Phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất triterpenoit từ nấm lỗ (hexagonia apiaria) ở nghệ an

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH PHẠM THỊ HẰNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC MỘT SỐ HỢP CHẤT TRITERPENOIT TỪ NẤM LỖ (HEXAGONIA APIARIA) Ở NGHỆ AN LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Vinh - 2014 LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phịng thí nghiệm chun đề Hố hữu Khoa Hố, Trung tâm Kiểm định An tồn Thực phẩm Môi trường, Trường Đại học Vinh, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh, Viện Hàn lâm - Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS TS Trần Đình Thắng – Phó trưởng Khoa Hố học, Trường Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Hoàng Văn Lựu, PGS.TS Lê Văn Hạc - Khoa Hoá học- Trường Đại học Vinh giúp đỡ bảo tận tình cho tơi hồn thành luận văn TS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu thực vật PGS.TS Ngô Anh (Khoa Sinh, Trường Đại học khoa học Huế) giúp định danh mẫu thực vật Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cơ, cán bộ mơn Hố Hữu cơ, Khoa Hoá học, anh chị nghiên cứu sinh, học viên cao học, bạn sinh viên phịng nghiệm chun đề Hóa Hữu cơ, gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Nghệ An, ngày 30 tháng 10 năm 2014 Học viên Phạm Thị Hằng MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tượng nghiên phạm vi nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Họ Nấm Lỗ (Polyporaceae) 1.1.1 Đặc điểm thực vật phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.2.1 Terpenoit 1.1.2.1.1 Các lanostan triterpenoit dẫn xuất chúng 1.1.2.1.2 Sesquiterpenoit diterpenoit 18 1.1.2.2 Các sterol 21 1.1.2.3 Các hợp chất khác 28 1.1.3 Hoạt tính sinh học 29 1.1.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào 29 1.1.3.2 Hoạt tính ức chế 29 1.2 Chi Hexagonia 30 1.2.1 Đặc điểm 30 1.2.2 Thành phần hố học 31 1.2.3 Hoạt tính sinh học 32 1.3 Nấm lỗ (Hexagonia apiria) 32 1.3.1 Phân Loại 32 1.3.2 Đặc điểm 33 1.3.3 Thành phần hóa học hoạt tính sinh học 34 Chƣơng 2: PHƢƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 35 2.1 Phương pháp nghiên cứu 35 2.1.1 Phương pháp lấ y mẫ u 35 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân tách hỗ n hợp phân lậ p 35 hợp chấ t 2.1.3 Phương pháp khả o sát cấ u trúc hợp chấ t 35 2.2 Hoá chấ t, dụ ng cụ thiế t bị 36 2.2.1 Hoá chấ t 36 2.2.2 Dụ ng cụ thiế t bị 36 2.3.1 Phân lậ p hợp chấ t 36 2.3.2 Mộ t số kiệ n phổ tử ngoạ i, hồ ng ngoạ i, phổ khố i phổ 37 cộ ng hưởng từ hạ t nhân củ a chấ t đ ã phân lậ p Chương 3: KẾT LUẬN VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Phân lậ p hợp chấ t 39 3.2 Xác đ ị nh cấ u trúc hợp chấ t A 39 3.3 Xác đ ị nh cấ u trúc hợp chấ t C 52 KẾT LUẬN 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 67 Danh mục kí hiệu viết tắt, chữ viết tắt CC: Column Chromatography (sắc kí cột) TLC: Thin Layer Chromatography (sắc kí lớp mỏng) RP -18: Reversed phase Chromatography (sắc kí cột pha đảo) IR: Infrared Spectroscopy (phổ hồng ngoại) HR-ESI- MS: High Resolution Electrospray Mass Spectrometry (phổ khối phân giải cao) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (phổ cộng hưởng từ hạt nhân) 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (phổ cộng hưởng từ hạt nhân C-13) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet tù t: triplet d: doublet dd: doublet doublet ddd: doublet doublet doublet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide Đ.n.c : Điểm nóng chảy DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất A 40 