Nghiên cứu chiết tách tanin từ vỏ cây keo lai và thử nghiệm ảnh hưởng đến chất lượng da

1 B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O Đ I H C ĐÀ N NG CHÂU TH DI M NGHIÊN C U CHI T TÁCH TANIN T V CÂY KEO LAI VÀ TH NGHI M NH HƯ NG Đ N CH T LƯ NG DA Chuyên ngành: Hóa h u Mã s : 60 44 27 TÓM T T LU N VĂN TH C SĨ KHOA H C Đà N ng - Năm 2011 Cơng trình đư c hoàn thành t i Đ I H C ĐÀ N NG Ngư i hư ng d n khoa h c: PGS.TS Lê T H i Ph n bi n 1: TS Bùi Xuân V ng Ph n bi n 2: PGS.TS Tr nh Đình Chính Lu n văn đư c b o v t i H i ñ ng b o v ch m lu n văn t t nghi p Th c sĩ Khoa h c h p t i Đ i h c Đà N ng vào ngày29 tháng 10 năm 2011 Có th tìm hi u lu n văn t i: - Trung tâm Thông tin - H c li u - Đ i h c Đà N ng - Thư vi n trư ng Đ i h c Sư Ph m, Đ i h c Đà N ng 3 M Đ U Đ t v n đ Cơng ngh thu c da đư c coi m t nh ng ngành khoa h c ng d ng c xưa nh t, hình thành t bu i sơ khai c a l ch s loài ngư i T th i nguyên th y sau săn b t thú, ngư i ñã bi t l t l y ph n da Sau ti n hành cơng đo n sơ ch đ làm thành nh ng t m da thu c ñ u tiên, ph c v cho nhu c u cu c s ng c a b n thân Theo th i gian, ngư i ñã bi t nâng cao ch t lư ng da thành ph m b ng cách thu c da v i ch t thu c khác Ngày nay, ngành da giày Vi t Nam ñang phát tri n m nh, m t ph n cung c p s n ph m cho nhu c u s d ng ngày cao nư c, m t ph n xu t kh u nư c ngồi Có nhi u phương pháp thu c khác thu c phèn, thu c b ng h p ch t c a crom, nhôm; thu c andehit V i phương pháp thu c da theo hư ng dùng h p ch t vô gây nhi m mơi trư ng nghiêm tr ng Trong trình thu c da, ph n l n ngư i ta ph i cho mu i crom vào ñ thay ñ i c u trúc da ñ ng v t, tránh nhăn nheo thay ñ i th i ti t m m c g p nư c Vì th , kho ng 1% kh i lư ng c a da ph th i có ch a crom m t kh i lư ng l n ch a ch t gelatin Crom g p ñi u ki n thu n l i d chuy n hóa thành crom IV crom VI, nh ng ch t có th gây t vong, ung thư cho ngư i ñ ng v t ti p xúc Thu c da b ng tanin th o m c phương pháp thu c ñư c s d ng t r t lâu nhi u nơi th gi i.Theo m t s tài li u v keo lai có ch a tanin, nh ng h p ch t h u thu c lo i polyphenol Trên th gi i, ngư i ta ñã bi t ñ n v i nhi u cơng d ng khác làm thu c ch a b nh, làm sơn lót, làm ch t c ch ăn mịn kim lo i thân thi n v i môi trư ng Tanin ñư c s d ng m t s ngành cơng nghi p s n xu t đ u ng, làm b n màu công nghi p nhu m, công ngh thu c da,… Ch t thu c tanin ñư c ñánh giá thân thi n v i môi trư ng Tuy nhiên, ngành thu c da nư c ta chưa khai thác ngu n tanin t m t s lo i th c v t nư c ñ s d ng trình thu c da mà ch y u nh p da thu c t nư c khác ho c thu c da theo hư ng s d ng ch t vô h p ch t c a kim lo i n ng nêu Quy trình thu c da theo hư ng gây ô nghi m môi trư ng nghiêm tr ng V i nh ng ti m to l n c a tanin ñã nêu trên, ñ t n d ng ngu n nguyên li u chưa ñư c khai thác này, ñ ng th i mong mu n s có