Nghiên cứu thành phần hóa học nấm tổ ong lông thô (hexagonia apiaria (perf ) ở việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ QUANG HÓA NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC NẤM TỔ ONG LÔNG THÔ (HEXAGONIA APIARIA (PERF.) Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Vinh – 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ QUANG HÓA NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC NẤM TỔ ONG LÔNG THÔ (HEXAGONIA APIARIA (PERF.) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: HOÁ HỮU CƠ Mã số: 60.44.01.14 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Đình Thắng Vinh – 2015 LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phịng thí nghiệm chuyên đề Hóa Hữu – Khoa Hóa, Trung tâm Kiểm định An tồn Thực Phẩm Mơi trường, Trường Đại học Vinh, Viện Hóa học – Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến:  PGS.TS Trần Đình Thắng – Bộ mơn Hóa Thực phẩm – Phó Trưởng khoa – Khoa Hóa, Trường Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn Tôi xin chân thành cám ơn:  PGS.TS Lê Văn Hạc – Bộ mơn Hóa Hữu – Khoa Hóa, Trường Đại học Vinh  PGS.TS Hoàng Văn Lựu – Bộ mơn Hóa Hữu – Khoa Hóa, Trường Đại học Vinh tạo điều kiện thuận lợi, động viên tơi q trình làm luận văn  TS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu vật  TS Trần Huy Thái (Viện Sinh Thái Tài Nguyên Sinh vật, Viện khoa học Công nghệ Việt Nam) giúp định danh mẫu vật Nhân dịp này, xin gởi lời cảm ơn đến Thầy, Cô, Cán Bộ mơn Hóa Hữu cơ, Khoa Hóa, Khoa Đào tạo Sau Đại học, bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Vinh, ngày 30 tháng 10 năm 2015 Lê Quang Hóa MỤC LỤC MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài 2 Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Phƣơng pháp nghiên cứu 2 Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Họ Nấm Lỗ (Polyporaceae) 1.1.1 Đặc điểm thực vật phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.2.1 Terpenoit 1.1.2.1.1 Lanostanes triterpenoit dẫn xuất 4 1.1.2.1.2 Sesquiterpenoit diterpenoit 16 1.1.2.2 Các sterol 1.1.2.3 Các hợp chất khác 1.1.3 Hoạt tính sinh học 1.1.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào 1.1.3.2 Hoạt tính ức chế 1.2 Chi Hexagonia 1.2.1 Đặc điểm 1.2.2 Thành phần hóa học 18 25 25 26 26 26 26 27 1.2.3 Hoạt tính sinh học 1.3 Nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) 1.3.1 Phân loại 1.3.2 Đặc điểm 1.3.3 Thành phần hóa học hoạt tính sinh học Chƣơng PHƢƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 2.1 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.1.1 Phƣơng pháp lấy mẫu 28 28 28 29 30 31 31 2.1.2 Phƣơng pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất 31 2.1.3 Phƣơng pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 2.2 Hoá chất, dụng cụ thiết bị 31 31 2.2.1 Hoá chất 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 31 32 2.3 Nghiên cứu hợp chất 2.3.1 Phân lập hợp chất 2.3.2 Hằng số vật lý 32 32 33 2.3.2.1 Hơp chất A 33 2.3.2.2 Hơp chất B 34 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) 3.1.1 Phân lập hợp chất từ lồi nấm tổ ong lơng thơ (Hexagonia apiaria) 3.1.2 Xác định cấu trúc từ lồi nấm tổ ong lơng thô (Hexagonia apiaria) 3.1.2.4 Hợp chất HAM4 (Hexagonin D) 3.1.2.8 Hợp chất HAM (Axit ursolic) KẾT LUẬN 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 Tiếng Việt 36 36 36 36 42 57 Tiếng Anh 57 DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 3.1 Các hợp chất tách từ nấm tổ ong lông thô 36 Bảng 3.2 (Hexagonia apiria) Số liệu phổ NMR hợp chất HAM 37 Bảng 3.3 Số liệu phổ 1H, 13 C-NMR, DEPT HMBC hợp 43 chất HAM DANH SÁCH SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1 Phân lập hợp chất nấm tổ ong lông thô 35 (Hexagonia Apiaria) Perf.) Ảnh