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất C 53 DANH SÁCH SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1 Chiết hợp chất thể nấm lỗ H apiari 38 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 3.1 HMBC hợp chất A (Hexagonin A) 42 Hình 3.2 Phổ khối lượng phân giải cao (HR- ESI-MS) hợp 42 chất A Hình 3.3 Phổ hồng ngoại (IR) hợp chất A 43 Hình 3.4 Phổ 1H- NMR hợp chất A 43 Hình 3.5 Phổ 1H- NMR hợp chất A 44 Hình 3.6 Phổ 3C- NMR hợp chất A 44 Hình 3.7 Phổ 13C- NMR hợp chất A 45 Hình 3.8 Phổ DEPT hợp chất A 46 Hình 3.9 Phổ HSQC hợp chất A 47 Hình 3.10 Phổ HSQC hợp chất A 48 Hình 3.11 Phổ HMBC hợp chất A 48 Hình 3.12 Phổ HMBC hợp chất A 49 Hình 3.13 Phổ HMBC hợp chất A 50 Hình 3.14 Phổ COSY hợp chất A 51 Hình 3.15 Phổ COSY hợp chất A 52 Hình 3.16 Phổ 1H-NMR hợp chất C 55 Hình 3.17 Phổ 1H-NMR hợp chất C 56 Hình 3.18 Phổ 13C-NMR hợp chất C 56 Hình 3.19 Phổ 13C-NMR hợp chất C 57 Hình 3.20 Phổ DEPT hợp chất C 58 Hình 3.21 Phổ HSQC hợp chất C 59 Hình 3.22 Phổ HMBC hợp chất C 60 Hình 3.23 Phổ HMBC hợp chất C 61 Hình 3.24 Phổ HMBC hợp chất C 62 Hình 3.25 Phổ COSY hợp chất C 62 Hình 3.26 Phổ COSY hợp chất C 63 Hình 3.27 Phổ NOESY hợp chất C 64 Hình 3.28 Phổ NOESY hợp chất C 65 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Hiện nay, nấm công nhận giới riêng biệt, khác biệt hẳn với thực vật hay động vật, chúng tách xuất xấp xỉ tỷ năm trước [5], tạo thành giới riêng biệt hành tinh Nấm phân bố tồn giới phát triển nhiều dạng mơi trường sống khác nhau, đa phần nấm sống cạn, số lồi lại tìm thấy môi trường nước Dựa theo theo tỉ lệ số loài nấm với số loài thực vật mơi trường, người ta ước tính giới Nấm có khoảng 1,5 triệu lồi [6] Tuy nhiên có khoảng 80000 loài nấm nhà phân loại học phát định danh Giới Nấm ngày có ý nghĩa to lớn kinh tế quốc dân, khoa học vòng tuần hồn vật chất Giới nấm nói chung nấm nói riêng có ý nghĩa quan trọng đời sống người, chúng nguồn thực phẩm giàu chất dinh dưỡng, nguồn thức ăn quý nhân dân ưa chuộng, chứa nhiều protein, chất khoáng vitamin (A, B, C, D, E ) [2,3] Nhiều loài nấm ứng dụng công nghiệp dược phẩm, nguồn nguyên liệu để điều chế hoạt chất điều trị bệnh Những loại nấm nấm hương, nấm linh chi tập trung nghiên cứu khả chống ung thư, chống virus tăng cường hệ miễn dịch chúng Ở Việt Nam, từ lâu nhân dân biết dùng nấm làm thực phẩm dược phẩm Việc nghiên cứu nấm bắt đầu vào năm 1954 Đại học Tổng hợp Hà Nội mô tả 28 loài nấm ăn 10 loài nấm độc Và Việt Nam có nhiều cơng trình nghiên cứu nấm có nhiều lồi mơ tả, có số cơng trình nghiên cứu ứng dụng nấm làm dược liệu Các loài nấm thuộc chi Hexagonia loài nấm quý, chúng chưa nghiên cứu nhiều Trên giới có hai cơng trình nghiên cứu từ Hexagonia speciosa Chúng có hoạt tính sinh học cao, có khả ngăn chặn số dịng ung thư Lồi Hexagonia apiaria loại nấm dược liệu có giá trị cao tài nguyên thiên nhiên quý Kỹ thuật trồng Hexagonia apiaria phát triển nhân tạo nấm đảm thu thành công Tuy nhiên Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học giá trị sử dụng y học chi Chính chọn đề tài: “Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất triterpenoit từ nấm lỗ (Hexagonia apiaria (Pers.) Fr.) Nghệ An” từ góp phần xác định thành phần hố học hợp chất tìm nguồn nguyên liệu cho ngành hố dược Mục đích nghiên cứu Đề tài tập trung đánh giá tiềm thành phần hóa học loài nấm lỗ (Hexagonia apiaria) bao gồm thu mẫu thực vật, chụp ảnh, tạo tiêu bản, tạo dịch chiết metanol, tách chiết phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập được, tạo sở liệu khoa học phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng nh m tạo sản