Tổng hợp và đánh giá hiệu quả mang thuốc và tiêu diệt tế bào ung thư của một số hệ nanogel trên cơ sở polysaccharide sulfate (heparin, fucoidan) ghép các copolymer tương hợp sinh học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN NGỌC THỂ TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ MANG THUỐC VÀ TIÊU DIỆT TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ HỆ NANOGEL TRÊN CƠ SỞ POLYSACCHARIDE SULFATE (HEPARIN, FUCOIDAN) GHÉP CÁC COPOLYMER TƯƠNG HỢP SINH HỌC LUẬN ÁN TIẾN SỸ HĨA HỌC TP HỒ CHÍ MINH – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN NGỌC THỂ TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ MANG THUỐC VÀ TIÊU DIỆT TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ HỆ NANOGEL TRÊN CƠ SỞ POLYSACCHARIDE SULFATE (HEPARIN, FUCOIDAN) GHÉP CÁC COPOLYMER TƯƠNG HỢP SINH HỌC Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 44 01 14 LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRẦN NGỌC QUYỂN TS NGUYỄN THỊ THANH THỦY TP HỒ CHÍ MINH – 2021 LỜI CAM ĐOAN Cơng trình thực phịng Hóa dược - Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng - Viện Hàn Lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Thành phố Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu hướng dẫn khoa học PGS.TS Trần Ngọc Quyển TS Nguyễn Thị Thanh Thủy Các nội dung nghiên cứu, kết luận án trung thực, hoàn thành dựa kết nghiên cứu kết chưa dùng cho luận án cấp Nghiên cứu sinh Nguyễn Ngọc Thể LỜI CÁM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn PGS.TS Trần Ngọc Quyển TS Nguyễn Thị Thanh Thủy định hướng khoa học, giúp đỡ tận tình suốt trình thực luận án Xin gởi đến Thầy Cô lời biết ơn chân thành Tôi xin cảm ơn hỗ trợ anh chị em Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng – Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Tôi xin cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam suốt thời gian thực luận án Sau cùng, tơi xin gởi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên, giúp đỡ cho tơi hồn thành luận án i MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CÁM ƠN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ix MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 GIỚI THIỆU VỀ MICELLE VÀ NANOGEL 1.1.1 Giới thiệu micelle 1.1.1.1 Cơ chế hình thành micelle .3 1.1.1.2 Ưu điểm nhược điểm micelle .4 1.1.1.3 Sự đóng gói thuốc vào micelle .5 1.1.2 Giới thiệu nanogel 1.1.2.1 Sự hình thành nanogel .6 1.1.2.2 Ưu điểm nhược điểm nanogel 10 1.1.2.3 Sự đóng gói thuốc vào nanogel 12 1.1.2.4 Phương cách phân phối thuốc chất mang nano nangel 14 1.1.2.5 Sự giải