng iodate iodide có độ phân giải tốt Tuy nhiên, điều kiện pH = 8,0, chân pic iodide gọn thời gian lưu ngắn nhất, tín hiệu pic cải thiện đáng kể Nghiên cứu không tiến hành khảo sát giá trị pH > 8,0 khuyến cáo khoảng pH làm việc cột tách (pH = - 8) Do giá trị pH = 8,0 thông số tối ưu lựa chọn chọn cho pha động nhằm đáp ứng yêu cầu độ nhạy tiết kiệm thời gian phép phân tích 3.2.4 Khảo sát pH dung dịch mẫu Sau q trình thủy phân, mẫu cần trung hịa trước tiến hành phân tích hệ thống HPAEC-PAD Khảo sát pH trung hòa mức: 5,0, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0 9,0 Kết thể Hình 3.3 Khảo sát thời gian nhiệt độ chiết mẫu Các chất phân tích chất phân cực, dễ tan nước Vì nghiên cứu lựa chọn nước dung môi chiết, tiến hành khảo sát điều kiện khác có ảnh hưởng tới hiệu suất trình chiết thời gian nhiệt độ chiết mẫu Khảo sát thời gian chiết, điều kiện nhiệt độ giữ cố định 30°C, tiến hành mẫu thực dạng rắn mẫu bột canh có chứa iodate hạt nêm có chứa iodide nhằm phản ánh xác liên kết dạng iod với thành phần mẫu thay bổ sung chuẩn vào mẫu thử trắng Kết thể Hình 226 Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến Hình Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết mẫu Mẫu bột canh iod có thành phần tương đối đơn giản, chiếm chủ yếu muối NaCl ( > 74%) mì (natri glutamat, ≈ 15%) bổ sung KIO3 Hàm lượng iodate thu ban đầu có xu hướng tăng đạt cực đại 20 phút, sau giảm dần tiếp tục kéo dài thời gian chiết mẫu Trong đó, mẫu hạt nêm bổ sung KI có thành phần phức tạp (muối ăn, tinh bột sắn, bột thịt xương, chất điều vị, phẩm màu, dầu tinh luyện), hàm lượng iodide chiết có xu hướng tăng tăng thời gian chiết mẫu tương đối ổn định sau khoảng thời gian 25 đến 30 phút Mặc dù vậy, khác biệt hàm lượng iodide sau thời gian chiết mẫu 20 phút 25 phút khơng đáng kể Vì vậy, nghiên cứu này, để thực phân tích đồng thời hai dạng iod, thời gian chiết mẫu lựa chọn 20 phút giữ cố định cho khảo sát Nhiệt độ đóng vai trị quan trọng q trình xử lí mẫu phương pháp chiết siêu âm, đặc biệt với iod nguyên tố hoạt động, có khoảng oxi hóa rộng dễ bị thăng hoa Các dạng muối iodate iodide tan tốt điều kiện chiết siêu âm Nghiên cứu tiến hành khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ mẫu hạt nêm có thành phần phức tạp, chứa dạng iodide dạng bền vững với nhiệt dễ có xu hướng chuyển hóa thành I2 thất thoát tượng thăng hoa Nhiệt độ tối ưu lựa chọn cho phân tích dạng iodide thích hợp để phân tích dạng iodate Thực thay đổi nhiệt độ chiết mẫu khoảng 30 - 70°C với bước chuyển 10°C cho thí nghiệm Kết thể Hình Hình Sắc ký đồ phân tích dung dịch chuẩn hỗn hợp 10 ppb giá trị pH khác Biểu đồ rằng, tăng nhiệt độ chiết mẫu, hàm lượng iod có xu hướng giảm dần Hàm lượng iodide giảm đến gần 50% nhiệt độ tăng từ 30 - 70oC, không thấy xuất pic iodate tất khảo sát Điều giải thích iodide mẫu bị tượng thăng Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 227 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị hoa thành I2 tác dụng nhiệt Vì vậy, rung siêu âm nhiệt độ phịng khơng vượt q 30°C lựa chọn để