Bài giảng Sinh học nâng cao

Chương 1. Cơ chế biểu hiện gen trong thực vật 1. Khái niệm cơ bản Sự đa dạng vĩ đại và chức năng tuyệt vời của thực vật Quá trình tích lũy đặc thù vị trí của những protein đặc thù phản ảnh quá trình điều hòa. Quá trình tổng hợp, vận chuyển và tan dã các phân tử protein và RNA được điều hòa rất nghiêm ngặt. Điều hòa theo cả 2 cơ chế là phản ứng tăng cường và ức chế Các yếu tố promoter, enhancer, silencer, các yếu tố phiên mã và các yếu tố gây biến đổi nhiễm sắc đóng vai trò làm tăng cường hay ức chế phiên mã gen. Cơ chế điều hòa gen có liên quan đến phản ứng với auxin Cắt nối thay thế nhau các tiền phiên mã có liên quan đến điều hòa biểu hiện gen. Điều hòa thông qua quá trình dịch mã tạo protein và vận chuyển protein. Thiết kế promoter và các yếu tố phiên mã sử dụng trong công nghệ sinh học nhằm điều hòa hoạt động của gen. Kiểu hình là kết quả tương tác giữa kiểu gen với các yếu tố môi trường bên trong và ngoài cơ thể, trong đó kiểu gen đóng vai trò quyết định, môi trường đóng vai trò quan trọng. Sự thành công của cây trồng được đánh giá thông qua một số thông số: + Thông qua khả năng sinh sản, sinh ra được nhiều con cháu, hệ số nhân cao. + Các con cháu lại có khả năng sống sót và tồn tại rồi phát triển tốt, tỷ lệ sống sót cao. + Rồi các con cháu này lại tiếp tục tồn tại và sống sót cao và cứ như vậy. Khả năng thành công của thực vật đòi hỏi khả năng thích ứng của sinh vật đó với các điều kiện môi trường khác nhau và luôn thay đổi từ khi hạt nẩy mầm đến khi cây có khả năng sinh sản tạo ra hạt mới và phát tán đi. Hầu hết các chức năng của thưc vật đều được thực hiện thông qua hoạt động của các protein. Biểu hiện của gen được phản ảnh thông qua quá trình sinh ra những protein đặc thù và sự điều khiển chúng thông qua các khía cạnh là chúng được sinh ra ở đâu, khi nào sinh ra và sinh ra được bao nhiêu. 2. Sự đa dạng vĩ đại và chức năng tuyệt vời của thực vật Cây Sequoiadendron giganticus trưởng thành có kích thước 2.5 x 1011 lớn hơn hạt của nó. Một chồi măng có thể sinh trưởng tới 1 m 1 ngày. Khả năng thoát hơi nước, một cây ngô trong chu kỳ sống có thể thoát hơi nước hết 200 lít. Sinh sản bao gồm quá trình ra hoa, kết hạt, hình thành quả và sự chín của hạt. Đặc tính phẩn quang của cây bao gồm tính hướng và phản ứng quang chu kỳ. Thực vật có khả năng chống lại sâu bệnh và sự xâm thực bởi các thực vật khác. Thực vật có khả năng chống chịu lại các điều kiện vô sinh bất thuận như hạn, nhiệt độ quá thái và các điều kiện về đất. Hiện tượng cây Crocus nẩy chồi chui lên từ lớp tuyết sâu, cây nắp ấm thuộc họ ly tiết ra các chất bay hơi nhằm hấp dẫn các loại ruồi nhặng đến để ăn thịt, tiêu hóa côn trùng để lấy phospho và đạm. 3. Cơ chế điều khiển biểu hiện gen Dòng thông tin di truyền từ gen (DNA) phiên mã tạo thành RNA dịch mã thành Protein, các protein này sau đó biến đổi sau dịch mã để đi vào ty thể, nạp thể, các cơ quan tử khác hay xuất ra ngoài tế bào. Tất cả các quá trình đó đều được điều