phóng thuốc nanogel 16 1.2 POLYSACCHARIDE SULFATE 19 1.2.1 Heparin 19 1.2.2 Fucoidan .20 1.3 PLURONIC 22 1.3.1 Cấu tạo 22 1.3.2 Tính chất 23 1.3.3 Ứng dụng .23 1.4 UNG THƯ VÀ THUỐC CHỐNG UNG THƯCISPLATIN .24 1.4.1 Tổng quan bệnh ung thư 24 1.4.2 Cisplatin .25 ii 1.5 CURCUMIN .26 1.6 NHỮNG NGHIÊN CỨU TRƯỚC ĐÂY 27 1.6.1 Nghiên cứu kết hợp thuốc chống ung thư cisplatin chất mang nano .29 1.6.2 Nghiên cứu kết hợp curcumin với thuốc chống ung thư cisplatin 32 CHƯƠNG NGHIÊN CỨU 33 2.1 HÓA CHẤT 33 2.2 DỤNG CỤ VÀ THIẾT BỊ 34 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .35 2.3.1 Phương pháp tổng hợp copolymer ghép sở polysacchride sulfate (heparin, fucoidan) liên hợp pluronic 35 2.3.2 Phương pháp đánh giá cấu trúc, hình thái copolymer ghép 35 2.3.3 Phương pháp tổng hợp hệ nanogel mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate36 2.3.4 Phương pháp khảo sát khả nhả thuốc hệ nanogel mang thuốc36 2.3.5 Phương pháp đánh giá độc tính tế bào (dịng tế bào MCF-7 tế bào thường)37 2.3.6 Thí nghiệm động vật 38 2.3.6.1 Phương pháp ghép tế bào MCF-7 tạo mơ hình chuột mang khối u .38 2.3.6.2 Phương pháp tính thể tích khối u 39 2.3.6.3 Phương pháp nhuộm hóa mơ miễn dịch kháng thể SOD2 39 2.3.6.4 Phương pháp nhuộm Hemaoxylin - Eosin (H&E) 40 2.4 THỰC NGHIỆM 40 2.4.1 Tổng hợp khảo sát nanogel Hep-P123 40 2.4.1.1 Tổng hợp Hep-P123 .40 2.4.1.2 Tổng hợp nanogel Hep-P123 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate .43 2.4.1.3 Khảo sát khả nhả thuốc cisplatin hydrate Hep-P123 46 2.4.1.4 Đánh giá độc tính tế bào (dòng tế bào MCF-7 tế bào thường 46 2.4.2 Tổng hợp khảo sát nanogel Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 .46 2.4.2.1 Tổng hợp Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 46 2.4.2.2 Tổng hợp nanogel Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate .47 2.4.3 Tổng hợp khảo sát nanogel Fud-P123 .47 iii 2.4.3.1 Tổng hợp Fud-P123 .47 2.4.3.2 Tổng hợp nanogel Fud-P123 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate .49 2.4.3.3 Khảo sát khả nhả thuốc cisplatin hydrate Fud-P123 50 2.4.3.4 Đánh giá độc tính tế bào (dòng tế bào MCF-7 tế bào thường) 50 2.4.4 Ứng dụng tổng hợp đánh giá nanogel Hep-F127 mang thuốc cisplatin hydrate kết hợp nanocurcumin (Hep-F127-CisOH-Cur) lên chuột mang khối u 50 2.4.4.1 Tổng hợp Hep-F127-CisOH-Cur 50 2.4.4.2 Đánh giá cấu trúc, hình thái Hep-F127-CisOH-Cur 52 2.4.4.3 Đánh giá độc tính dịng tế bào MCF-7 52 2.4.4.4 Khảo sát khả nhả thuốc Hep-F127-CisOH-Cur .52 2.4.4.5 Quy trình tạo mơ hình chuột suy giảm miễn dịch ghép khối u dị loài .52 2.4.4.6 Quy