nhi u cơng trình nghiên c u quy mô l n v khai thác tanin t v keo lai, t nâng cao giá tr s d ng c a keo lai, v y tơi ch n ñ tài: “ Nghiên c u chi t tách tanin t v keo th nghi m nh hư ng ñ n ch t lư ng da” Đ i tư ng ph m vi nghiên c u Đ i tư ng: Tanin tách ñư c t v keo lai kh thu c da c a Ph m vi nghiên c u: Nghiên c u quy trình chi t tách tanin; kh o sát y u t nh hư ng ñ n trình chi t tách kh o sát ng d ng làm ch t thu c da c a tanin 5 M c đích n i dung nghiên c u - Xây d ng quy trình chi t tách nghiên c u y u t nh hư ng đ n q trình chi t tách tanin t v keo lai - Nghiên c u ng d ng làm ch t thu c da c a tanin kh o sát y u t nh hư ng ñ n ch t lư ng da thu c v i ch t thu c tanin Phương pháp nghiên c u 4.1 Phương pháp nghiên c u lý thuy t T ng quan phương pháp nghiên c u ñ c ñi m sinh thái h c c a keo lai phân lo i, tính ch t lý hóa h c ng d ng c a tanin, phương pháp chi t tách h p ch t h u cơ, phương pháp phân tích c u trúc h p ch t h u T ng quan lý thuy t v cơng ngh thu c da đ ng v t 4.2 Phương pháp nghiên c u th c nghi m - Phương pháp phân tích đ nh tính: xác ñ nh màu s c, tr ng thái c a d ch chi t s n ph m tanin - Phương pháp phân h y m u phân tích ñ xác ñ nh ñ m, hàm lư ng ch t h u - Phương pháp chi t b ng dung mơi có đ phân c c phù h p ñ thu tanin kh o sát y u t nh hư ng đ n q trình chi t - Phương pháp phân tích đ nh lư ng xác ñ nh hàm lư ng tanin (phương pháp Lowenthal) - Phương pháp ph IR HPLC-MS ñ nh danh h p ch t poli phenol có m u tanin r n 6 - Phương pháp x lí s li u Ý nghĩa khoa h c ý nghĩa th c ti n 5.1 Ý nghĩa khoa h c - Xác ñ nh ñi u ki n t i ưu c a trình tách chi t tanin t v keo lai - Kh o sát ng d ng vào trình thu c da c a s n ph m tanin thu ñư c 5.2 Ý nghĩa th c ti n - Tìm hi u ng d ng quan tr ng c a tanin - Nâng cao giá tr s d ng c a keo lai ñ i s ng C u trúc lu n văn Lu n văn g m ph n PH N M Đ U PH N N I DUNG Chương 1: T ng quan lý thuy t Chương 2: Nguyên li u phương pháp nghiên c u Chương 3: K t qu th o lu n PH N K T LU N VÀ KI N NGH CHƯƠNG 1: T NG QUAN V LÝ THUY T 1.1 T ng quan v tanin 1.1.1 Khái ni m v tanin Tanin nh ng h p ch t h u thu c lo i polyphenol r t ph bi n nh ng th c v t có v chát, ch y u mơ c a th c v t có m ch S dĩ tanin có tính ch t thu c da c u trúc hố h c c a tanin có nhi u nhóm OH phenol t o đư c nhi u liên k t hydro v i m ch polypeptid c a protein da 1.1.2 Phân lo i tanin Tanin đư c chia làm hai nhóm sau: Nhóm 1: Tanin th y phân đư c hay pyrogalic (galotanin) Nhóm 2: Tanin khơng th y phân đư c hay pyrocatechin 1.1.3 Tính ch t c a tanin 1.1.3.1 Tính ch t v t lí c a tanin 1.1.3.2 Tính ch t hóa h c c a tanin 1.1.4 ng d ng c a tanin 1.1.4.1 ng d ng làm ch t ch ng oxi hóa 1.1.4.2 ng d ng y h c 1.1.4.3 ng d ng công ngh thu c da 1.1.4.4 ng d ng m t s ngành cơng nghi p khác 1.1.5 Tình hình nghiên c u s d ng