bề mặt thể nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1.1 Ảnh bề mặt thể nấm tổ ong lông thô 29 (Hexagonia Apiaria) Perf.) Hình 3.1 Phổ hồng ngoại (IR) hợp chất hexagonin D 39 Hình 3.2 Phổ 1H-NMR hợp chất hexagonin D 39 Hình 3.3 Phổ DEPT hợp chất hexagonin D 40 Hình 3.4 Phổ HSQC hợp chất hexagonin D 40 Hình 3.5 Phổ HMBC hợp chất hexagonin D 41 Hình 3.6 Phổ COSY hợp chất hexagonin D 41 Hình 3.7 Phổ NOESY hợp chất hexagonin D 42 Hình 3.8 Phổ 1H-NMR hợp chất axit ursolic 45 Hình 3.9 Phổ 1H-NMR hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 45 Hình 3.10 Phổ 1H-NMR hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 46 Hình 3.11 Phổ 13C-NMR hợp chất axit ursolic 46 Hình 3.12 Phổ 13C-NMR hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 47 Hình 3.13 Phổ 13C-NMR hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 47 Hình 3.14 Phổ DEPT hợp chất axit ursolic 48 Hình 3.15 Phổ DEPT hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 48 Hình 3.16 Phổ HMBC hợp chất axit ursolic 49 Hình 3.17 Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 50 Hình 3.18 Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 51 Hình 3.19 Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 52 Hình 3.20 Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 53 Hình 3.21 Phổ HSQC hợp chất axit ursolic 54 Hình 3.22 Phổ HSQC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 55 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT CC: Column Chromatography (Sắc ký cột) FC: Flash Chromatography (Sắc ký cột nhanh) TLC: Thin Layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) IR: Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại) MS: Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng) EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối va chạm electron) ESI-MS: Electron Spray Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng phun mù electron) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet ti t: triplet d: dublet dd: dublet duplet dt: dublet triplet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Hiện nay, nấm cơng nhận giới riêng biệt, khác biệt hẳn với thực vật hay động vật, chúng tách xuất xấp xỉ tỷ năm trước [5], tạo thành giới riêng biệt hành tinh Nấm phân bố toàn giới phát triển nhiều dạng môi trường sống khác nhau, đa phần nấm sống cạn, số loài lại tìm thấy mơi trường nước Dựa theo theo tỉ lệ số loài nấm với số lồi thực vật mơi trường, người ta ước tính giới Nấm có khoảng 1,5 triệu lồi [6] Tuy nhiên có khoảng 80000 lồi nấm nhà phân loại học phát định danh Giới Nấm ngày có ý nghĩa to lớn kinh tế quốc dân, khoa học vịng tuần hồn vật chất Giới nấm nói chung nấm nói riêng có ý nghĩa quan trọng đời sống người, chúng nguồn thực phẩm giàu chất dinh dưỡng, nguồn thức ăn quý nhân dân ưa chuộng, chứa nhiều protein, chất khoáng vitamin (A, B, C, D, E ) [2,3] Nhiều lồi nấm ứng dụng cơng nghiệp dược phẩm, nguồn nguyên liệu để điều chế hoạt chất điều trị bệnh Những loại nấm nấm hương, nấm linh chi tập trung nghiên cứu khả chống ung thư, chống virus tăng cường hệ miễn dịch chúng Ở Việt Nam, từ lâu nhân dân biết dùng nấm làm thực phẩm dược phẩm Việc nghiên cứu nấm bắt đầu vào năm 1954 Đại học Tổng hợp Hà Nội mơ tả 28 lồi nấm ăn 10 loài nấm độc Và Việt Nam có nhiều cơng trình nghiên cứu nấm có nhiều lồi mơ tả, có số cơng trình nghiên cứu ứng dụng nấm làm dược liệu Chi Hexagonia lồi nấm q, cịn phổ biến chưa nghiên cứu sâu, giới có hai cơng trình nghiên cứu từ Hexagonia speciosa Chúng có hoạt tính sinh học cao, có khả ngăn chặn số dịng ung thư Lồi Hexagonia apiaria loại nấm dược liệu có giá trị cao tài nguyên thiên nhiên quý Kỹ thuật trồng Hexagonia apiaria phát triển nhân tạo nấm đảm thu