thực nghiên cứu 3.4 Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp phụ thuộc nhiều vào mẫu hệ số pha lỗng Các mẫu có hàm lượng muối thấp hạt nêm, dầu hào hạn chế pha loãng để đạt độ nhạy tốt Ngược lại, mẫu muối ăn hay nước mắm bổ sung iod nên pha lỗng thích hợp để giảm ảnh hưởng tới thiết bị phân tích Các thơng số giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp tổng hợp Bảng Bảng Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp Khối lượng cân (g) Thể tích chiết mẫu (ml) Hệ số pha loãng 1,0 50 1,0 LOD (mg/kg) LOQ (mg/kg) Iodate Iodide Iodate 0,06 0,07 0,20 50 10 0,60 2,01 1,0 50 25 1,51 0,79 5,01 1,0 50 50 3,01 1,98 10,0 Iodide Nhìn chung, giới hạn định lượng phương pháp đáp ứng tốt yêu cầu phân tích kiểm sốt hàm lượng iod theo quy định sản phẩm muối ăn bột canh gia vị (20 - 40 mg/kg) Sắc ký đồ chất phân tích ngưỡng giới hạn phát thể Hình Hình Sắc ký đồ phân tích iodate iodide ngưỡng LOD Kết đánh giá thông số thẩm định khác đường chuẩn làm việc, độ lặp lại (RSDr), độ thu hồi (R) chất phân tích tổng hợp Bảng 228 Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến Bảng Kết đánh giá phương pháp phân tích Tên chất Phương trình đường chuẩn Khoảng làm việc (ppb) Hệ số R2 RSDr (%) Độ thu hồi (%) Iodate Y = 13610x + 11097 2,5 - 100 0,9972 2,57 - 4,10 82,4 - 108 Iodide Y = 10950 + 8188,7 2,5 - 100 0.9977 5,14 - 5,22 83,5 - 107 Các thông số thẩm định đáp ứng yêu cầu theo quy định AOAC, cho thấy phương pháp xây dựng hoàn toàn phù hợp để xác định hàm lượng dạng iodate iodide gia vị mặn Kết phân tích tổng dạng iod LC-ICP-MS so sánh với phương pháp phân tích tổng hàm lượng iod ICP-MS theo phương pháp TCVN 9517:2012 Mỗi phép phân tích lặp lại lần mẫu thử sau kiểm tra phương sai giá trị trung bình tập hợp Trong hai trường hợp so sánh phương sai giá trị trung bình cho giá trị Pvalue > 0,05, chứng tỏ kết phân tích iod tổng số hai phương pháp khơng khác có ý nghĩa Điều góp phần khẳng định độ xác phương pháp phân tích dạng iod LC-ICP-MS xây dựng 3.5 Phân tích mẫu thực tế Phương pháp sau xây dựng thẩm định thông số đạt yêu cầu, áp dụng để phân tích 43 mẫu thực tế thu thập cửa hàng, siêu thị địa bàn thành phố Hà Nội Các mẫu nghiên cứu bao gồm 06 loại gia vị mặn khác như: muối ăn, bột canh, hạt nêm, dầu hào, nước tương, nước mắm có bổ sung iod Số lượng kết phân tích loại mẫu tổng hợp Bảng Bảng Kết phân tích dạng iod Loại mẫu/số mẫu phát Hàm lượng (mg/kg) Iodate Iodide Muối ăn (n = 7) 13,6 - 22,0 - Bột canh (n = 6) 3,60 - 57,3 1,29 - 7,66 Hạt nêm (n = 7) 0,85 - 9,13 2,97 - 9,03 Dầu hào (n = 3) - 2,76 - 3,97 Nước tương (n = 14) - 2,02 - 13,2 (-) Không phát nhỏ giới hạn định lượng Kết cho thấy, loại gia vị mặn muối ăn, bột canh có bổ sung iod, dạng tồn chủ yếu iod iodate với hàm lượng cao tìm thấy mẫu bột canh mức 57,3 mg/kg Điều phù hợp với dạng bổ sung iod quy định theo Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia QCVN 9-1:2011/BYT muối ăn bổ sung iod [12] Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 7396:2004 yêu cầu kỹ thuật bột canh gia vị [13] Mặc dù