phẩm dược phẩm phục vụ sống Nhiệm vụ nghiên cứu Trong đề tài này, có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung mơi thích hợp để thu hỗn hợp hợp chất từ nấm lỗ Hexagonia apiaria - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ nấm lỗ Hexagonia apiaria Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu thể loài nấm lỗ Hexagonia apiaria thuộc chi Nấm Hexagonia Phƣơng pháp nghiên cứu - Thu mẫu xác định tên khoa học - Chiết với dung môi có độ phân cực khác hexan, etyl axetat, butanol… - Sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký sắc ký cột thường (CC) sử dụng silicagel cỡ hạt 230-400/mesh Sắc ký lớp mỏng (TLC) phân tích tiến hành mỏng kính silicagel Merck 60 F254 tráng sẵn, độ dày 0,2 mm, phương pháp kết tinh phân đoạn - Cấu trúc hoá học hợp chất phân lập xác định b ng phương pháp vật lý đại phổ tử ngoại (UV), phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1D NMR) hai chiều (2D NMR) với kỹ thuật khác 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT, 1H-1H COSY, HSQC HMBC sử dụng - Cấu trúc lập thể tương đối tuyệt đối hợp chất xác định b ng phản ứng hoá học phương pháp phổ NMR với kỹ thuật NOESY Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Họ Nấm Lỗ (Polyporaceae) 1.1.1 Đặc điểm thực vật phân bố Họ Polyporaceae họ nấm thuộc khung Basidiomycota bao gồm có 92 chi 636 lồi Các lồi họ Polyporaceae nấm gỗ mục nát, gồm có hai loại: 71 loài nấm trắng thối (phân hủy lignin) có hệ sợi nấm mono- di-mitic, bề mặt bào tử đảm mịn, lưỡng cực; 21 loài nấm nâu thối (phân hủy cellulose) có hệ sợi nấm di- tri-mitic, tứ cực [7] Hầu hết loài họ có hymenium lỗ chân lơng n m mặt mũ, số lồi có mang Panus có cấu trúc mang 10 Hình 3.22: Phổ HSQC hợp chất C 66 Hình 3.23: Phổ HMBC hợp chất C 67 Hình 3.24: Phổ HMBC hợp chất C 68 Hình 3.25: Phổ HMBC hợp chất C Hình 3.26: Phổ COSY hợp chất C 69 Hình 3.27: Phổ COSY hợp chất C 70 Hình 3.28: Phổ NOESY hợp chất C 71 Hình 3.29: Phổ NOESY hợp chất C 72 KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hóa học nấm lỗ (Hexagonia apiaria (Pers.) Fr.) Nghệ An thu số kết sau: - Quả thể nấm lỗ (8,6kg) phơi khô, nghiền nhỏ, ngâm chiết lần b ng dung môi methanol (10Lx3) nhiệt độ phòng, thu dich chiết cất giảm áp suất b ng thiết bị quay cất chân không thu cao metanol thô màu nâu (180g) Cao thô đươc hòa tan nước chiết phân bố với dung môi clorofom, chưng cất chân không thu hai phần: dịch chiết clorofom gồm chất tan dung môi clorofom (105g) dịch chiết nước gồm chất tan nước (75g) - Phân lập hợp chất từ cao clorofom b ng phương pháp sắc ký kết tinh phân đoạn thu chất A C - Đã tiến hành sử dụng phương pháp phổ đại: phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY, NOESY) để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ cho phép khẳng định chất A đặt tên hexagonin A, chất C đặt tên hexagonin C Đây hai hợp chất 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trịnh Tam Kiệt, (1981), Nấm lớn Việt Nam Tập I, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Ngô Anh (2003), Nghiên cứu thành phần loài nấm Thừa Thiên Huế, Luận án Tiến sĩ khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Đỗ Huy Bích, Nguyễn Tập, Phạm Văn Hiển, Trần Tồn, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Kim Mãn, Nguyễn Thượng Dong, Đoàn Thị Nhu, Phạm Duy Mai, Đỗ Trung Đàm, Bùi Xuân Chương, Đặng Quang Chung (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam – Tập II, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Lê Bá Dũng, (2001), Thành phần loài chi Hexagonia Fr vùng tây nguyên, Tạp chí Sinh học, 23(3) 19 – 21 Tiếng