Nghiên cứu một số thành phần hóa thực vật và khả năng ức chế Enzyme thủy phân tinh bột từ cám các loại gạo màu

Trong nghiên cứu này một số thành phần hóa thực vật như hợp chất flavonoid, polyphenol, anthocyanin của dịch chiết ethanol từ cám ba loại gạo lứt đỏ, lứt tím và nếp than đã được xác định. Kết quả định lượng các hợp chất này cho thấy dịch chiết ethanol từ cám gạo nếp than có anthocyanin và polyphenol là cao nhất. Các dịch chiết ethanol của cám gạo được đánh giá khả năng ức chế enzyme α-amylase, đây là enzyme quan trọng trong thủy phân tinh bột có trong đường tiêu hóa của động vật. Mời các bạn cùng tham khảo!

NGHIÊN CỨU MỘT SỐ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT VÀ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME THỦY PH N TINH BỘT TỪ CÁM CÁC LOẠI GẠO MÀU Nguyễn Ngọc Hồng, Phan Thị Tuyết Ngân Trường Đại học Cơng nghệ TP.HCM TĨM TẮT Gạo màu có chứa sắc tố chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học tập trung lớp cám Trong nghiên cứu số thành phần hóa thực vật hợp chất flavonoid, polyphenol, anthocyanin dịch chiết ethanol từ cám ba loại gạo lứt đỏ, lứt tím nếp than xác định Kết định lượng hợp chất cho thấy dịch chiết ethanol từ cám gạo nếp than có anthocyanin polyphenol cao Các dịch chiết ethanol cám gạo đánh giá khả ức chế enzyme α-amylase, enzyme quan trọng thủy phân tinh bột có đường tiêu hóa động vật Kết nghiên cứu cho thấy ba loại dịch chiết ethanol ba loại gạo có hoạt tính ức chế hai enzyme Những kết thu nghiên cứu chứng minh cám gạo lứt đỏ lứt tím có tiềm chống tăng đường huyết nên ứng dụng cho thú bị bệnh tiểu đường, đặc biệt cho chó mèo Từ khóa: Cám gạo màu, cám gạo nếp than, chống tăng đường huyết, polyphenol, ức chế α-amylase ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh tiểu đường (Diabetes mellitus) bệnh rối loạn chuyển hóa đặc trưng nồng độ glucose máu tăng thường xuyên mãn tính tụy sản xuất thiếu giảm tác dụng insulin Giống người, tiểu đường bệnh phổ biến loài động vật, đặc biệt thường thấy mèo cho Nguyên nhân gây bệnh tuýp thường gặp thú nuôi bị thừa cân, béo phì cách chăm sóc chế độ ăn uống vật nuôi chưa hợp lý Để phòng bệnh hỗ trợ điều trị bệnh tiểu đường vật ni cần có chế độ ăn uống hợp lý, an toàn để tránh nguy thừa cân, béo phì dẫn đến bệnh tiểu đường [[1], [8]] Thành phần chất có hoạt tính cám gạo bao gồm thành phần phân cực γ-oryzanol, tocotrienol, tocopherol thành phần phân cực polyphenol định đặc tính sinh học gạo [[7], [4]] Những nghiên cứu gần cho thấy sắc tố từ gạo màu có khả chống oxy hóa, ức chế enzyme thủy phân tinh bột [[11]] ngăn chặn kháng insulin cảm ứng fructose chuột [[2]] Mặc dù có nhiều nghiên cứu khác hoạt tính sinh học cám gạo lứt, gạo màu việc so sánh thành phần hoạt chất tác dụng ức chế enzyme thủy phân tinh bột đường tiêu hóa vật nuôi giúp chống tăng đường huyết dịch chiết từ cám loại gạo nếp than, gạo đỏ gạo tím chưa thấy tài liệu cơng bố trước Mục đích nghiên cứu so sánh lượng polyphenol, flavonoid, anthocyanin so sánh hoạt tính ức chế enzyme α-amylase dịch chiết ethanol từ cám ba loại gạo gạo nếp than (black sticky rice) gạo tím (black rice purple rice) gạo đỏ (red rice) 1092 