khiển tăng cường, ức chế hay bị phân rã ở các mức độ bao nhiêu, khi nào và ở đâu. 3.1. Nhiễm sắc chất và quá trình điều hòa phiên mã DNA nằm trong nhiễm sắc thể, cấu trúc với protein histone tạo thành các nucleosome (146 bp quấn quanh 8 phân tử protein histone) và solenoid. Trình tự DNA nào nằm trong các cấu trúc này thường khó hoạt động và không phiên mã. Thí nghiệm chứng minh rằng, những vùng genome nào sẵn sàng phiên mã thường có đặc tính mẫn cảm với các enzyme deoxyribonuclease, các

Chương Cơ chế biểu gen thực vật Khái niệm - Sự đa dạng vĩ đại chức tuyệt vời thực vật - Q trình tích lũy đặc thù vị trí protein đặc thù phản ảnh q trình điều hịa - Quá trình tổng hợp, vận chuyển tan dã phân tử protein RNA điều hòa nghiêm ngặt - Điều hòa theo chế phản ứng tăng cường ức chế - Các yếu tố promoter, enhancer, silencer, yếu tố phiên mã yếu tố gây biến đổi nhiễm sắc đóng vai trò làm tăng cường hay ức chế phiên mã gen - Cơ chế điều hịa gen có liên quan đến phản ứng với auxin - Cắt nối thay tiền phiên mã có liên quan đến điều hịa biểu gen - Điều hịa thơng qua q trình dịch mã tạo protein vận chuyển protein - Thiết kế promoter yếu tố phiên mã sử dụng cơng nghệ sinh học nhằm điều hịa hoạt động gen - Kiểu hình kết tương tác kiểu gen với yếu tố môi trường bên ngồi thể, kiểu gen đóng vai trị định, mơi trường đóng vai trị quan trọng - Sự thành công trồng đánh giá thông qua số thông số: + Thông qua khả sinh sản, sinh nhiều cháu, hệ số nhân cao + Các cháu lại có khả sống sót tồn phát triển tốt, tỷ lệ sống sót cao + Rồi cháu lại tiếp tục tồn sống sót cao - Khả thành cơng thực vật địi hỏi khả thích ứng sinh vật với điều kiện mơi trường khác thay đổi từ hạt nẩy mầm đến có khả sinh sản tạo hạt phát tán - Hầu hết chức thưc vật thực thông qua hoạt động protein - Biểu gen phản ảnh thơng qua q trình sinh protein đặc thù điều khiển chúng thơng qua khía cạnh chúng sinh đâu, sinh sinh Sự đa dạng vĩ đại chức tuyệt vời thực vật - Cây Sequoiadendron giganticus trưởng thành có kích thước 2.5 x 1011 lớn hạt - Một chồi măng sinh trưởng tới m/ ngày - Khả thoát nước, ngơ chu kỳ sống nước hết 200 lít - Sinh sản bao gồm trình hoa, kết hạt, hình thành chín hạt - Đặc tính phẩn quang bao gồm tính hướng phản ứng quang chu kỳ - Thực vật có khả chống lại sâu bệnh xâm thực thực vật khác - Thực vật có khả chống chịu lại điều kiện vô sinh bất thuận hạn, nhiệt độ thái điều kiện đất - Hiện tượng Crocus nẩy chồi chui lên từ lớp tuyết sâu, nắp ấm thuộc họ ly tiết chất bay nhằm hấp dẫn loại ruồi nhặng đến để ăn thịt, tiêu hóa trùng để lấy phospho đạm Cơ chế điều khiển biểu gen Dịng thơng tin di truyền từ gen (DNA) phiên mã tạo thành RNA dịch mã thành Protein, protein sau biến đổi sau dịch mã để vào ty thể, nạp thể, quan tử khác hay xuất tế bào Tất q trình điều khiển tăng cường, ức chế hay bị phân rã mức độ bao nhiêu, đâu 3.1 Nhiễm sắc chất q trình điều hịa phiên mã - DNA nằm nhiễm sắc thể, cấu trúc với protein histone tạo thành nucleosome (146 bp quấn quanh phân