Anh Kiet T T (1998), Preliminary checklist of macrofungi of Vietnam, Feddes Repertorium, 109 (3 - 4) pp 257- 277 Kirk P M., Cannon P F., Minter D W., Stalpers J A, (2001), Dictionary of the fungi, 9th Edition, Ainsworth & Bisby’s Akiko Y, Shinsaku N, (1975), Distribution of tetracyclic triterpenoids of lanostane group and sterols in the higher fungi especially of the polypraceae and related families, Phytochemistry, 14, pp 487 – 497 Dilani D D S, Sylvie R, Enge S, Marc S, Jianchu X., S Aisyah A, Kevin D H, (2013), Bioactive metabolites from macrofungi: ethnopharmacology, biological activities and chemistry, Fungal 74 Diversity, 62, – 40 Tai T., Akahori A., Shingu T., (1991), Triterpenoids from Poria cocos, Phytochemrstry, 30(8) pp 2796 - 2797 10 Tai T., Akahori A., Shingu T., (1992), A lanostane triterpenoids from Poria cocos, Phytochemistry, 31(7) pp 2548-2549 11 Tai T., Shingu T., Kikuchi T., Tezuka Y., Akahori A., (1995), Triterpenes from the surface layer of Poria cocos, Phytochemistry, 39(5) pp 1165 – 1169 12 Kaminaga T., Yasukawa K., Kanno H., Tai T., Nunoura Y.,Takido M., (1996), Inhibitory effects of lanostane- type triterpen acids, the components of Poria cocos, on tumor promotion by 12-O-tetradecanoylphorbol-13acetate in two-stage carcinogenesis in mouse skin, Oncology, 53, 382 -385 13 Nukaya H., Yamashiro H., Fukazawa H., Ishida H., Tsuji K., (1996), Isolation of inhibitors of TPA-induced mouse ear edema from Poria cocos, Chem Pharm Bull., 44(4) 847-849 14 Kawagishi H., Li H., Tanno O., Inoue S., Ikeda S., Kameyama M O., Nagata T., (1997), A lanostane-type triterpene from a mushroom Daedalea dickinsii, Phytochemistry, 46(5) 959 – 961 15 Rösecke J., König W A., (1999), Steroids from the fungus Fomitopsis pinicola, Phytochemistry, 52 1621 – 1627 16 Bae K G., Tae J M, (2000), The structure and antibiotic activities of hydroxy acid of lanostenol compound in Daedalea dickinsii, Bull Korean Chem Soc., 21(12) 1199-1201 17 Ukiya T., Akihisa T., Tokuda H., Hirano M., Oshikubo M., Nobukuni Y., Kimura Y., Tai T., Kondo S., Nishino H., (2002), Inhibition of tumorpromoting effects by poricoic acids G and H and other lanostane-type triterpenes and cytotoxic activity of poricoic acids A and G from Poria cocos, J Nat Prod., 65 462-465 18 León F., Quintana J., Riverta A., Estévez F., Bermejo J., (2004), 75 Lanostanoids from Laetiporus sulphureus, Nat Prod 67(12): 2008-2011 19 Yoshikawa K., Kouso K., Takahashi J., Matsuda A.,Okazoe M., Umeyama A., Arihara, (2005), Cytotoxic constituents of the fruit body of Daedalea dickisii, J Nat Prod., 68 911 -914 20 Akihisa T., Nakamura Y., Tokuda H., Uchiyama E., Suzuki T., Kimura Y., Uchikura K., Nishino H., (2007), Triterpene acids from Poria cocos and their anti-tumor-promoting effects, J Nat Prod.,70 948 -953 21 Akihisa T., Uchiyama E., Kikuchi T., Tokuda H., Suzuki T., Kimura Y., (2009), Anti-tumor-promoting effects of 25-methoxyporicoic acid A and other triterpene acids from Poria cocos, J Nat Prod., 72 1786–1792 22 Zheng Y., Yang X W, (2008), Poriacosones A and B: two new lanostane triterpenoids from Poria cocos, J Asian Nat Prod Res., 10(7) 640–646 23 Zhou L., Zhang Y., Gapter L A., Ling H., Agarwal R., Ng K., (2008), Cytotoxic and anti-oxidant activities of lanostane-type triterpenes isolated from Poria cocos, Chem Pharm Bull., 56(10) 1459-1462 24 Yeh C T., Rao Y K., Yao C J., Yeh C F., Li C H., Chuang S E., Luong J H T., Lai G M., Tzeng Y M., (2009), Cytotoxic triterpenes from Antrodia camphorata and their mode of action in HT-29 human colon cancer cells, Food Chem Toxicol., 46 2680 -2688 25 Lin H C., Song Y Y., Huang Y C., Chang W L., (2010), A 4,5secolanostane triterpenoid from the sclerotium of Poria cocos, J Med Sci., 30(6) 237-240 26 Kikuchi T., Uchiyama M., Ukiya M., Tabata K., Kimura Y., Suzuki T., Akihisa T., (2011), Cytotoxic and apoptosis-inducing activities of triterpene acids from Poria cocos, J Nat Prod., 74(2) 137 – 44 27 She G., Zhu N., Wang S., Liu Y., Ba Y., Sun C., Shi R., (2012), New lanostane-type triterpene acids from Wolfiporia extensa, Chem Central J., 6(39) 1-5 28 Cheng M C., Wang Y., Cherng I H., Chiang H C., (1995), A 76 secquiterpene lactone, phenyl and biphenyl compounds from Antrodia camphorata, phytochemistry, 39(3) pp 613 – 616 29 Li G., Xu M L., Lee C S., Woo M H., Chang H W., Son J K., (2004), Cytotoxicity and DNA topoisomerases inhibitory activity of constituents from the sclerotium of Poria cocos, Arch Pharm Res., 27(8) 829 – 833 30 Chen C C., Shiao Y J., Lin R D., Shao Y Y., Lin C C., Lai M N., Ng L T., Kuo Y H., (2006), Neuroprotective diterpenes from the fruiting body of Antrodia camphorata, J Nat Prod., 69, 689 – 691 31 Liu D Z., Wang F., Yang L M., Zheng Y T., Liu J K., (2007), A new cadimane sesquiterpene with significant anti – HlV – – activity from the cultures of the Basidiomycete Tyromyces chioneus, J Antibiot., 60 (5) 332 – 334 32 Otaka J., Araya H., (2013), Two new isodrimene sesquiterpenes from the fungal culture broth of Polyporus arcularius, Phytochem Lett., 598– 601 33 Wang S., Li Z H., Dong Z J., Liu J K., Feng T., (2013), Norbisabolane and eremophilane sesquiterpenoids from cultures of the basidiomycete Polyporus ellisii, Fitoterapia, 91, 194 –198 34 Ohsawa T., Yukawa M., Takao C., Murayama M., Bando H., (1992), Studies on constituents of fruit body of Polyporus umbellatus and their cytotoxic activity, Chem Pharm Bull., 40(1) 143 – 147 35 Cherng I H., Chiang H C., (1995), Three new triterpenoids from Antrodia cinnamomea, J Nat Prod., 58(3) pp 365 – 371 36 Keller A C., Maillard M P., Hostettmann K., (1996), Antimicrobial steroids from the fungus Fomitopsis pinicola, Phytochemistry, 41(4) 1041-1046 37 Lee W Y., Park Y., Ahn J K., Park S Y., Lee H J., (2005), Cytotoxic activity of ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-onemfrom the Sclerotia of Polyporus umbellatus, Bull Korean Chem Soc., 26(9) 1464 – 1466 77 38 Zhou W W., Lin W H., Guo S X., (2007), Two new polyporusterones isolated from the sclerotia of Polyporus umbellatus, Chem Pharm Bull 55(8) 1148-1150 39 Sun Y., Yasukawa K., (2008), New anti-inflammatory ergostane-type ecdysteroid from the sclerotium of Polyporus umbellatus, Bioorg Med Chem Lett., 18 3417–3420 40 Male K B., Rao Y K., Tzeng Y M., Montes J., Kamen A., Luong J H T., (2008), Probing inhibitory effects of Antrodia camphorata isolates using insect cell-based impedance spectroscopy: inhibition vs chemical structure, Chem Res Toxicol., 21 2127–2133 41 Zhao Y Y., Chao X., Zhang Y., Lin R C., Sun W J, (2010), Cytotoxic steroids from Polyporus umbellatus, Planta Med., 76 1755 – 1758 42 Lee H S., Hwang I H., Kim J A., Choi J Y., Jang T S., Osada H., Ahn J S., Na M., Lee S H., (2011), Isolation of protein tyrosine phosphatase 1B inhibitory constituents from the sclerotia of Polyporus umbellatus Fries, Bull Korean Chem Soc., 32(2) 697 – 700 43 Wang S., Zhang L., Liu L Y., Dong Z J., Li Z H., Liu J K., (2012), Six novel steroids from culture of basidiomycete Polyporus ellisii, Nat Prod Bioprospect., 240–244 44 Fangkrathok N., Sripandkulchai B., Umehara K., Noguchi H., (2013), Bioactive ergosta noids and a new polyhyd roxyoctane from Lentinus polychrous mycelia and their inhibitory effects on E2-enhanced cell proliferation of T47D cells, Nat Prod Res., 27(18) 1611–1619 45 Huang Y., Lin X., Qiao X., Ji S., Liu K., Yeh C T., Tzeng Y M., Guo D., Ye M., (2014), Antcamphins A-L, Ergostanoids from Antrodia camphorata, J Nat Prod., 77 118−124 46 Huang K F., Huang W H., (2001), Phenyl compounds from Antrodia cinnamomea, Chin Pharma J., 53 327 – 331 47 Huang R L., Huang Q., Chen C F., Chang T T., Chou C J., (2003), Anti78 viral effects of active compounds from Antrodia cinnamomea on wild-type and lamivudine-resistant mutant, Chin Pharma J., 55 371 – 379 48 León F., Brouard I., Rivera A., Torres F., Rubio S., Quintana J., Estévez F., Bermejo, (2006), Isolation, structure elucidation, total synthesis, and evaluation of new natural and synthetic ceramides on human SK-MEL-1 melanoma cells, J Med Chem., 49, 5830-5839 49 Hattori M., Sheu C C., Hsiang K S., (2006), Compounds from Antrodia camphorata having anti-inflammatory and anti-tumor activity, United States Patent, – 13 50 Lee T H., Lee C K., Tsou W L., Liu S Y., Kuo M T., Wen W C., (2007), A new cytotoxic agent from solid-state fermented mycelium of Antrodia camphorata, Planta Med, 73, 1412-1415 51 Wu M D., Cheng M J., Wang B C., Yech Y J., Lai J T., Kuo Y H., Yuan G F., Chen I S., (2008), Maleimide and maleic anhydride derivatives from the mycelia of Antrodia cinnamomea and their nitric oxide inhibitory activities in macrophages, J Nat Prod., 71, 1258–1261 52 Chien S C., Chen M L., Kuo H T., Tsai Y C., Lin B F., Kuo Y H., (2008), Anti-inflammatory activities of new succinic and maleic derivatives from the fruiting body of Antrodia camphorata, Food Chem., 56, 7017–7022 53 Yang S S., Wang G J., Wang S Y., Lin Y Y., Kuo Y H., Lee T H., (2009), New constituents with INOS inhibitory activity from mycelium of Antrodia camphorata, Planta Med., 75, 512– 516 54 Isaka M., Sappan M., Rachtawee P., Boonopratuang T., (2011), A tetrahydrobenzofuran derivative from the fermentation broth of Lentinus squarrosulus BCC 22366, Phytochem Letters, 4, 106–108 55 Chen Y C., Chiu H L., Chao C Y., Lin W H., Chao L K., Huang G J., Kuo Y H., (2013), New Anti-inflammatory aromatic components from Antrodia camphorata, Int J Mol Sci., 14, 4629 – 4639 79 56 Ríos J L., Andújar I., Recio M C., Giner R M., (2012), Lanostanoids from fungi: A group of potential anticancer compounds, J Nat Prod., 75, 2016−2044 57 Jiang M Y., Zhang L., Liu R., Dong Z J., Liu J K., (2009), Speciosins A-K, oxygenated cyclohexanoids from the basidiomycete Hexagonia speciosa, J Nat Prod., 72, 1405–1409 58 Jiang M Y., Li Y., Wang F., Liu J K, (2011), Isoprenylated cyclohexanoids from the basidiomycete Hexagonia speciosa, Phytochemistry, 72, 923–928 59 Rios J L., (2011), Chemical constituents and pharmacological properties of Poria cocos, Planta Med., 77, 681-691 80 ... Chiết hợp chất thể nấm H apiaria 45 F7 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập hợp chất Từ dịch chiết metanol thể nấm lỗ, b ng phương pháp sắc ký cột silica gel phân lập hợp chất A C Cấu trúc. .. -lanostane Khung , ( 11 )-lanosta-diene Khung seco -eburicane 28 Hình 1.2: Các kiểu cấu trúc lanostanoit khác Từ năm 1991 – 1996, Tai T cộng phân lập 12 hợp chất lanostanoit từ lớp bề mặt khơ nấm. .. học lồi nấm lỗ (Hexagonia apiaria) bao gồm thu mẫu thực vật, chụp ảnh, tạo tiêu bản, tạo dịch chiết metanol, tách chiết phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập được, tạo sở liệu khoa