tanin hi n 1.1.5.1 Trên th gi i 1.1.5.2 Vi t Nam 1.1.6 Nh ng th c v t ch a nhi u tanin 1.2 T ng quan v keo lai 1.2.1 Khu v c phân b 1.2.2 Đ c ñi m keo lai 1.2.3 K thu t tr ng chăm sóc Keo lai 1.3 T ng quan lý thuy t v thu c da 1.3.1 C u t o tính ch t c a da ñ ng v t 1.3.1.1 C u t o da theo m t c t 1.3.1.2 Thành ph n c a da ñ ng v t 1.3.1.3 C u t o - Tính ch t Protein c a da 1.3.2 Khái ni m thu c da Thu c da m t trình ch bi n da b ng hố ch t đ nâng cao ch t lư ng c a da s ng M c đích c a ch ng l i s phân hu c a da ñ ng v t Trong trình thu c da, ch t thu c thâm nh p vào c u trúc bên c a da, tương tác k t h p v i nhóm ch c c a chu i polipeptit hình thành gi a chúng nh ng liên k t ngang b n v ng t o nên nh ng s bi n ñ i c ñ nh v c u trúc l n tính ch t lý hóa c a protein, chuy n bi n da nguyên li u thành da thu c 1.3.3 Quy trình thu c da Cơng ngh thu c da hồn ch nh có ba giai đo n chính: 1.3.3.1 Giai đo n 1: Ti n thu c-Thu c 1.3.3.2 Giai ño n 2: Tái thu c – Nhu m – Ăn d u 1.3.3.3 Giai đo n 3: Hồn t t 1.3.4 Gi i thi u m t s phương pháp thu c 1.3.5 Thu c da b ng tanin 1.3.5.1 Gi i thi u chung 1.3.5.2 Cơ ch thu c tanin 10 CHƯƠNG NGUYÊN LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 Ngun li u 2.2 Phân tích đ nh tính phát hi n tanin 2.3 Phân tích đ nh lư ng tanin Gi i thi u phương pháp Lowenthal: phương pháp oxi hóa tanin b ng dung d ch KMnO4 - Nguyên t c: Trong môi trư ng H2SO4, h p ch t polyphenol (tanin) d b oxi hóa b i KMnO4 v i ch t ch th inđigocarmin Sau oxi hóa h t phenol KMnO4 s ti p t c oxi hóa làm m t màu ch th 2.4 Xác ñ nh m t s ch tiêu lí, hóa c a m u tanin 2.4.1 Xác ñ nh ñ m 2.4.2 Xác ñ nh hàm lư ng tro 2.5 Tách tanin r n phân tích c u trúc, thành ph n c a tanin M u tanin r n ñư c ñ nh lư ng b ng phương pháp Lowenthal ñ xác ñ nh hi u qu tách t p ch t Sau ñó ti n hành ño ph h ng ngo i (IR) s c ký l ng cao áp (HPLC-MS) ñ ñ nh danh tanin 2.6 Nghiên c u y u t nh hư ng đ n q trình chi t tách tanin t v keo lai - nh hư ng c a nhi t ñ - nh hư ng th i gian - nh hư ng c a t l nguyên li u r n:dung môi l ng - nh hư ng t l dung môi nư c: etanol 11 2.7 Nghiên c u y u t nh hư ng đ n tính ch t thu c da c a tanin - nh hư ng c a n ng ñ dung d ch tanin - nh hư ng th i gian ngâm m u dung d ch tanin 2.8 Phương pháp ñánh giá k t qu th c nghi m c a trình thu c da 2.9 Thi t b th c nghi m 2.9.1 Thi t b chi t tách tanin 2.9.2 Thi t b ño nhi t ñ co c a da Hình 2.1 Sơ đ thi t b đo nhi t ñ co Cách th c hi n: C t m t m u da nghiên c u theo kích thư c 1cm*5cm r i l p vào b k p c a h th ng ño nhi t ñ co C m nhi t k vào becher, đun nóng t t becher ch a nư c m u da thí nghi m, đun nư c v i nhi t ñ nh ñ C/phút Lúc ñ u m ch 12 h , bóng đèn khơng sáng Quan sát s thay ñ i nhi t ñ c a dung d ch becher, ñ n ñèn sáng ta ghi nh n giá tr nhi t ñ t nhi t k d ng q trình đun Đó nhi t ñ co rút c a da 13 CHƯƠNG 3: K T QU VÀ TH O LU N 3.1 Đ m hàm lư ng tro c a v keo lai 3.1.1 Đ m B ng 3.1 Đ m c a v keo lai STT mo(g) m1(g) m2(g) W(%) 45,417 56,474 50,648 52,69 34,308 41,992 37,850 54,41 Đ m trung bình v keo lai là: W = 53,55% 3.1.2 Hàm lư ng tro B ng 3.2 Hàm lư ng tro c a v keo lai STT m(g) m1(g) m2(g) X(%) 15,334 72,690 58,060 95,04 17,367 71,560 56,125 88,86 Hàm lư ng tro c a m u X = 91,95% 3.2 nh hư ng c a y u t ñ n trình chi t tách tanin t v keo lai 3.2.1 nh hư ng c a nhi t ñ 14 nh hư ng c a nhi t ñ ñ n trình chi t tách tanin B ng 3.3 STT Nhi t ñ (oC) a (ml) b (ml) X (%) 60 1,40 0,6 11,64 70 1,50 0,6 13,10 80 1,80 0,6 17,46 90 1,75 0,6 16,73 100 1,80 0,6 17,46 Nhi t ñ t i ưu cho trình chi t tanin t v keo lai 80oC 3.2.2 nh hư ng c a th i gian B ng 3.4 nh hư ng c a th i gian đ n q trình chi t tách tanin STT Th i gian ñun (ph) a (ml) b (ml) X (%) 30 1,35 0,6 10,91 40 1,50 0,6 13,10 50 1,80 0,6 17,46 60 1,75 0,6 16,73 70 1,60 0,6 14,55 Th i gian t i ưu cho trình chi t tanin t v keo lai 50 phút 15 3.2.3 nh hư ng c a t l nư c:etanol B ng 3.5 nh hư ng c a t l nư c: etanol đ n q trình chi t tách tanin STT T l nư c: etanol a (ml) b (ml) X (%) 60: 1,8 0,6 17,46 50 : 10 1,2 0,6 8,73 40 : 20 1,6 0,6 14,55 30 : 30 2,0 0,6 20,37 20: 40 1,9 0,6 18,92 10: 50 1,3 0,6 10,19 : 60 0,9 0,6 4,37 T l nư c: etanol = : t i ưu 3.2.4 nh hư ng c a t l nguyên li u r n: dung môi l ng B ng 3.6 nh hư ng c a t l nguyên li u r n: dung môi l ng STT Th tích dung mơi (ml) a (ml) b (ml) X (%) 40 1,65 0,6 15,28 50 1,70 0,6 16,00 60 1,80 0,6 17,14 70 1,80 0,6 17,46 80 1,80 0,6 17,46 16 T l gam nguyên li u: 70ml dung môi t i ưu Tóm l i: Đi u ki n t i ưu cho trình chi t tách tanin t v keo lai là: kích thư c nguyên li u: b t, t l nư c: etanol = 1: 1, nhi t ñ 80oC, th i gian 50 phút, t l r n: l ng = gam: 70 ml 3.3 Phân tích s n ph m tanin r n 3.3.1 Tách tanin r n X lý dung d ch sau chi t v i clorofom ñ lo i t p ch t sau cho qua ph u chi t ñ lo i tư ng clorofom, d ch chi t cịn l i đem c t khơ Sau ñó ti n hành ño ph h ng ngo i c a m u tanin r n tách ñư c, k t qu ño ph h ng ngo i ñư c th hi n qua hình 3.6 B ng 3.7 K t qu phân tích ph IR T n s , cm-1 Lo i dao ñ ng 3405 -OH 1622 C=O 1456 C=C thơm 1211 Ete thơm 1050 824; 880 C-O CH benzen th para Qua b ng 3.7 cho th y, tanin tách t v keo lai có nhóm ch c phù h p v i cơng th c c a tanin đư c cơng b 17 3.3.2 Xác ñ nh thành ph n hóa h c c a h p ch t tanin, phương pháp HPLC-MS Ti n hành phân tích HPLC-MS m u tanin dung môi metanol-H20 ta thu ñư c k t qu trình bày ph ñ 3.7 T k t qu ph IR ph HPLC-MS, k t h p v i m t s d li u v ph chu n c a m t s h p ch t tanin t thư vi n ph cho phép d đốn s có m t c a m t s h p ch t thu c lo i tanin đư c trình bày b ng 3.8 B ng 3.8 Các h p ch t tanin v keo lai C ut Công th c