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu hóa chất nghiên cứu Gạo lứt nếp than, gạo lứt tím gạo lứt đỏ (được trồng khu vực phía nam Việt Nam) thu mua siêu thị quận Bình Thạnh, TPHCM Cả ba loại gạo lứt giã rây để thu cám cho loại Cám gạo (sấy nhiệt độ 50oC đến khối lượng không đổi) chiết với dung môi ethanol 70% theo tỉ lệ nguyên liệu: dung môi 1:15 (w/v) nhiệt độ phòng (29 ± 1oC) Dịch chiết ethanol ba loại gạo sau 24h lọc loại dung môi máy cô quay chân không để thu cao chiết cồn loại α-amylase (Himedia), Folin-Ciocalteu (Darmstadt), gallic acid, rutin (Seelze), dinitrosalicylic acid (Sigma)… số hóa chất khác đạt tiêu chuẩn phân tích 2.2 Xác định hàm lƣợng cao chiết Dịch chiết ethanol từ cám loại gạo loại dung môi xác định khối lượng cao thô thu Hàm lượng cao khô xác định công thức: % cao thô = W1 W2 x 100 Với W1: khối lượng cao chiết sau loại dung môi; W2: Khối lượng cám gạo trước chiết 2.3 Phƣơng pháp định lƣợng phenol tổng Hàm lượng phenol tổng số cao chiết ethanol xác định phương pháp so màu quang phổ sử dụng thuốc thử Folin-Ciocalteu theo Singleton & Rossi [[9]] Hàm lượng phenolic tổng số tính tốn dựa vào đường chuẩn acid gallic Kết biểu diễn số mg acid galic (GAE)/g cao chiết khô 2.4 Phƣơng pháp định lƣợng flavonoid tổng Hàm lượng flavonoid xác định theo phương pháp Woisky and Salatino (1998) phương pháp đo quang phổ [[10]] Hàm lượng flavonoid tính tốn dựa vào đường chuẩn rutin Kết biểu diễn số mg rutin (RE)/g cao chiết khô 2.5 Phƣơng pháp định lƣợng anthocyanin tổng Định lượng anthocyanin tổng xác dịnh phương pháp pH vi sai theo phương pháp đề nghị Hosseinian cộng (2008) Hàm lượng anthocyanin tổng tính số mg malvidin-3-Oglucoside/g cao chiết khơ [[3]] 2.6 Phƣơng pháp ức chế enzyme α-amylase Hoạt tính ức chế enzyme α-amylase thực theo phương pháp Kazeem cộng (2013) [[5]] Các dịch chiết gạo (250µl) ủ với enzyme α-amylase (từ malt) đệm phosphat pH 6,9 (0,5 mg/ml) ủ 37oC 10 phút sau thêm 1% tinh bột (250µl) ủ tiếp thời gian 5‟ Phản ứng tạo màu cho dung dịch cách thêm dinitrosalicylic acid (500µl) để nước sôi phút Dung dịch để nguội nhiệt độ phòng thêm vào ml nước cất sau đem đo quang phổ bước sóng 540nm Mẫu trắng chuẩn bị tương tự thay dịch chiết cám gạo nước cất Hoạt tính ức chế (%) = 1093 Atrắng - Amẫu Atrắng x 100% 2.7 Xử lý số liệu Tất số liệu xử lý phần mềm Microsoft® Excel® 2013 phần mềm SAS (r) 9.4 TS Level 1M1 với trắc nghiệm Tukey KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Hàm lƣợng cao chiết dịch chiết cám gạo Hàm lượng cao chiết ba loại dịch chiết cám gạo đỏ, cám gạo nếp than cám gạo tím dung mơi cồn 70% trình bày bảng cho thấy dịch chiết ethanol từ cám gạo đỏ có hàm lượng thấp (9,93%) gạo tím có hàm lượng 13,83 % hàm lượng cao chiết khô từ cám gạo nếp than thu nhiều so với cao khơ từ hai loại cám cịn lại Có thể thành phần chất màu tím đen cám gạo nếp than nhiều nên hàm lượng cao chiết từ cám loại gạo cao Bảng 1: Hàm lượng cao chiết cám ba loại gạo màu Dịch chiết ethanol từ cám Hàm lƣợng cao chiết ( ) Gạo tím 13,83 ± 0,30 b Gạo đỏ 9,93± 0,25 c Gạo nếp than 16,82 ± 0,20 a Kết thể bảng trung bình ± SD (n=3) Các chữ khác cột thể khác biệt có giá trị thống kê (p