vậy, phát hàm lượng đáng kể iod dạng iodide nhóm sản phẩm khoảng 1,29 - 7,66 mg/kg Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 229 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị Các sản phẩm hạt nêm phát iod có hai dạng iodate iodide Trong đó, với mẫu dầu hào nước tương, iod tồn hoàn toàn dạng iodide với hàm lượng khoảng 2,0 - 13,2 mg/kg Các mẫu nước mắm nghiên cứu không phát hàm lượng iod hai dạng Kết trung bình hàm lượng dạng iod nhóm mẫu nghiên cứu trình bày Hình Hình Hàm lượng trung bình dạng iod mẫu gia vị mặn Các mẫu nghiên cứu hầu hết công bố nhãn sản phẩm có sử dụng iod bổ sung dạng KIO3 Tuy nhiên thực tế phân tích Hình rằng, ngoại trừ muối ăn không phát iodide, mẫu bột canh, hạt nêm có xuất đáng kể hàm lượng iod dạng Đặt biệt mẫu dầu hào nước tương, iod tồn hoàn toàn dạng iodide Như vậy, từ dạng bổ sung sản xuất ban đầu iodate, thực tế kiểm tra cho thấy nhiều sản phẩm iod có mặt dạng iodide Đây vấn đề đáng lo ngại mặt sức khỏe muối KI sử dụng thực phẩm nhiều nước giới Mặc dù vậy, điều gây khó khăn cho việc đánh giá xác hàm lượng iod gia vị mặn, đặc biệt với muối ăn bột canh gia vị sử dụng phương pháp xác định tương ứng tiêu chuẩn TCVN 6341:1998 TCVN 6487:1999 áp dụng với iod tồn dạng iodate Giả thiết sản phẩm kiểm sốt chất lượng đầu vào, điều cho thấy có chuyển hóa đáng kể dạng iodate dạng iodide trình sản xuất, bảo quản Các sản phẩm có sử dụng thành phần phụ gia đa dạng bột canh, hạt nêm nước tương, dầu hào cho thấy xuất hàm lượng đáng kể iodide Trong đó, muối ăn có bổ sung iod với thành phần đơn giản hơn, dạng tồn sản phẩm chủ yếu dạng iodate Như vậy, có tương tác hóa học thành phần mẫu với dạng bổ sung ban đầu làm hao hụt chuyển hóa trạng thái oxy hóa cao iod dạng IO3 (+5) trạng thái có số oxy hóa thấp I2 (0) I (-1) Các nghiên cứu cho thấy iodate có khả chuyển hóa đáng kể thành dạng iodide iodine điều kiện bảo quản mà mẫu có mặt chất khử vitamin C, glutathion, protein chứa nhóm thiol, chất khử khác q trình chế biến có sử dụng nhiệt [14-15] Sự chuyển hóa làm hao hụt đáng kể lượng iod bị hấp thụ vào thành bao bì sản phẩm thăng hoa Kết thực tế cho thấy, nhóm sản phẩm muối ăn (M), bột canh (BC) bổ sung iod có 7/13 mẫu nghiên cứu (53,8%) phát có hàm lượng iod tổng thấp mức quy định 20 mg/kg 230 Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến 3/13 mẫu (23,1%) khơng phát iod hai dạng (Hình 7) Các tỉ lệ tương đồng với kết giám sát chi cục Quản lý chất lượng Nông - Lâm Thủy sản tỉnh Điện Biên phản ánh vào năm 2019 Hình Kết đánh giá hàm lượng Iod tổng số Từ kết nghiên cứu thấy rằng, hàm lượng iod gia vị mặn biến thiên khoảng tương đối rộng phụ thuộc mẫu Một tỉ lệ tương đối lớn mẫu muối ăn bột canh gia vị không đạt hàm lượng iod tổng số theo quy định Mặc dù vậy, hàm lượng đáng kể iod chủ yếu dạng iodide loại gia vị mặn khác nước tương, dầu hào, hạt nêm ghi nhận Những gia vị ngày sử dụng phổ biến chế biến ăn hàng ngày góp phần làm giảm nguy thiếu hụt iod cộng đồng KẾT LUẬN Phương pháp xác định hàm lượng dạng iod gia vị mặn LC-ICP-MS khảo sát điều kiện