thành công Tuy nhiên Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học giá trị sử dụng y học chi Chính chúng tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học nấm tổ ong lơng thơ (Hexagonia apiaria) Perf.) Việt Nam” từ góp phần xác định thành phần hoá học hợp chất tìm nguồn ngun liệu cho ngành hố dược Mục đích nghiên cứu Đề tài tập trung đánh giá tiềm thành phần hóa học lồi nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) bao gồm thu mẫu thực vật, chụp ảnh, tạo tiêu bản, tạo dịch chiết metanol, tách chiết phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập được, tạo sở liệu khoa học phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng nh m tạo sản phẩm dược phẩm phục vụ sống Nhiệm vụ nghiên cứu Trong đề tài này, chúng tơi có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung mơi thích hợp để thu hỗn hợp hợp chất từ nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu thể loài nấm nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf.) thuộc chi nấm Hexagonia Phƣơng pháp nghiên cứu - Thu mẫu xác định tên khoa học - Chiết với dung mơi có độ phân cực khác hexan, etyl axetat, butanol… - Sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký sắc ký cột thường (CC) sử dụng silicagel cỡ hạt 230-400/mesh Sắc ký lớp mỏng (TLC) phân tích tiến hành mỏng kính silicagel Merck 60 F254 tráng sẵn, độ dày 0,2 mm, phương pháp kết tinh phân đoạn - Cấu trúc hoá học hợp chất phân lập xác định b ng phương pháp vật lý đại phổ tử ngoại (UV), phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1D NMR) hai chiều (2D NMR) với kỹ thuật khác 1H-NMR, 13CNMR, DEPT, 1H-1H COSY, HSQC HMBC sử dụng - Cấu trúc lập thể tương đối tuyệt đối hợp chất xác định b ng phản ứng hoá học phương pháp phổ NMR với kỹ thuật NOE, NOESY 10 Hình 3.14: Phổ DEPT hợp chất axit ursolic Hình 3.15: Phổ DEPT hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 56 Hình 3.16: Phổ HMBC hợp chất axit ursolic 57 Hình 3.17: Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 58 Hình 3.18: Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 59 Hình 3.19: Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 60 Hình 3.20: Phổ HMBC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 61 Hình 3.21: Phổ HSQC hợp chất axit ursolic 62 Hình 3.22: Phổ HSQC hợp chất axit ursolic (phổ dãn) 63 KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hóa học nấm lỗ lơng thô (H apiaria (Pers.)) Việt Nam thu số kết sau: - Quả thể nấm lỗ (H apiaria (Pers.)) (8,6 kg) phơi khô, nghiền nhỏ, ngâm chiết lần b ng dung mơi methanol (10 L x 3) nhiệt độ phịng, thu dich chiết cất giảm áp suất b ng thiết bị quay cất chân không thu cao metanol thơ màu nâu (180 g) Cao thơ đươc hịa tan nước chiết phân bố với dung môi clorofom, chưng cất chân không thu hai phần: dịch chiết clorofom gồm chất tan dung môi clorofom (105 g) dịch chiết nước gồm chất tan nước (75 g) - Phân lập hợp chất từ cao metanol b ng phư¬ơng pháp sắc ký kết tinh phân đoạn thu chất A, B - Đã tiến hành sử dụng phương pháp phổ đại: phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1HNMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY) để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ cho phép khẳng định chất A đặt tên Hexagonin D, chất B có tên Axit ursolic 64 10 11 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trịnh Tam Kiệt, (1981), Nấm lớn Việt Nam Tập I, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội Ngô Anh (2003), Nghiên cứu thành phần loài nấm Thừa Thiên Huế, Luận án Tiến sĩ khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Đỗ Huy Bích, Nguyễn Tập, Phạm Văn Hiển, Trần Tồn, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Kim Mãn, Nguyễn Thượng Dong, Đoàn Thị Nhu, Phạm