trình thử nghiệm thuốc 53 2.4.4.7 Quy trình đánh giá hiệu thuốc 55 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 56 3.1 KẾT QUẢ TỔNG HỢP VÀ KHẢO SÁT NANOGEL HEP-P123 56 3.1.1 Kết xác định thành phần, cấu trúc copolymer Hep-P123 .56 3.1.1.1 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR sản phẩm trung gian NPCP123-NPC NPC-P123-Ami .56 3.1.1.2 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR sản phẩm trung gian HepDAB 60 3.1.1.3 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR sản phẩm Hep-P123 62 3.1.1.4 Kết phân tích TGA Hep-P123 65 3.1.1.5 Kết phân tích giá trị CMC Hep-P123 .66 3.1.1.6 Kết phân tích TEM DLS Hep-P123 68 3.1.2 Kết tổng hợp nanogel Hep-P123 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate .70 3.1.2.1 Kết phân tích phổ FT-IR Hep-P123-Cis Hep-P123-CisOH 70 3.1.2.2 Kết phân tích ICP-OES Hep-P123-Cis Hep-P123-CisOH 73 3.1.3 Kết đánh giá khả nhả thuốc Hep-P123 74 iv 3.1.4 Kết độc tính tế bào (trên dịng tế bào MCF-7 ngun bào sợi) 77 3.2 KẾT QUẢ TỔNG HỢP VÀ KHẢO SÁT NANOGEL HEP-F127, HEP-F87 VÀ HEP-F68 78 3.2.1 Kết xác định thành phần, cấu trúc copolymer Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 78 3.2.1.1 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR sản phẩm trung gian NPCF127-NPC, NPC-F127-Ami, NPC-F87-NPC, NPC-F87-Ami, NPC-F68-NPC, NPC-F68-Ami .78 3.2.1.2 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 80 3.2.1.3 Kết phân tích TGA Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 81 3.2.1.4 Kết phân tích giá trị CMC Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 82 3.2.1.5 Kết phân tích TEM Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 .84 3.2.2 Kết tổng hợp nanogel Hep-F127, Hep-F87 Hep-F68 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate 86 3.2.2.1 Kết phân tích phổ FT-IR Hep-F127-Cis, Hep-F127-CisOH, HepF87-Cis, Hep-F87-CisOH Hep-F68-Cis, Hep-F68-CisOH .86 3.2.2.2 Kết phân tích ICP-OES Hep-F127-Cis, Hep-F127-CisOH, HepF87-Cis, Hep-F87-CisOH Hep-F68-Cis, Hep-F68-CisOH .87 3.3 SO SÁNH KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÁC NANOGEL HEP-P123, HEP-F127, HEP-F87 VÀ HEP-F68 MANG CISPLATIN VÀ CISPLATIN HYDRATE 89 3.4 KẾT QUẢ TỔNG HỢP VÀ KHẢO SÁT NANOGEL FUD-P123 91 3.4.1 Kết xác định thành phần, cấu trúc copolymer Fud-P123 .92 3.4.1.1 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR sản phẩm trung gian FudDAB 92 3.4.1.2 Kết phân tích phổ FT-IR 1H-NMR Fud-P123 .94 3.4.1.3 Kết phân tích TGA Fud-P123 97 3.4.1.4 Kết phân tích giá trị CMC Fud-P123 .98 3.4.1.5 Kết phân tích TEM DLS Fud-P123 .99 3.4.2 Kết