phân tích tối ưu thiết bị yếu tố ảnh hưởng đến q trình xử lí mẫu Các thơng số thẩm định phù hợp với yêu cầu tiêu chuẩn AOAC Áp dụng quy trình phân tích hàm lượng dạng iodate iodide 06 loại gia vị mặn khác thu thập cửa hàng, siêu thị địa bàn thành phố Hà Nội Một tỉ lệ cao mẫu muối ăn bột canh có hàm lượng tổng số iodate iodide tìm thấy thấp so với mức quy định Trong đó, gia vị mặn khác, đặc biệt hạt nêm, nước tương, dầu hào có hàm lượng đáng kể iodide tìm thấy khoảng 2,0 - 13,2 mg/kg Kết nghiên cứu góp phần đánh giá sơ hàm lượng dạng iod loại gia vị mặn thị trường Từ triển khai thêm hướng nghiên cứu sâu nhằm đưa giải pháp sản xuất bảo quản giúp bền vững iod sản phẩm, nhằm ngăn ngừa nguy thiếu hụt iod cộng đồng LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu hỗ trợ kinh phí thực Viện Kiểm nghiệm an tồn vệ sinh thực phẩm quốc gia 231 Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nghị định 09/2016/NĐ-CP ngày 28 tháng năm 2016, Quy định tăng cường vi chất dinh dưỡng vào thực phẩm [2] Scientific Opinion on Dietary Reference Values for iodine, EFSA Journal, vol.12, no 5:3660, pp 3660, 2014 [3] D Ngân, “Thông tin vụ bột canh không chứa I-ốt” 16/05/2019, [Trực tuyến] https://haiquanonline.com.vn/thong-tin-moi-ve-vu-bot-canh-khong-chua-i-ot-104831.html, [Truy cập 15/06/2021] [4] S H Webster, B Rice, B Highman, and W F Von Oettingen, “The toxicology of potassium and sodium iodates: acute toixicity in mice,” Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol.120, no 2, pp.171-178, 1957 [5] R E Gosselin, H C Hodge, R P Smith, and M N Gleason, “Chemical Toxicity of Chemical Products,” The Wilkins & Wilkins Co., Baltimore, 1976 [6] WHO, Iodine in Drinking-water, [online] https://www.who.int/water_sanitation_health/water-quality/guidelines/chemicals/draft-iodinegdwq-190924.pdf [Truy cập 15/06/2021] [7] R A Niemann and D L Anderson, “Determination of Iodide and Thiocyanate in Powdered Milk and Infant Formula by On-Line Enrichment Ion Chromatography with Photodiode Array Detection,” Journal of Chromatography, A 2008, 1200, 193-197, 2008 [8] L Basumalick and J Rohrer, “Determination of iodide and iodate in soy- and milk- based infant formulas,” Thermo Fisher Scientific Application Note 37, 2013 [9] D Hurum and J Rohrer, “Determination of iodide in seawater and other saline matrices using a reagent - free ion chromatography system with suppressed conductivity and UV detection,” Thermo Fisher Scientific Application Note 239, 2016 [10] L F Sanchez and J Szpunar, “Speciation Analysis for Iodine in Milk by Size-Exclusion Chromatography with Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometric Detection (SEC-ICP MS),” Journal of Analytical Atomic Spectrometry, vol 14, pp 1697-1702, 1999 [11] J Nelson, L Pacquette, S Dong, and M Yamanaka, “Simultaneous analysis of iodine and bromine species in infant formula using HPLC-ICP-MS,” Journal of AOAC International, vol 102, no 4, pp 1199-1204, 2019 [12] Quy chuẩn Kỹ thuật Quốc gia, QCVN 9-1:2011/BYT muối ăn bổ sung iod [13] Tiêu chuẩn