Duy Mai, Đỗ Trung Đàm, Bùi Xuân Chương, Đặng Quang Chung (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam – Tập II, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Lê Bá Dũng, (2001), Thành phần loài chi Hexagonia Fr vùng tây nguyên, Tạp chí Sinh học, 23(3) 19 – 21 Tiếng Anh Kiet T T (1998), Preliminary checklist of macrofungi of Vietnam, Feddes Repertorium, 109 (3 - 4) pp 257- 277 Kirk P M., Cannon P.F., Minter D.W., Stalpers J A, (2001), Dictionary of the fungi, 9th Edition, Ainsworth & Bisby’s Akiko Y, Shinsaku N, (1975), Distribution of tetracyclic triterpenoids of lanostane group and sterols in the higher fungi especially of the polypraceae and related families, Phytochemistry, 14, pp 487 – 497 Dilani D D S, Sylvie R, Enge S, Marc S, Jianchu X., S Aisyah A, Kevin D H, (2013), Bioactive metabolites from macrofungi: ethnopharmacology, biological activities and chemistry, Fungal Diversity, 62, – 40 Tai T., Akahori A., Shingu T., (1991), Triterpenoids from Poria cocos, Phytochemrstry, 30(8) pp 2796 – 2797 Tai T., Akahori A., Shingu T., (1992), A lanostane triterpenoids from Poria cocos, Phytochemistry, 31(7) pp 2548-2549 Tai T., Shingu T., Kikuchi T., Tezuka Y., Akahori A., (1995), Triterpenes from the surface layer of Poria cocos, Phytochemistry, 39(5) pp 1165 – 65 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 1169 Kaminaga T., Yasukawa K., Kanno H., Tai T., Nunoura Y.,Takido M., (1996), Inhibitory effects of lanostane- type triterpen acids, the components of Poria cocos, on tumor promotion by 12-O-tetradecanoylphorbol-13acetate in two-stage carcinogenesis in mouse skin, Oncology, 53, 382 -385 Nukaya H., Yamashiro H., Fukazawa H., Ishida H., Tsuji K., (1996), Isolation of inhibitors of TPA-induced mouse ear edema from Poria cocos, Chem Pharm Bull., 44(4) 847-849 Kawagishi H., Li H., Tanno O., Inoue S., Ikeda S., Kameyama M O., Nagata T., (1997), A lanostane-type triterpene from a mushroom Daedalea dickinsii, Phytochemistry, 46(5) 959 – 961 Rösecke J., König W A., (1999), Steroids from the fungus Fomitopsis pinicola, Phytochemistry, 52 1621 – 1627 Bae K G., Tae J M, (2000), The structure and antibiotic activities of hydroxy acid of lanostenol compound in Daedalea dickinsii, Bull Korean Chem Soc., 21(12) 1199-1201 Ukiya T., Akihisa T., Tokuda H., Hirano M., Oshikubo M., Nobukuni Y., Kimura Y., Tai T., Kondo S., Nishino H., (2002), Inhibition of tumorpromoting effects by poricoic acids G and H and other lanostane-type triterpenes and cytotoxic activity of poricoic acids A and G from Poria cocos, J Nat Prod., 65 462-465 León F., Quintana J., Riverta A., Estévez F., Bermejo J., (2004), Lanostanoids from Laetiporus sulphureus, Nat Prod 67(12): 2008-2011 Yoshikawa K., Kouso K., Takahashi J., Matsuda A.,Okazoe M., Umeyama A., Arihara, (2005), Cytotoxic constituents of the fruit body of Daedalea dickisii, J Nat Prod., 68 911 -914 Akihisa T., Nakamura Y., Tokuda H., Uchiyama E., Suzuki T., Kimura Y., Uchikura K., Nishino H., (2007), Triterpene acids from Poria cocos and their anti-tumor-promoting effects, J Nat Prod.,70 948 -953 Akihisa T., Uchiyama E., Kikuchi T., Tokuda H., Suzuki T., Kimura Y., (2009), Anti-tumor-promoting effects of 25-methoxyporicoic acid A and other triterpene acids from Poria cocos, J Nat Prod., 72 1786–1792 Zheng Y., Yang X W, (2008), Poriacosones A and B: two new lanostane triterpenoids from Poria cocos, J Asian Nat Prod Res., 10(7) 640–646 66 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 Zhou L., Zhang Y., Gapter L A., Ling H., Agarwal R., Ng K., (2008), Cytotoxic and anti-oxidant activities of lanostane-type triterpenes isolated from Poria cocos, Chem Pharm Bull., 56(10) 