c u t o [M+Na+2H]+ = 325,8 OCH3 OH M = 301 CTPT: C16H13O6 HO O Peonidin (thu c lo i h p OH ch t anthocynidin) OH [M-2H]+ = 455,8 OH M = 458 OH CTPT: C22H18O11 O HO OH Tên g i: 3-O- O Galloylepigallocatechin Teatannin II OH HO O OH Epigallocatechin 3-gallate OH (EGCG) 18 [ M + 3H ]+ = 535,2 OH O M = 532 HO O OH CTPT: C28H20O11 O 5-0 – galoyl – 4’-(p - O O hidroxy) phenyl eriodictyol HO OH OH [M + H ]+ = 637,2 M = 636 OH HO OH OH CTPT: C27H24O18 HO 1,3,5-digaloyl glucose O OH O O HO HO O HO HO [M + 3H]+ = 944,8 M = 942 CTPT: C41H34O26 β-1,2,3,4,6-pentagaloyl-OD-glucozơ O O OH O 19 nh hư ng ñ n ch t lư ng da thu c 3.4 Các y u t Thí nghi m 1: t o m u da thu c v i vi c thay ñ i n ng ñ ch t thu c tanin Thí nghi m 2: ki m tra m u da thu c b ng vi c kh o sát thông s ch tiêu ch t lư ng nhi t ñ co c a da B ng 3.9 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 10% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 10 61 61 61 10 64 64 64 10 67 67 67 10 67 68 67,5 10 72 73 72,5 10 72 74 73 10 71 71 71 B ng 3.10 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 15% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 15 61 61 61 15 64 65 64,5 15 69 69 69 15 68 69 68,5 15 72 73 72,5 15 73 73 73 15 73 73 73 20 B ng 3.11 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 20% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 20 61 61 61 20 65 65 65 20 71 72 71,5 20 71 71 71 20 74 74 74 20 74 75 74,5 20 74 74 74 B ng 3.12 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 25% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 25 61 61 61 25 69 69 69 25 73 74 73,5 25 73 73 73 25 77 77 77 25 76 76 76 25 76 77 76,5 21 B ng 3.13 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 30% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 30 61 61 61 30 68 69 68,5 30 74 74 74 30 73 73 73 30 76 76 76 30 76 78 77 30 77 77 77 B ng 3.14 Nhi t ñ co theo th i gian v i n ng ñ tanin 35% N ng ñ (%) Nhi t ñ co (oC) Th i gian (h) L n1 L n2 Trung bình 35 61 61 61 35 68 68 68 35 67 68 67,5 35 73 73 73 35 76 76 76 35 74 75 74,5 35 75 75 75 22 V y ñi u ki n t i ưu cho q trình thu c da là: - N ng đ dung d ch tanin 25% - Th i gian ngâm m u da dung d ch tanin gi V i ñi u ki n trên, nhi t ñ co c a da ñ t 77oC Hình 3.9 M u da chưa Hình 3.10 M u da thu c b ng tanin tách ñư c t v keo lai s d ng ch t thu c 3.5 Đánh giá ñ th m nư c c a m u da thu c B ng 3.15 Đ th m nư c c a da mo m1 m2 L n1 3,0 2,5 L n2 3,4 3,0 L n3 3,2 2,7 Trung bình 3,2 2,4 Ph n trăm ñ th m nư c c a da chưa thu c: 1,2*100/2 = 60% Ph n trăm ñ th m nư c c a da thu c: 0,4*100/2 = 20% 23 Trong đó: mo: Kh i lư ng ban ñ u c a t m da (gam) m1: Kh i lư ng c a t m da chưa thu c sau ngâm nư c (gam) m2: Kh i lư ng c a t m da thu c sau ngâm nư c (gam) 3.6 Đánh giá th i gian th i r a c a m u da thu c B