tử protein histone) solenoid Trình tự DNA nằm cấu trúc thường khó hoạt động khơng phiên mã - Thí nghiệm chứng minh rằng, vùng genome sẵn sàng phiên mã thường có đặc tính mẫn cảm với enzyme deoxyribonuclease, enzyme có tác dụng làm lỏng lẻo cấu trúc nhiễm sắc - Nếu acetyl protein histone vùng đuôi amino acid, có ảnh hưởng đến q trính bám gắn protein với DNA DNA nhân cởi nút làm tăng cường trình phiên mã vùng DNA lân cận - Phiên mã gen có liên quan mật thiết đến cấu trúc gen, đặc biệt vùng promoter, hộp CAAT TATA (-25 - -30), số gen trình tự 5UTR 3UTR intron trí vùng mã hóa tham gia vào thành phần promoter Hình Sơ đồ gen eukaryote điển hình - Hoạt động enzyme RNA polymerase II chịu tác động tham gia nhiều yếu tố phiên mã TF đặc thù khác Sơ đồ bước tác động theo thứ tự DNA + TFIID, TFIIB, TFIIA, RNA Pol II, TRIIE TFIIH Chương 16 KIỂM TRA DI TRUYỀN PHẢN ỨNG MIỄN DỊCH - Khi chất ngoại lai mang đặc tính kháng nguyên (antigen, thí dụ protein vỏ virus) đưa vào máu động vật có vú chúng kích thích tạo chế bảo vệ hay phản ứng miễn dịch, kết tổng hợp nên nhóm protein cực quan trọng gọi kháng thể (antibody) - Mỗi kháng thể có kháng nguyên tương ứng đặc hiệu Các kháng thể bọc đặc thù lấy kháng nguyên tương ứng sau tạo điều kiện thuận lợi để đưa chúng qua máu khỏi thể - Các nhà khoa học khám phá có số trình tự DNA mã hóa khối lượng khổng lồ kháng thể hệ thống miễn dịch động vật có vú Các trình tự DNA lắp ghép trình phân hóa tế bào sản sinh kháng thể cách xẩy kiện xếp lại genome (genome rearrangements) Thành phần hệ thống miễn dịch - Tế bào bạch cầu máu động vật đóng vai trị trung tâm phản ứng miễn dịch động vật có xương sống - Có ba loại tế bào bạch cầu khác đảm nhiệm phản ứng miễn dịch là: + Tế bào lympho B (lymphocyte B) gọi tắt tế bào B sinh tế bào tủy sống động vật có xương sống + Tế bào lympho T (lymphocyte T) gọi tắt tế bào T sinh từ tuyến giáp trạng (thymus gland) + Tế bào đại thực bào (macrophage) - Hình 16.1 mơ tả sơ đồ thành phần hệ thống miễn dịch động vật có xương sống - Kháng thể tổng hợp tế bào B, tiết tế bào nằm bề mặt màng tế bào B tùy theo số điều kiện định - Trong trình phản ứng miễn dịch thể dịch (humoral immune response) kháng thể sinh từ tế bào B tế bào bọc đặc thù lấy kháng nguyên nằm tự máu kết dính (agglutination) chúng lại - Phức hợp kháng thể với kháng nguyên sau đại thực bào nuốt vào bên bị phân rã (hình 16.1 trái) - Tế bào T làm môi trường trung gian cho trình phản ứng miễn dịch tế bào Tế bào T tổng hợp nên chất tiếp nhận (protein thụ cảm) với kháng nguyên, chất tiếp nhận nhận biết kháng nguyên nằm bề mặt màng tế bào T có tác dụng kích hoạt q trình phân rã tế bào có chứa kháng nguyên, tế bào bị nhiễm virut chẳng hạn hình 16.1 (phải) - Các tế bào T khác có biểu chức khác - Tuy nhiên, nhìn chung q trình cơng tế bào T vào tế bào mang kháng nguyên yêu cầu có tham gia chất (protein) tiếp nhận tế bào T đặc thù (specific T cell receptor) với chất (proteins) tiếp nhận kháng nguyên tương hợp (histocompatibility