1459-1462 Yeh C T., Rao Y K., Yao C J., Yeh C F., Li C H., Chuang S E., Luong J H T., Lai G M., Tzeng Y M., (2009), Cytotoxic triterpenes from Antrodia camphorata and their mode of action in HT-29 human colon cancer cells, Food Chem Toxicol., 46 2680 -2688 Lin H C., Song Y Y., Huang Y C., Chang W L., (2010), A 4,5secolanostane triterpenoid from the sclerotium of Poria cocos, J Med Sci., 30(6) 237-240 Kikuchi T., Uchiyama M., Ukiya M., Tabata K., Kimura Y., Suzuki T., Akihisa T., (2011), Cytotoxic and apoptosis-inducing activities of triterpene acids from Poria cocos, J Nat Prod., 74(2) 137 – 44 She G., Zhu N., Wang S., Liu Y., Ba Y., Sun C., Shi R., (2012), New lanostane-type triterpene acids from Wolfiporia extensa, Chem Central J., 6(39) 1-5 Cheng M C., Wang Y., Cherng I H., Chiang H C., (1995), A secquiterpene lactone, phenyl and biphenyl compounds from Antrodia camphorata, phytochemistry, 39(3) pp 613 – 616 Li G., Xu M L., Lee C S., Woo M H., Chang H W., Son J K., (2004), Cytotoxicity and DNA topoisomerases inhibitory activity of constituents from the sclerotium of Poria cocos, Arch Pharm Res., 27(8) 829 – 833 Chen C C., Shiao Y J., Lin R D., Shao Y Y., Lin C C., Lai M N., Ng L T., Kuo Y H., (2006), Neuroprotective diterpenes from the fruiting body of Antrodia camphorata, J Nat Prod., 69, 689 – 691 Liu D Z., Wang F., Yang L M., Zheng Y T., Liu J K., (2007), A new cadimane sesquiterpene with significant anti – HlV – – activity from the cultures of the Basidiomycete Tyromyces chioneus, J Antibiot., 60 (5) 332 – 334 Otaka J., Araya H., (2013), Two new isodrimene sesquiterpenes from the fungal culture broth of Polyporus arcularius, Phytochem Lett., 598– 601 Wang S., Li Z H., Dong Z J., Liu J K., Feng T., (2013), Norbisabolane and eremophilane sesquiterpenoids from cultures of the 67 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 basidiomycete Polyporus ellisii, Fitoterapia, 91, 194 –198 Ohsawa T., Yukawa M., Takao C., Murayama M., Bando H., (1992), Studies on constituents of fruit body of Polyporus umbellatus and their cytotoxic activity, Chem Pharm Bull., 40(1) 143 – 147 Cherng I H., Chiang H C., (1995), Three new triterpenoids from Antrodia cinnamomea, J Nat Prod., 58(3) pp 365 – 371 Keller A C., Maillard M P., Hostettmann K., (1996), Antimicrobial steroids from the fungus Fomitopsis pinicola, Phytochemistry, 41(4) 1041-1046 Lee W Y., Park Y., Ahn J K., Park S Y., Lee H J., (2005), Cytotoxic activity of ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-onemfrom the Sclerotia of Polyporus umbellatus, Bull Korean Chem Soc., 26(9) 1464 – 1466 Zhou W W., Lin W H., Guo S X., (2007), Two new polyporusterones isolated from the sclerotia of Polyporus umbellatus, Chem Pharm Bull 55(8) 1148-1150 Sun Y., Yasukawa K., (2008), New anti-inflammatory ergostane-type ecdysteroid from the sclerotium of Polyporus umbellatus, Bioorg Med Chem Lett., 18 3417–3420 Male K B., Rao Y K., Tzeng Y M., Montes J., Kamen A., Luong J H T., (2008), Probing inhibitory effects of Antrodia camphorata isolates using insect cell-based impedance spectroscopy: inhibition vs chemical structure, Chem Res Toxicol., 21 2127–2133 Zhao Y Y., Chao X., Zhang Y., Lin R C., Sun W J, (2010), Cytotoxic steroids from Polyporus umbellatus, Planta Med., 76 1755 – 1758 Lee H S., Hwang I H., Kim J A., Choi J Y., Jang T S., Osada H., Ahn J S., Na M., Lee S H., (2011), Isolation of protein tyrosine phosphatase 1B inhibitory constituents from the sclerotia of Polyporus umbellatus Fries, Bull Korean Chem Soc., 32(2) 697 – 700 Wang S., Zhang L., Liu L Y., Dong Z J., Li Z H., Liu J K., (2012), Six novel steroids from culture of basidiomycete Polyporus ellisii, Nat Prod