ng 3.16 Th i gian th i r a da M u da M u da L n1 gi 48 gi L n2 gi 42 gi L n3 gi 45 gi Trung bình gi 20 phút 45 gi Trong đó: M u m u da khơng thu c M u m u da thu c v i ch t thu c tanin Qua b ng 3.15 3.16 ta th y ñ i v i m u da thu c kh th m nư c nhi u so v i m u da chưa ñư c thu c th i gian th i r a tăng nhi u so v i m u da khơng đư c thu c 24 K T LU N VÀ KI N NGH * K T LU N Qua trình nghiên c u, rút m t s k t lu n sau: Trong v keo lai ch a lo i tanin, tanin pyrogallic tanin pyrocatechic Đ Đ m hàm lư ng tro c a v keo lai m: W = 53,550%; Hàm lư ng tro: X = 91,95% Đã tìm đư c ñi u ki n t i ưu cho trình chi t tách tanin t v keo lai sau: Th i gian 50 phút; Nhi t ñ 80oC; t l nư c : etanol =1:1; T l nguyên li u r n:dung môi l ng = 1:70 Hàm lư ng tanin thu ñư c ñi u ki n 20,37% so v i lư ng nguyên li u khô K t qu ph IR HPLC c a tanin cho th y: Các lo i dao đ ng ph h ng ngo i c a tanin là: OH, C=O, C=C, C-O, C-H Xác đ nh đư c s có m t c a m t s h p ch t thu c nhóm tanin v keo lai Đã tìm đư c u ki n t i ưu cho trình thu c da b ng tanin sau: Th i gian gi ; N ng ñ dung d ch tanin 25% Trong ñi u ki n này, nhi t ñ co c a da ñ t 77oC Kh th m nư c gi m th i gian th i r a c a m u da ñư c thu c v i tanin tăng so v i m u da chưa thu c (Ph n trăm ñ th m nư c c a da chưa thu c: 1,2*100/2 = 60%; Ph n trăm ñ th m nư c c a da thu c: 0,4*100/2 = 20%) 25 * KI N NGH Do th i gian ph m vi ñ tài nghiên c u có h n, thơng qua k t qu c a đ tài, chúng tơi mong mu n đ tài ñư c phát tri n r ng v m t s v n ñ sau - Ti p t c nghiên c u chi t tách tanin t nhi u lo i khác Vi t Nam, s so sánh thành ph n hàm lư ng tanin tách ñư c So sánh kh thu c da c a tanin lo i đó, t xác đ nh lo i tanin cho ch t lư ng da t t nh t - K t h p xác ñ nh ch t lư ng da thu c b ng nhi u cách khác xác ñ nh ñ c ng, xác kh th m nư c c a m u da thu c - Nghiên c u thêm v nh ng ng d ng khác c a tanin t ng h p keo dán polyphenol, t ng h p lo i dư c ph m, làm ch t b n màu, ch t c ch ăn mòn kim lo i… - Xây d ng quy trình chi ti t s n xu t tanin quy mô công nghi p t ngu n nguyên li u v th i lo i khai thác g , nh a… c a lo i ch a tanin: keo tràm, đư c, thơng, chè… đ khai thác giá tr c a ngu n tanin l n b th t r t u ng phí hàng năm  ... c a keo lai, v y tơi ch n đ tài: “ Nghiên c u chi t tách tanin t v keo th nghi m nh hư ng ñ n ch t lư ng da? ?? Đ i tư ng ph m vi nghiên c u Đ i tư ng: Tanin tách ñư c t v keo lai kh thu c da c... chi t tách nghiên c u y u t nh hư ng ñ n trình chi t tách tanin t v keo lai - Nghiên c u ng d ng làm ch t thu c da c a tanin kh o sát y u t nh hư ng ñ n ch t lư ng da thu c v i ch t thu c tanin. .. a nhi u tanin 1.2 T ng quan v keo lai 1.2.1 Khu v c phân b 1.2.2 Đ c ñi m keo lai 1.2.3 K thu t tr ng chăm sóc Keo lai 1.3 T ng quan lý thuy t v thu c da 1.3.1 C u t o tính ch t c a da ñ ng v