antigen receptor) - Cơ chế mối tương tác chất tiếp nhận tế bào T đặc thù với chất tiếp nhận kháng nguyên tương hợp mô tả phần Nguồn sinh kháng thể khổng lồ - Có đa dạng vơ tận kháng thể tổng hợp gặp kháng nguyên thể động vật mà trước chúng chưa gặp - Làm thể động vật tổng hợp kháng thể định để bọc đặc thù kháng nguyên đặc thù mà trước chưa biết đối mặt với kháng nguyên - Làm thể có đầy đủ thơng tin di truyền để mã hóa cho trình tự amino acid đa dạng vô tận kháng thể - Chúng ta khơng thể biết có kháng thể mà đời người hay chuột tạo ra, biết số lớn, tính hàng triệu - Chắc chắn tất gen thể người có genome chứa 3,2 tỷ bp sinh kháng thể a/ Các giả giả thuyết khả tạo tính đa dạng kháng thể Hiện có giả thuyết đưa giải thích tượng này: + Thuyết dịng mầm (germ line) cho có gen dịng mầm tách biệt kháng thể Thuyết khía cạnh tổng hợp protein lại phi lý khơng có đủ DNA để đảm nhận chức + Thuyết đột biến Soma cho có một vài gen dòng mầm đặc thù cho lớp kháng thể chủ yếu tính đa dạng sinh tần số cao đột biến soma Là đột biến xảy tế bào soma sản sinh kháng thể xẩy tế bào mầm sinh tế bào tạo kháng thể Tuy nhiên, chưa có phát cho thấy có tần suất đột biến cao xẩy gen định loại tế bào định Tuy nhiên, chế q trình xẩy làm q trình điều khiển khơng rõ + Thuyết gen nhỏ (minigene) cho đa dạng kháng thể thay đổi nhiều đoạn nhỏ vài gen tạo thành vơ số tổ hợp Sự xếp lại xẩy trình tái tổ hợp tế bào soma Quá trình địi hỏi chế hồn tồn khác biệt việc xếp lại đoạn DNA genome - Hiện biết rõ thuyết gene nhỏ giải thích đa dạng kháng thể quan sát thấy Tuy nhiên, đột biến soma đóng góp làm tăng thêm đa dạng kháng thể Hơn nữa, biết rõ có đoạn vùng bảo thủ chuỗi kháng thể đặc thù gen hay đoạn gen, đoạn gen có genome với số copy Bởi tất ba thuyết nêu khía cạnh b/ Cấu trúc kháng thể - Kháng thể thuộc vào lớp protein globulin miễn dịch (immunoglobulin), kháng thể chứa chuỗi polypeptide, hai chuỗi nặng giống hai chuỗi nhẹ giống nhau, chúng gắn với liên kết lưu huỳnh (hình 16.2 thiếu) - Chuỗi nhẹ dài 220 amino acid, chuỗi nặng dài khoảng 440 – 450 amino acid Mỗi chuỗi nặng nhẹ có vùng biến động nằm đầu tận đầu chứa amin trình tự amino acid, vùng thường xuyên thay đổi để kháng thể tạo có tính đặc thù cao cho kháng nguyên khác Vùng bảo thủ nằm đầu carboxyl có trình tự amino acid giống tất kháng thể thuộc lớp Ig định Vùng khơng có liên quan đến tính bọc đặc thù kháng nguyên Vùng biến động tất chuỗi kháng thể dài khoảng 110 amino acid - Vùng protein mang chức đặc thù gọi trung tâm (domain), kháng thể có hai vị trí trung tâm bọc kháng nguyên đặc thù Mỗi trung tâm bọc kháng nguyên đặc thù hình thành vùng biến động, chuỗi nặng chuỗi nhẹ (hình 16.3) - Vùng bảo thủ, hai chuỗi nặng tương tác với để hình thành nên vị trí trung tâm bọc kháng nguyên thứ ba gọi effector (effector function domain), vị trí chịu trách nhiệm giúp kháng thể tương tác cách xác với thành phần khác hệ thống miễn dịch - Có lớp kháng thể tồn là: IgM, IgD, IgG, IgE, IgA, chúng phân chia dựa sở cấu trúc vùng bảo thủ chuỗi nặng hay cấu trúc vùng chức effector Thí dụ kháng thể IgD luôn bám lên bề mặt màng tế bào sinh chúng, cịn kháng thể IgG lại ln ln tiết ngồi, vào máu vòng quanh thể - Chuỗi nhẹ kháng thể có hai loại kappa lamda, chúng xác định dựa sở cấu trúc vùng bảo thủ chuỗi nhẹ - Một số kháng thể có tính đặc thù bọc kháng ngun giống nhau, điều vùng biến động chuỗi tạo nên, lại có chức miễn dịch khác nhau, chức xác định vùng bảo thủ chuỗi nặng định - Bởi thế, kiểm tra cấu trúc kháng thể thấy tính đa dạng chúng thường nằm hầu hết vùng biến động phân tử kháng thể Nếu polypeptide tổng hợp từ trình tự cặp Nu đường thẳng gen, gen sinh polypeptide, genome phải chứa dãy khổng lồ gen có trình tự biến động cao đầu cịn đầu phải có trình tự giống cần thiết - Nhờ kỹ thuật tái tổ hợp DNA tách, xác định trình tự nhiều đoạn DNA nhiễm sắc thể chuột người mã hóa tạo chuỗi kháng thể Kết giải thích chế tạo đa dạng khổng lồ kháng thể thể Sự đa dạng kháng thể xếp lại Genome q trình phân hóa tế bào B a Khái niệm - Rất đơn giản, thơng tin di truyền mã hóa tạo chuỗi kháng thể tàng trữ thành mẩu mảnh, mẩu mảnh nối lại với thành trình tự thích hợp cách xếp lại genome xảy trình phát triển tế bào sinh kháng thể gọi tế bào B thể - Mỗi tế bào B sinh dạng đơn kháng thể tất kháng thể sinh từ tế bào B định có tính đặc thù bọc kháng nguyên - Mỗi chuỗi kháng thể tổng hợp sở sử dụng thông tin di truyền tàng trữ số gen khác đoạn gen Một số nhà di truyền gọi trình tự DNA gen, số khác lại thích gọi chúng đoạn gen, gọi xem b Chuỗi nhẹ kappa (k) - Việc tổng hợp chuỗi nhẹ K kiểm tra đoạn gen khác nhau: 1/ Đoạn gen Vk mã hóa tạo 95 amino acid đầu amin vùng biến động 2/ Đoạn gen Jk (J có nghĩa đoạn kết gắn) mã hóa cho phần cịn lại vùng biến động dài 13 amino acid, nằm cạnh vùng bảo thủ 3/ Đoạn gen Ck mã hóa tạo vùng bảo thủ đầu tận carboxyl - Đoạn gen thứ 4, đoạn L k mã hóa tạo đoạn chứa đầu kỵ nước đầu amin dài 17- 20 amino acid, đoạn cần thiết giúp cho trình vận chuyển chuỗi kháng thể qua màng tế bào Trình tự bị cắt sau kháng thể qua màng tế bào Vì khơng phải thành phần cuối kháng thể - Quá trình xếp đoạn gen chuỗi K xảy dòng tế bào mầm, nhiên thực tế xảy tất tế bào khơng sản sinh kháng thể (hình 16.4) - Ở chuột người đoạn gen tạo chuỗi K thường nằm nhiễm sắc thể, người nhiễm sắc thể số 10 - Tóm lại, sản phẩm gene ung thư protein đóng vai trị trung tâm việc kích thích tế bào phân chia nhiều lần Trong số trường hợp sản phẩm gene bị thay đổi tạo protein đột biến mà kích ngịi giúp tế bào phân chia mà bình thường khơng phân chia điều kiện tồn Một số trường hợp khác, sản phẩm gene ung thư kích thích phân chia tế bào cách bất bình thường cách tạo nhiều tổng hợp số lượng lớn tế bào bình thường VI Gene tiền ung thư gene ung thư tế bào - Nhiều gene có trình tự DNA giống với gene ung thư retrovial mã hóa protein có đặc tính tương tự định danh gene động vật bậc cao bao gồm người cách sử dụng hướng thí nghiệm khác 1/ Hướng thứ có liên quan đến tìm trình tự DNA tế bào lai chéo với gene ung thư virus động vật Hướng thứ có liên quan đến tìm trực tiếp gene gây ung thư genome tế bào ung thư thí nghiệm truyền nhiễm Trong thí nghiệm người ta tách chiết DNA tế bào khối u sau đưa vào tế bào bình thường ni cấy mơ để xem biến đổi tế bào bình thường thành tế bào ung thư khơng? Cả hướng nghiên cứu thành công số trường hợp hai thí nghiệm cho kết giống loại gene ung thư Những gene tương đồng với số gene ung thư virus thường tồn sinh vật nhân chuẩn bậc thấp nấm men Tính tương đồng với gene ung thư virus - Như đề cập phần trên, gene ung thư src lần xác định gene virus gây bướu thịt cá trích (RSV) phân tách từ gà Khi sử dụng enzyme chép ngược đảo ngược gen src virus RSV thành dạng cDNA (hình 13.3) cDNA đánh đấu phóng xạ 32P sử dụng làm mẫu dò thí nghiệm lai DNA (Southern blot) với DNA genome gà bình thường thấy cDNA gene src lai với đoạn cắt đặc thù DNA genome nhiều lần nghiên cứu Điều thực tế không liên quan đến nguồn DNA gà nghiên cứu Hơn 45 trình tự DNA genome tương tự lai với mẫu dị cDNA gene src phát tất động vật có xương sống, chí ruồi giấm - Nhiều nghiên cứu sau cho thấy nguồn DNA genome từ nhiều nguồn tế bào bình thường tất động vật bậc cao chứa trình tự DNA lai với tất trình tự gene ung thư retroviral Trong số trường hợp, trình tự tương đồng với gene ung thư retroviral ras chẳng hạn phát sinh vật nhân chuẩn bậc thấp nấm men - Người ta bắt đầu phán đốn trình tự DNA genome lai với gene ung thư tồn đơn giản provirus kết gắn Tuy nhiên điều chứng tỏ ngoại lệ Thực trình tự tách từ thư viện genome đặc tính hóa chúng thấy gene bình thường cấu trúc khác hẳn so với gene ung thư virus tương đồng Những gene tế bào bình thường có tương đồng với gene ung thư gọi gene tiền ung thư potoencogene Trong số trường hợp, gene tiền ung thư đột biến thành dạng có khả gây ung thư Tức chuyển trạng thái tế bào thành trạng thái khối u giống ung thư Ở trạng thái giống ung thư gọi gene ung thư tế bào, để phân biệt với phần khác virus Điều có nghĩa phải phân biệt rõ gene ung thư virus v-onc, v-src, v-sis v-myc - Điều thú vị số gene giống với gene ung thư tế bào phát cách lai với trình tự gene ung thư virus phát sở khả chúng biến dạng tế bào nuôi cấy thành trạng thái khối u giống khối u nghiên cứu chuyển DNA trực tiếp gọi thí nghiệm truyền nhiễm Thí nghiệm truyền nhiễm (Transfection) - Việc phát gene ung thư tế bào thí nghiệm chuyển nhiễm (transfection) dựa sở khả gene ung thư làm đảo ngược tế bào không ung thư thành trạng thái ung thư Hiện tượng gọi tượng biến nạp tế bào, khác hồn tồn so với q trình gọi biến nạp (transformation) tái tổ hợp xẩy vi khuẩn 46 - Khi tế bào bình thường (nontransformed, không biến nạp) sinh trưởng môi trường nuôi cấy ngừng phân chia chúng tiếp xúc với tế bào bên cạnh, tượng gọi tượng ức chế tiếp xúc (contact inhibition), nhờ chúng hình thành nên lớp đơn tế bào bề mặt bình ni cấy đĩa petri ni chúng Tế bào biến nạp không biểu hiện tương ức chế tiếp xúc này, chúng