tổng hợp nanogel Fud-P123 mang thuốc cisplatin cisplatin hydrate 100 v 3.4.2.1 Kết phân tích phổ FT-IR Fud-P123-Cis Fud-P123-CisOH .100 3.4.2.2 Kết phân tích ICP-OES Fud-P123-Cis Fud-P123-CisOH 102 3.4.3 Kết quả đánh giá khả nhả thuốc Fud-P123 102 3.4.4 Kết độc tính tế bào (trên dịng tế bào MCF-7 nguyên bào sợi) .103 3.5 SO SÁNH KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CỦA NANOGEL HEP-P123 VÀ FUD- P123 MANG CISPLATIN VÀ CISPLATIN HYDRATE 104 3.6 KẾT QUẢ TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ NANOGEL HEP-F127 HEP-F127 MANG THUỐC CISPLATIN HYDRATE KẾT HỢP NANOCURCUMIN (HEPF127-CISOH-CUR) LÊN CHUỘT MANG KHỐI U .106 3.6.1 Kết phân tích phổ FT-IR Hep-F127-CisOH-Cur 107 3.6.2 Kết phân tích TEM Hep-F127-CisOH-Cur 108 3.6.3 Kết phân tích ICP-OES UV-Vis Hep-F127-CisOH-Cur 109 3.6.4 Kết khảo sát khả nhả thuốc Hep-F127-CisOH-Cur 109 3.6.5 Kết độc tế bào dòng tế bào MCF-7 Hep-F127 Hep-F127- CisOH-Cur phương pháp nhuộm SRB 110 3.6.6 Kết thử nghiệm nanogel Hep-F127-CisOH-Cur lên mơ hình chuột mang khối u 112 3.6.6.1 Kết tạo mơ hình chuột mang khối u 112 3.6.6.2 Kết đánh giá kích thước khối u chuột thời gian điều trị 113 3.6.6.3 Kết nhuộm mô khối u đánh giá hiệu điều trị 116 KẾT LUẬN .119 KIẾN NGHỊ 121 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ .122 TÀI LIỆU THAM KHẢO .123 PHỤ LỤC 140 vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa Từ viết tắt Hep Heparin Plu Pluronic Fud Fucoidan Cur Curcumin Plu Pluronic Cis Cisplatin CisOH Cisplatin dạng hydrate NPC p-nitrophenyl chloroformate EDC 1-ethyl-3-3-dimethylaminopropyl carbodiimide NHS N-hydroxysuccinimide DAB 1,4-diaminobutane Ami 3-amino-1-propanol Da Dalton DLS Dynamic Light Scattering: máy đo phân tán động học laser TEM H-NMR TGA ICP-OES Transmission Electron Microscopy: Kính hiển vi điện tử truyền qua Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Thermogravimetric Analyzer: Phân tích nhiệt trọng lượng Inductively coupled plasma - optical emission spectrometry: quang phổ plasma phát xạ nguyên tử FT-IR Fourier Transform Infrared spectroscopy IU international unit LMWH EPR PEO-PPO-PEO Low Molecular Weight Heparin: Heparin khối lượng phân tử thấp Enhanced Permeability and Retention Effect poly(ethylene oxide) oxide)-poly(propylene oxide)-poly(ethylene 152 153 154 155 Phụ lục 21: Ảnh TEM Fud-P123 Phụ lục 22: Ảnh TEM Hep-F127-CisOH-Cur 156 Phụ lục 23: Kết xác định hoạt tính Hep-P123-Cis Hep-P123-CisOH Phần trăm gây độc tế bào MCF-7 mẫu nồng độ khác (%) Nồng độ Mẫu Hep-P123-Cis Hep-P123-CisOH Phần trăm gây độc tế bào (%) (µg/mL) Lần