Bioprospect., 240–244 Fangkrathok N., Sripandkulchai B., Umehara K., Noguchi H., (2013), Bioactive ergosta noids and a new polyhyd roxyoctane from Lentinus 68 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 polychrous mycelia and their inhibitory effects on E2-enhanced cell proliferation of T47D cells, Nat Prod Res., 27(18) 1611–1619 Huang Y., Lin X., Qiao X., Ji S., Liu K., Yeh C T., Tzeng Y M., Guo D., Ye M., (2014), Antcamphins A-L, Ergostanoids from Antrodia camphorata, J Nat Prod., 77 118−124 Keh F H, Wed M H, (2001), Phenyl compounds from Antrodia cinnamomea, Chin Pharma J., 53 327 – 331 Huang R L., Huang Q., Chen C F., Chang T T., Chou C J., (2003), Antiviral effects of active compounds from Antrodia cinnamomea on wild-type and lamivudine-resistant mutant, Chin Pharma J., 55 371 – 379 León F., Brouard I., Rivera A., Torres F., Rubio S., Quintana J., Estévez F., Bermejo, (2006), Isolation, structure elucidation, total synthesis, and evaluation of new natural and synthetic ceramides on human SK-MEL-1 melanoma cells, J Med Chem., 49, 5830-5839 Hattori M., Sheu C C., Hsiang K S., (2006), Compounds from Antrodia camphorata having anti-inflammatory and anti-tumor activity, United States Patent, – 13 Lee T H., Lee C K., Tsou W L., Liu S Y., Kuo M T., Wen W C., (2007), A new cytotoxic agent from solid-state fermented mycelium of Antrodia camphorata, Planta Med, 73, 1412-1415 Wu M D., Cheng M J., Wang B C., Yech Y J., Lai J T., Kuo Y H., Yuan G F., Chen I S., (2008), Maleimide and maleic anhydride derivatives from the mycelia of Antrodia cinnamomea and their nitric oxide inhibitory activities in macrophages, J Nat Prod., 71, 1258–1261 Chien S C., Chen M L., Kuo H T., Tsai Y C., Lin B F., Kuo Y H., (2008), Anti-inflammatory activities of new succinic and maleic derivatives from the fruiting body of Antrodia camphorata, Food Chem., 56, 7017–7022 Yang S S., Wang G J., Wang S Y., Lin Y Y., Kuo Y H., Lee T H., (2009), New constituents with INOS inhibitory activity from mycelium of Antrodia camphorata, Planta Med., 75, 512– 516 Isaka M., Sappan M., Rachtawee P., Boonopratuang T., (2011), A tetrahydrobenzofuran derivative from the fermentation broth of Lentinus squarrosulus BCC 22366, Phytochem Letters, 4, 106–108 69 55 56 57 58 59 Chen Y C., Chiu H L., Chao C Y., Lin W H., Chao L K., Huang G J., Kuo Y H., (2013), New Anti-inflammatory aromatic components from Antrodia camphorata, Int J Mol Sci., 14, 4629 – 4639 Ríos J L., Andújar I., Recio M C., Giner R M., (2012), Lanostanoids from fungi: A group of potential anticancer compounds, J Nat Prod., 75, 2016−2044 Jiang M Y., Zhang L., Liu R., Dong Z J., Liu J K., (2009), Speciosins A-K, oxygenated cyclohexanoids from the basidiomycete Hexagonia speciosa, J Nat Prod., 72, 1405–1409 Jiang M Y., Li Y., Wang F., Liu J K, (2011), Isoprenylated cyclohexanoids from the basidiomycete Hexagonia speciosa, Phytochemistry, 72, 923–928 Rios J L., (2011), Chemical constituents and pharmacological properties of Poria cocos, Planta Med., 77, 681-691 70 ... chất nấm tổ ong lông thô 35 (Hexagonia Apiaria) Perf .) Ảnh bề mặt thể nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf .) DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1.1 Ảnh bề mặt thể nấm tổ ong lông thô 29 (Hexagonia. .. hợp(1g) chất nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf .) 43 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) 3.1.1 Phân lập hợp chất từ loài nấm tổ ong lông thô (Hexagonia. .. nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf .) - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ nấm tổ ong lông thô (Hexagonia Apiaria) Perf .) Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu