Đang tải... (xem toàn văn)
Chuyển phôi nang hiện là chiến lược được lựa chọn trong điều trị hỗ trợ sinh sản nhằm cải thiện kết quả có thai so với chuyển phôi phân cắt và giảm tỷ lệ đa thai. Nghiên cứu này nhằm đánh giá chất lượng phôi và kết quả có thai của các chu kỳ chuyển phôi nang từ phôi rã đông ở giai đoạn phân cắt.
NGHIÊN CỨU VƠ SINH Nghiên cứu hiệu chuyển phơi nang từ phôi rã đông giai đoạn phân cắt Nguyễn Thị Thái Thanh1, Nguyễn Văn Trung1, Đặng Thị Hồng Nhạn1, Lê Minh Tâm1,2 Trung tâm Nội tiết Sinh sản Vô sinh, Bệnh viện Trường Đại học Y - Dược Huế Bộ môn Phụ sản, Trường Đại học Y - Dược, Đại học Huế doi:10.46755/vjog.2021.1.1182 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Nguyễn Thị Thái Thanh; email: nttthanh.huecrei@huemed-univ.edu.vn Nhận (received): 08/06/2021 - Chấp nhận đăng (accepted): 15/07/2021 Tóm tắt Mục tiêu: Chuyển phôi nang chiến lược lựa chọn điều trị hỗ trợ sinh sản nhằm cải thiện kết có thai so với chuyển phôi phân cắt giảm tỷ lệ đa thai Nghiên cứu nhằm đánh giá chất lượng phôi kết có thai chu kỳ chuyển phơi nang từ phôi rã đông giai đoạn phân cắt Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang, thực Trung tâm Nội tiết sinh sản vô sinh, Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Huế, thời gian từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 Các phôi đông lạnh giai đoạn phôi phân cắt (phôi ngày 2) rã đông nuôi cấy đến ngày trước chuyển phôi Các thông số chất lượng phôi trước đông lạnh, sau rã đơng, trước chuyển phơi, kết có thai bao gồm kết β-hCG dương tính, thai lâm sàng, tỷ lệ làm tổ ghi nhận Kết quả: Nghiên cứu thu nhận 52 chu kỳ chuyển phôi nang nuôi cấy từ phôi phân cắt rã đông gồm 216 phôi trữ rã đơng Có 57,94% phơi phân cắt sau rã đông phát triển thành phôi nang Mặc dù số phôi chuyển số phôi chuyển loại A trung bình thấp (1,98 ± 0,64 0,85 ± 0,78) tỷ lệ có thai lâm sàng tỷ lệ làm tổ tốt (46,15% 27,18%) Kết luận: Nuôi cấy kéo dài phôi phân cắt sau rã đông đến phôi nang có hiệu tốt với bệnh nhân thất bại chuyển phơi phân cắt trước Từ khóa: Chuyển phôi nang, phôi phân cắt, vô sinh, thụ tinh ống nghiệm The effectiveness of prolonged vitrified-warmed cleavage embryos to blastocyst transfer cycles Nguyen Thi Thai Thanh1, Nguyen Van Trung1, Dang Thi Hong Nhan1, Le Minh Tam1,2 Center for Reproductive Endocrinology and Infertility, Hue University of Medicine and Pharmacy, Vietnam Obstetrics and Gynecology Department, Hue University of Medicine and Pharmacy, Hue University Abstract Objectives: Blastocyst transfer seems to be a preferred strategy in assisted reproductive technology to improve pregnancy outcomes rather than cleavage embryo transfer This study aimed to evaluate the effectiveness of blastocyst transfer by extending the culture of vitrified-warmed cleavage embryos Materials and methods: This cross-sectional study was performed at the Center for Reproductive Endocrinology and Infertility, Hue University of Medicine and Pharmacy hospital, from January 2018 to June 2020 Vitrified-warmed day embryos were transferred after extended culture to the blastocyst stage The quality of vitrified-warmed embryos and pregnancy outcomes were analyzed Results: This study recruited 52 frozen embryo transfer cycles with prolonged culture to the blastocyst stage of 216 thawed cleavage-stage embryos Although the number of transferred embryos and grade A embryos were low (1.98 ± 0.64 and 0.85 ± 0.78, respectively), pregnancy outcomes with respect to clinical pregnancy rate and implantation rate gained well (46.15 and 27.18%, respectively) Conclusions: This study showed better pregnancy outcomes in cryopreserved embryos transfer cycles which had prolonged culture to blastocyst in patients with vitrified cleavage embryo failure Keywords: Blastocyst; vitrified embryo transfer; cleavage stage embryo; infertility; in vitro fertilization Nguyễn Thị Thái Thanh cs Tạp chí Phụ sản 2021; 19(1):61-66 doi: 10.46755/vjog.2021.1.1182 61 ĐẶT VẤN ĐỀ Chuyển phơi trữ lạnh (CPT) ngày đóng vai trò quan trọng kỹ thuật hỗ trợ sinh sản Sự phát triển lý thuyết thực hành kỹ thuật kích thích buồng trứng năm gần giúp tăng số lượng noãn thu nhận được, từ tạo nhiều phơi chu kỳ điều trị Bảo quản lạnh phương pháp tốt nhằm lưu trữ phôi dư để tiến hành chu kỳ chuyển phôi đông lạnh tiếp theo, làm tăng tỷ lệ có thai cộng dồn [1] Việc chuyển phơi đông lạnh dường phù hợp cho bệnh nhân có bệnh lý nội mạc tử cung, hội chứng kích buồng trứng, khả tiếp nhận nội mạc tử cung không đầy đủ phản ứng mức buồng trứng [2, 3] Bên cạnh đó, kỹ thuật chuyển phôi đông lạnh kỹ thuật quan trọng để kỹ thuật chẩn đốn di truyền phơi tiền làm tổ hình thành phát triển [1], [3] Nhiều nghiên cứu trước so sánh hiệu chuyển phôi giai đoạn phân cắt phôi nang kết luận chuyển phơi nang có kết có thai tốt [1], [3–5] Về lý thuyết, hình thái phôi ảnh hưởng không đến tỷ lệ sống sót sau rã đơng cịn tỷ lệ làm tổ sau chuyển phôi [3] Các tiêu chuẩn đánh giá hình thái để chọn lọc phơi giai đoạn phơi phân cắt liên quan với chất lượng di truyền phơi gen phơi hoạt hóa phơi đến giai đoạn phơi nang [6] Do đó, việc lựa chọn phơi giai đoạn phân cắt dường khơng xác giai đoạn phơi nang Người ta nhận thấy thủy tinh hóa ngày chấp nhận rộng rãi phương pháp bảo quản lạnh hiệu cho trứng phôi người thụ tinh ống nghiệm (in vitro fertilization - IVF) [3], [7] Thủy tinh hóa phơi nang lựa chọn tốt chương trình bảo quản phôi [8], [9] Tuy nhiên, vài nghiên cứu khác lại báo cáo chuyển phôi nang đông lạnh trì tỷ lệ có thai tương đương với phơi giai đoạn phân cắt [10], [11] Chỉ có số nghiên cứu ni cấy kéo dài phơi giai đoạn phân cắt đến giai đoạn phôi nang sau rã đông nghiên cứu cho kết tốt từ chuyển phôi nang sau nuôi cấy kéo dài [11], [12] Điều cho thấy nuôi cấy kéo dài chọn lọc phơi có tiềm với bất thường nhiễm sắc thể phôi giai đoạn phân cắt [3], [13] Đối với bệnh nhân bị thất bại chu kỳ chuyển phơi giai đoạn phân cắt trước đây, thực chu kỳ CPT với phôi giai đoạn phân cắt nuôi cấy lên giai đoạn phôi nang Mặc dù số lượng phơi nang đạt thấp số lượng nuôi cấy ban đầu phơi nang sau ni cấy thỏa mãn u cầu việc chẩn đốn xác cho giai đoạn phát triển sau phôi Xuất phát từ mục tiêu trên, tiến hành đề tài nhằm nhằm đánh giá chất lượng phôi kết có thai chu kỳ chuyển phơi nang từ phôi rã đông giai đoạn phân cắt ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nghiên cứu mô tả cắt ngang trường hợp vô sinh điều trị thụ tinh ống nghiệm Trung tâm Nội tiết 62 Sinh sản Vô sinh, Bệnh viện Trường Đại học Y – Dược Huế Tiêu chuẩn lựa chọn gồm cặp vợ chồng vơ sinh có chu tiêm tinh trùng vào bào tương trứng (intracytoplasmic sperm injection - ICSI) chu kỳ CPT từ 2018 đến 2020, có phơi trữ lạnh phơi giai đoạn phân cắt thất bại chu kỳ chuyển phôi phân cắt trước Tiêu chuẩn loại trừ bao gồm người vợ lớn tuổi (trên 45 tuổi), người vợ có đáp ứng buồng trứng (số trứng thu nhận 4), xin trứng, xin tinh trùng độ dày nội mạc tử cung 7mm thời điểm chuyển phơi đơng lạnh Kích thích buồng trứng thu nhận trứng Người vợ kích thích buồng trứng phác đồ GnRH đối vận FSH tái tổ hợp (rFSH - follitropin alfa) Sau 35-36 gây trưởng thành nang nỗn tiêm 10,000 IU hCG (human chorionic gonadotropin) (Pregnyl®, Merck Sharp & Dohme Limited, Hertfordshire, UK), noãn thu nhận hướng dẫn siêu âm đường âm đạo Tiêm tinh trùng vào bào tương trứng nuôi cấy phơi Quy trình tiêm tinh trùng vào bào tương trứng ICSI thực thường quy cho tất bệnh nhân Phức hợp tế bào hạt - noãn thu nhận rửa G-MOSP PLUS (Vitrolife®, Västra Frưlunda, Thụy Điển), sau ni cấy mơi trường G-IVF PLUS (Vitrolife®, Västra Frưlunda, Thụy Điển) 37°C tủ ni cấy có 6,0% CO2 h Trứng sau tách 80 IU Hyase (Vitrolife®, Västra Frưlunda, Thụy Điển) ủ mơi trường G-IVF PLUS trước ICSI điều kiện 6,0% CO2 5,0% O2 Tinh trùng xử lý trước ICSI phương pháp ly tâm thang nồng độ, sử dụng Sil-select PlusTM (với lớp 45% 90%, Fertipro®, Beernem, Bỉ) Tinh trùng sau lọc rửa lại lần SpermRinse (Vitrolife®, Västra Frưlunda, Thụy Điển) Các trứng trưởng thành ICSI nuôi cấy giọt đơn mơi trường G-TL™ (Vitrolife®, Västra Frưlunda, Thụy Điển) có phủ dầu Ovoil (Vitrolife, Västra Frölunda, Thụy Điển) 37°C tủ ni cấy có 6,0% CO2 5,0% O2 Các phôi nuôi tủ nuôi cấy Benchtop (IVFtech, Birkerød®, Đan Mạch) Tiêu chuẩn đánh giá phơi dựa theo Đồng thuận Istanbul [14] Các phơi tốt trung bình lựa chọn để đông lạnh phương pháp thủy tinh hóa Thủy tinh hóa làm ấm phơi Phơi giai đoạn phân cắt (phôi ngày 2) thủy tinh hóa mơi trường thủy tinh hóa thương mại (VT601, Kitazato®, Tokyo, Nhật Bản) dụng cụ trữ phơi cryotop Kitazato (Kitazato®, Tokyo, Nhật Bản) theo hướng dẫn nhà sản xuất Các phôi đông lạnh làm ấm kit làm ấm Kitazato (VT602, Kitazato®, Tokyo, Nhật Bản) theo protocol chuẩn nhà sản xuất Các phôi sau rã đông nuôi cấy môi trường G-TL với điều kiện 6,0% CO2 5,0% O2 37°C Quy trình thường quy làm ấm cryotop chu kỳ chuyển phôi đông lạnh Tuy nhiên, mặt lý thuyết, nửa phôi phân cắt phát triển thành phơi nang [14], chúng tơi tiến hành tư Nguyễn Thị Thái Thanh cs Tạp chí Phụ sản 2021; 19(1):61-66 doi: 10.46755/vjog.2021.1.1182 vấn bệnh nhân thất bại làm tổ nhiều lần cịn cryotop chứa phơi phân cắt để rã đông cryotop, nhằm đảm bảo hầu hết bệnh nhân chuyển phơi nang chất lượng tốt Các chu kỳ CPT thực độ dày nội mạc tử cung đạt tối thiểu mm Nuôi cấy phôi sau làm ấm chuyển phôi Các phôi phân cắt đông lạnh nuôi cấy thêm ngày sau rã đông để phát triển thành phơi nang trước chuyển phơi Các phơi sống sót phôi bao gồm 50% phôi bào sống không bị tổn thương màng zona sau làm ấm Phơi khơng có tổn thương phơi bào gọi phơi tồn vẹn [15], phơi sau rã đông phát triển thành phôi nang chuyển, phơi khác bị loại bỏ Nếu có phơi nang sau ni cấy số lượng phơi chuyển tối đa phơi cịn lại đông lạnh lại Tỷ lệ phôi hữu dụng tính tỷ lệ phơi chuyển trữ lại (nếu có) tổng số phơi tồn vẹn sau rã đơng Tỷ lệ có ý nghĩa việc xác định tỷ lệ tạo phôi nang sau nuôi cấy từ phôi phân cắt rã đông Các phôi chuyển ngâm Embryoglue (Vitrolife, Thụy Điển) từ 15 đến 30 phút trước chuyển vào tử cung hướng dẫn siêu âm nhờ catheter chuyển phôi Kitazato (Kitazato, Tokyo, Nhật Bản) Kết lâm sàng Kết có thai bao gồm xét nghiệm beta-hCG, tỷ lệ có thai lâm sàng tỷ lệ làm tổ 11 ngày sau chuyển phơi, beta-hCG đo tính dương tính đạt ≥ 50 mIU/mL Có thai lâm sàng đánh giá có mặt túi thai tim thai sau tuần chuyển phôi Tỷ lệ làm tổ tính số túi thai số phơi chuyển sau tuần Phân tích thống kê Nghiên cứu sử dụng phần mềm Statistical Package for Social Sciences version 20.0 (SPSS, Chicago, USA) MedCal version 12 (MedCal Software, Ostend, Bỉ) để phân tích liệu Các kết xác định có ý nghĩa thống kê p < 0,05 KẾT QUẢ Nghiên cứu thu nhận 52 chu kỳ chuyển phôi nang nuôi cấy từ phôi phân cắt rã đông gồm 216 phôi trữ giai đoạn phân cắt Các đặc điểm chung bệnh nhân trình bày bảng Bảng Đặc điểm chung bệnh nhân Đặc điểm chung Nhóm nghiên cứu (52 chu kỳ) Tuổi vợ thời điểm ICSI 32,27 ± 4,67 Tuổi vợ thời điểm CPT 34,19 ± 4,6 Thời gian vô sinh (năm) 4,77 ± 2,78