Lần Lần TB ± ĐLC 100 93,28 94,64 94,56 94,16 ± 0,76 50 79,11 81,07 79,66 79,95 ± 1,01 25 61,36 63,27 58,93 61,18 ± 2,18 10 41,27 49,18 49,24 46,56 ± 4,58 35,06 36,21 28,26 33,18 ± 4,30 2.5 20,16 17,11 20,42 19,23 ± 1,84 25 79,97 72,89 72,35 75,07 ± 4,25 10 55,44 50,39 52,76 52,86 ± 2,53 38,08 36,69 38,36 37,71 ± 0,89 2,5 26,20 25,23 24,86 25,43 ± 0,70 1,0 1,57 9,80 13,42 8,26 ± 6,07 Giá trị IC50 mẫu MCF-7 Mẫu IC50 (µg/mL) MCF-7 Lần Lần Lần TB ± ĐLC Hep-P123-Cis 12,29 10,85 12,18 11,77 ± 0,80 Hep-P123-CisOH 7,737 9,088 8,619 8,48 ± 0,69 Phần trăm gây độc tế bào nguyên bào sợi (%) Mẫu Hep-P123 Phần trăm gây độc tế bào nguyên bào sợi (%) Lần Lần Lần TB ± ĐLC 8,02 12,20 9,92 10,04 ± 2,09 157 Phụ lục 24: Số liệu nhả thuốc Hep-P123-CisOH pH = 7,4 Thời gian (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Trung bình Độ lệch chuẩn 0,25 32,35 29,09 27,10 29,51 2,65 0,5 41,00 37,80 36,05 38,28 2,51 55,80 51,05 50,00 52,28 3,09 63,80 55,23 54,00 57,68 5,34 66,90 62,61 61,10 63,54 3,01 12 69,01 62,73 61,00 64,25 4,21 24 70,48 64,10 63,03 65,87 4,03 Thời gian (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Trung bình Độ lệch chuẩn 0,25 37,50 34,01 34,00 35,17 2,02 0,5 46,88 42,58 43,02 44,16 2,37 58,93 52,41 54,33 55,22 3,35 72,41 63,77 66,12 67,43 4,47 75,86 69,74 67,89 71,16 4,17 12 79,85 72,55 71,09 74,50 4,69 24 79,63 73,01 72,14 74,93 4,10 pH = 5,5 158 Phụ lục 25: Kết xác định hoạt tính Fud-P123-Cis Fud-P123-CisOH Phần trăm gây độc tế bào MCF-7 mẫu nồng độ khác (%) Nồng độ Mẫu Fud-P123-Cis Fud-P123-CisOH Phần trăm gây độc tế bào (%) (µg/mL) Lần Lần Lần TB ± ĐLC 100 83,93 85,31 86,92 85,38 ± 1,50 50 63,51 57,59 61,48 60,86 ± 3,01 25 39,40 41,77 36,22 39,13 ± 2,78 10 22,50 20,41 27,72 23,55 ± 3,76 22,16 18,70 16,67 19,18 ± 2,78 100 85,71 87,90 87,61 87,08 ± 1,19 50 74,68 75,72 69,44 73,28 ± 3,36 25 52,42 50,79 51,68 51,63 ± 0,82 10 31,56 33,61 27,21 30,79 ± 3,27 23,57 21,77 19,93 21,75 ± 1,82 Giá trị IC50 mẫu MCF-7 Mẫu IC50 (µg/mL) MCF-7 Lần Lần Lần TB ± ĐLC Fud-P123-Cis 29,37 31,39 30,07 30,28 ± 1,03 Fud-P123-CisOH 19,66 19,49 22,39 20,51 ± 1,63 Phần trăm gây độc tế bào nguyên bào sợi (%) Mẫu Fud-P123 Phần trăm gây độc tế bào nguyên bào sợi (%) Lần Lần Lần TB ± ĐLC 17,02 17,48 17,25 17,25 ± 0,02 159 Phụ lục 26: Số liệu nhả thuốc Fud-P123-CisOH (%Cis) pH = 7,4 Thời gian (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Trung bình Độ lệch chuẩn 0,25 9,53 10,20 8,91 9,55 0,65 0,5 16,03 18,00 14,10 16,04 1,95 22,14 24,30 22,70 23,05 1,12 30,01 32,66 29,00 30,56 1,89 33,72 33,04 31,17 32,64 1,32 12 36,26 35,28 33,07 34,84 1,63 24 36,90 35,80 33,36 35,35 1,81 Thời gian (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Trung bình Độ lệch chuẩn 0,25 17,36 14,01 15,11 15,49 1,71 0,5 23,00 19,03 20,34 20,79 2,02 28,08 25,90 25,53 26,50 1,38 37,11 33,00 36,08 35,40 2,14 41,22 39,05 41,02 40,43 1,20 12 43,80 41,67 41,17 42,21 1,40 24 44,88 42,76 42,18 43,27 1,42 pH = 5,5 160 Phụ lục 27: Kết thử độc tính tế bào MCF-7 Tên mẫu Nồng độ 93,86 92,86 92,15 92,97 0,85 7,5 91,05 94,77 92,88 92,90 1,86 89,78 90,11 90,64 90,17 0,43 2,5 84,67 86,73 84,67 85,36 1,19 0,5 49,93 49,93 49,93 49,93 C (ppm) %I F127CisOH DLC 10 Cisplatin Hep- Phần trăm ức chế Lần Lần Lần TB DLC 100 88,13 87,46 90,11 88,57 1,38 50 78,95 77,61 78,99 78,52 0,79 25 67,34 64,46 62,79 64,86 2,30 10 48,58 47,28 48,74 48,20 0,80 35,49 31,63 31,93 33,02 2,15 10.40 11.75 11.57 11.24 0.73 TB DLC IC50 (mg/mL) C (ppm) Lần Lần Lần 100 97,56 92,25 96,16 95,32 2,75 50 91,04 92,71 92,70 92,15 0,96 25 67,72 69,58 70,80 69,37 1,55 CisOH- 10 46,00 40,71 41,45 42,72 2,87 Cur 32,46 21,97 24,66 26,36 5,45 13,45 6,40 7,52 9,12 3,79 10,35 12,67 12,06 11,69 1,20 TB DLC HepF127- %I IC50 (mg/mL) Lần Lần Lần Hep- 200 -2,05 -8,69 -4,43 -5,06 3,37 F127 100 0,29 -3,71 -4,12 -2,51 2,44 50 4,00 0,87 -0,80 1,36 2,43 (ppm) %I 161 Phụ lục 28: Kết khảo sát khối lượng chuột (g) Nghiệm thức 1: NaCl 0,9% Ngày Con Con Con Con Con TB DLC 30,00 34,00 31,00 29,58 33,75 31,67 2,08 29,30 32,60 31,78 32,98 32,67 31,87 1,50 30,55 34,00 29,20 33,30 33,20 32,05 2,07 30,10 34,05 31,70 34,00 30,00 31,97 1,99 29,25 35,12 33,25 33,67 31,10 32,48 2,31 30,30 34,50 32,00 33,85 30,45 32,22 1,92 31,60 33,20 32,00 32,00 32,00 32,16 0,61 30,14 34,39 30,80 30,34 30,00 31,13 1,85 31,00 34,00 30,85 31,00 30,42 31,45 1,44 10 31,00 35,40 29,80 30,00 29,60 31,16 2,43 11 31,20 34,10 30,00 30,50 30,30 31,22 1,67 12 31,00 33,50 31,38 30,00 30,26 31,23 1,39 13 31,20 34,50 33,00 29,00 30,00 31,54 2,23 14 31,38 34,70 32,26 29,30 29,80 31,49 2,15 Nghiệm thức 2: Hep-F127 Ngày Con Con Con Con Con TB DLC 29,00 33,20 29,70 27,00 32,00 30,18 2,46 31,30 32,90 31,78 29,80 31,00 31,36 1,13 30,83 33,56 31,15 29,12 30,70 31,07 1,60 30,67 34,28 31,28 28,63 30,00 30,97 2,10 31,90 34,70 30,00 29,37 29,10 31,01 2,33 31,16 33,06 28,20 28,1 30,12 30,13 2,09 31,78 33,64 28,86 29,13 28,15 30,31 2,31 30,95 33,12 27,69 29,73 29,87 30,27 1,98 29,24 31,00 28,67 29,70 30,00 29,72 0,87 10 29,00 31,90 28,30 30,38 29,00 29,72 1,44 162 11 28,84 33,00 31,22 29,00 28,00 30,01 2,05 12 30,00 32,67 31,10 28,90 30,00 30,53 1,43 13 31,33 31,73 30,92 29,05 31,74 30,95 1,12 14 33,12 32,75 28,96 28,35 31,65 30,97 2,19 Nghiệm thức 3: Cisplatin Ngày Con Con Con Con Con TB DLC 28,00 33,92 32,20 27,18 32,10 30,68 2,93 26,13 34,42 31,56 26,52 30,00 29,73 3,49 27,28 34,00 31,84 27,13 29,49 29,95 2,97 25,91 32,50 29,87 26,86 27,17 28,46 2,69 25,82 30,80 28,71 25,16 26,23 27,34 2,35 25,75 29,46 28,41 23,89 24,67 26,44 2,40 25,06 29,00 28,11 21,75 23,00 25,38 3,14 24,00 28,06 27,79 21,00 21,66 24,50 3,32 23,89 26,56 27,65 20,93 21,58 24,12 2,96 10 19,46 25,70 25,50 19,50 21,31 22,29 3,11 Nghiệm thức 4: Hep-F127-CisOH Ngày Con Con Con Con Con TB DLC 33,60 30,92 30,00 28,52 28,46 30,30 2,12 31,18 28,21 29,48 25,18 26,30 28,07 2,41 28,54 26,28 26,86 24,07 24,54 26,06 1,81 29,36 28,95 27,47 24,20 25,82 27,16 2,16 28,15 28,04 26,36 24,08 23,30 25,99 2,23 26,33 25,74 24,81 23,00 23,86 24,75 1,35 24,11 23,64 24,35 24,06 24,12 24,06 0,26 22,10 22,46 23,30 23,00 23,05 22,78 0,49 21,30 19,01 21,00 23,60 22,75 21,53 1,76 10 22,01 20,17 19,85 22,62 22,40 21,41 1,30 11 22,00 18,40 20,11 22,30 21,91 20,94 1,66 12 20,54 16,45 19,76 21,00 21,30 19,81 1,97 163 13 17,71 18,25 18,90 17,78 19,04 19,30 0,62 14 17,50 18,07 18,60 17,12 18,67 18,00 0,68 Nghiệm thức 5: Hep-F127-CisOH-Cur Ngày Con Con Con Con Con TB DLC 28,98 34,10 31,79 33,02 28,65 31,31 2,42 28,84 34,21 31,54 33,66 28,74 31,40 2,58 30,48 34,90 32,93 33,26 30,33 32,38 1,95 30,49 35,91 32,45 32,47 31,93 32,65 1,99 29,08 35,46 32,70 33,93 28,06 31,85 3,17 32,86 35,24 29,72 33,40 30,59 32,36 2,22 32,60 34,08 29,70 32,95 29,51 31,77 2,05 30,35 31,89 30,06 32,40 28,07 30,55 1,71 31,85 32,57 28,03 33,22 25,84 30,30 3,21 10 28,92 29,87 28,8 29,23 25,70 28,50 1,62 11 29,97 28,34 26,99 27,46 24,53 27,46 1,99 12 29,38 27,28 25,61 26,64 23,60 26,50 2,13 13 26,16 25,86 25,23 23,73 23,00 24,80 1,37 14 23,50 23,39 22,70 20,29 20,12 22,00 1,67 164 Phụ lục 29: Khảo sát kích thước khối u qua ngày Nghiệm thức 1: NaCl 0,9% Ngày Con d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 axb2/2 TB 6,00 6,45 124,81 6,84 6,36 138,34 6,34 6,06 116,41 6,45 6,00 116,10 6,78 6,56 145,88 128,31 6,12 6,26 119,91 6,39 6,48 134,16 6,16 6,18 117,63 6,67 6,30 132,37 7,04 6,70 158,01 132,42 6,22 6,33 124,61 6,48 6,70 145,44 6,28 6,40 128,61 6,70 6,28 132,12 6,97 6,90 165,92 139,34 10 6,46 6,34 129,83 6,60 6,80 152,59 6,40 6,62 140,24 6,74 6,30 133,76 7,06 7,04 174,95 146,27 14 6,66 6,46 138,97 6,71 6,94 161,59 6,62 6,83 154,41 7,04 6,67 156,60 7,34 7,30 195,57 161,43 Nghiệm thức 2: Hep-F127 Ngày Con d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 axb2/2 TB 6,00 7,44 166,06 7,34 6,54 156,97 6,78 6,58 146,77 6,80 6,48 142,77 6,82 6,56 146,74 151,86 6,12 7,26 161,29 7,39 6,58 159,98 6,90 6,67 153,49 6,97 6,60 151,81 7,04 6,70 158,01 156,91 6,30 7,46 175,30 7,40 6,70 166,09 7,08 6,84 165,62 7,22 6,90 171,87 7,15 6,80 165,31 168,84 10 6,48 7,40 177,42 7,46 6,80 172,48 7,00 6,90 166,64 7,00 7,02 172,48 7,06 6,91 168,55 171,51 14 6,78 7,35 183,14 7,26 6,99 177,36 6,93 7,17 178,13 7,16 7,10 180,47 7,36 6,88 174,19 178,66 165 Nghiệm thức 3: Cisplatin Ngày Con d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 axb2/2 TB 3,72 2,76 14,17 3,76 4,54 38,75 6,88 6,48 144,45 4,72 5,16 62,84 3,72 4,38 35,68 59,18 3,36 3,03 15,42 3,74 4,40 36,20 6,90 6,24 134,33 4,40 5,00 55,00 2,96 3,38 16,91 51,57 2,94 2,72 10,88 2,76 4,12 23,42 6,18 5,60 96,90 4,72 4,54 48,64 2,36 3,71 16,24 39,22 10 2,72 2,76 10,36 2,80 4,02 22,62 6,16 5,68 99,37 4,54 4,63 48,66 2,38 3,72 16,47 39,50 Nghiệm thức 4: Hep-F127-CisOH Ngày Con d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 TB axb2/2 5,86 5,16 78,01 4,04 5,16 53,78 5,00 3,82 36,48 5,90 6,16 111,94 4,52 4,30 41,79 64,40 5,70 5,21 77,36 4,10 5,00 51,25 5,06 3,94 39,27 6,00 5,80 100,92 4,44 4,38 42,59 62,28 5,72 4,90 68,67 3,74 4,90 44,90 4,77 3,66 31,95 5,90 5,62 93,17 4,74 4,06 39,07 55,55 10 5,50 5,01 69,03 3,66 4,74 41,12 4,94 3,74 34,55 4,54 4,63 48,66 4,12 3,72 28,51 44,37 14 5,47 4,94 66,74 3,74 4,54 38,54 5,01 3,53 31,21 5,14 3,94 39,90 4,06 3,54 25,44 40,37 166 Nghiệm thức 5: Hep-F127-CisOH-Cur Ngày Con d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 Con axb2/2 d1 d2 axb2/2 TB 4,06 4,48 40,74 4,48 5,16 59,64 4,88 4,52 49,85 4,90 3,90 37,26 6,16 5,90 107,21 58,94 3,74 4,24 33,62 4,90 5,12 64,23 4,66 4,04 38,03 4,06 3,00 18,27 5,38 4,38 51,61 41,15 3,01 3,70 20,60 3,74 4,04 30,52 4,27 3,58 27,36 3,92 3,00 17,64 5,48 4,02 44,28 28,08 10 2,53 2,93 10,86 3,30 3,85 24,46 4,12 3,74 28,81 4,04 2,52 12,83 4,02 3,72 27,82 20,95 14 2,76 2,54 8,90 3,08 3,66 20,63 3,99 3,54 25,00 4,02 2,24 10,09 3,50 2,76 13,33 15,59 ... hiệu tế bào ung thư Chính lý trên, chúng tơi tiến hành thực đề tài ? ?Tổng hợp đánh giá hiệu mang thuốc tiêu diệt tế bào ung thư số hệ nanogel sở polysaccharide sulfate (heparin, fucoidan) ghép copolymer. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN NGỌC THỂ TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ MANG THUỐC VÀ TIÊU DIỆT TẾ BÀO UNG. .. Tổng hợp khảo sát hiệu mang thuốc cisplatin cisplatin dạng hydrat nanogel tổng hợp Khảo sát khả nhả thuốc hiệu tiêu diệt dòng tế bào ung thư vú MCF-7 hệ nanogel Hep-P123 mang thuốc Tổng hợp đánh