Việt Nam, TCVN 7396:2004 yêu cầu kỹ thuật bột canh gia vị [14] H & Schaffner Bürgi, J Thomas & Seiler, “The Toxicology of Iodate: A Review of the Literature ,” Thyroid: Official Journal of the American Thyroid Association Vol 11, no 5, 11, pp 449-456, 2001 [15] L Liu, X Li, H Wang, X Cao, W Ma, “Reduction of iodate in iodated salt to iodide during with iodine as measured by an improved HPLC/ICP-MS method,” Journal of Nutritional Biochemistry, vol 42, pp 95-100, 2007 Tạp chí Kiểm nghiệm An tồn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 232 Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu, Đinh Viết Chiến Simultaneous determination of iodide and iodate in salty spicesby liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry (LC-ICP-MS) Lê Văn Hà, Lữ Thị Minh Hiền, Nguyễn Minh Châu Trần Hoàng Giang, Đặng Thị Hiên, Đinh Viết Chiến Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia, Hà Nội, Việt Nam Abstract In this study, iodide and iodate species in food were simultaneously determined by LC-ICP-MS after sample treatment with Deion water based on ultrasonic extraction The conditions of the instrument and the extraction procedure were investigated The method was validated with calibration curves that have the coefficient of determination (R2) higher than 0.995 The method limits of detection (LOD) of iodide and iodate were 0.079 and 0.060 mg/kg respectively meeting the regulatory requirements for food safety management The recoveries were in the range of 83.5 - 108% and the relative standard deviations (RSDr) were between 2.57 and 5.22% These parameters met the requirements specified by AOAC A total of 43 salty spice samples including table salts, iodized seasoning soup powders, seasoning seeds, oyster sauces, soy sauces, fish sauces were collected and analyzed for research purposes The results showed that a high percentage (76.9%) of table salt and seasoning soup powder samples had total iodate and iodide content lower than the specified level Meanwhile, other salty spice samples, especially seasoning seeds and soy sauces, had a significant content of iodide in the range of 2.0 to 13.2 mg/kg This study has contributed to the preliminary assessment of the current status of iodine content in salty spice products collected in Hanoi city Keywords: iod, iodide, iodate, salty spices, LC-ICP-MS Tạp chí Kiểm nghiệm An toàn thực phẩm - Tập 4, Số 3, 2021 233 ... [8-9], sắc ký loại trừ kích thước (SEC) hay sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) kết hợp với phổ khối plasma cao tần cảm ứng (ICP-MS) [10-11] Trong phương pháp này, kết hợp sắc ký lỏng (LC) phổ khối cảm ứng. .. Tập 4, Số 3, 2021 225 Xác định đồng thời hàm lượng iodide iodate gia vị Hình Sắc ký đồ phân tích dung dịch chuẩn hỗn hợp 10 ppb giá trị pH khác Dựa kết khảo sát, thời gian lưu chất phân tích... 83,5 - 107 Các thông số thẩm định đáp ứng yêu cầu theo quy định AOAC, cho thấy phương pháp xây dựng hoàn toàn phù hợp để xác định hàm lượng dạng iodate iodide gia vị mặn Kết phân tích tổng dạng