tiếp tục phân chia tiếp xúc với tế bào bên cạnh hình thành nên nhiều đống tế bào khối u bề mặt bình ni cấy (hình 17.3) - Khi DNA tế bào bình thường sử dụng thí nghiệm truyền nhiễm, kết có phát biến nạp tế bào xẩy Khi DNA tế bào biến nạp sử dụng lần hai thí nghiệm truyền nhiễm phát thấy tần số biến nạp tế bào cao xẩy Tần số cao dùng DNA dòng tế bào biến nạp định so với việc dùng DNA nhân dòng tế bào biến nạp khác Điều chứng tỏ thay đổi di truyền có vai trị trạng thái biến nạp nhóm nhân dịng tế bào đầu, thay đổi bề mặt (noninherited developmental changes, thay đổi q trình phát triển khơng di truyền) chịu trách nhiệm tạo trạng thái biến nạp nhóm dịng tế bào thứ hai - Thí nghiệm truyền nhiễm sử dụng để chúng tỏ diện gen ung thư tế bào dòng tế bào ni cấy có nguồn gốc khác khối u động vật hóa chất gây nên - Hầu hết gen ung thư phát qua thí nghiệm truyền nhiễm phân lập sử dụng kỹ thuật nhân dòng gen tái tổ hợp DNA - Khi gen ung thư phân lập so sánh với gen ung thư retroviruses, nhiều cách khác lai DNA, phân tích enzyme giới hạn giải trình tự DNA, nhiều gen phát có tương đồng với gen ung thư retrovirus Thí dụ gen ung thư c-H-ras nhận diện thơng qua thí nghiệm truyền nhiễm sử dụng DNA tế bào ung thư bàng quang người tương đồng với gen ung thư v-H-ras virus bướu thịt Harvey Gen ung thư tế bào chứa intron, tương đồng virus chứa toàn exon 47 - Gen ung thư virus có nhiều đoạn tương đồng với nhiều trình tự DNA nhiễm sắc thể bình thường Trình tự tương đồng khác so với gen ung thư virus có trình tự ngắt mã giống hầu hết gen nhân chuẩn khác - Gen ung thư tiền ưng thư tế bào thường có nhiều exon xen intron, gen ung thư virus bao gồm toàn exon đơn Gen tiền ung thư tế bào src gà chứa 11 intron xen 12 trình tự mã hóa, gen v-src virus RSV (Rous sarcoma virus, virus bướu thịt Rous) có trình tự mã hóa khơng ngắt qng (hình 17.4) - Gen v-src c-src mã hóa protein kinase xúc tác gắn gốc phosphat vào vị trí tyrosine Hai protein kinase có kích thước cấu trúc giống nhau, hai phản ứng với protein kháng nguyên gen v-src - So sánh trình tự nu gen c-src gà với gen v-src chủng virus RSV, chủng Schmid-Ruppin cho thấy hai gen mã hóa sinh protein giống Protein c-src dài 533 amino acid, protein v-src dài 526 amino acid Phần khác hai protein xẩy đầu cacboxyl, 12 amino acid cuối protein v-src thay 19 amino acid khác hoàn toàn protein c-src Sự khác 18 cặp nu đơn trình tự mã hóa gen v-src c-src dẫn đến làm thay đổi amino acid protein sản phẩm Sự thay đổi amino acid protein v-src chủng virus RSV Schmid-Ruppin khơng có liên quan đến khả sinh ung thư protein v-src khơng thường có gen ung thư virut v-src chủng RSV khác Sự khác chủ yếu gen 11 intron có gen c-src, cịn khơng có intron gen v-src (hình 17.4) - Hiện chưa rõ cách protein kinase gen ung thư virus mã hóa gây nên khối u, nhiên có chế liên quan đến phần lớn enzyme sinh tế bào nhiễm virus Lượng protein kinase tế bào u gà nhiễm virus RSV lượng protein kinase v-src cao 100 lần tế bào gà bình thường Bảo tồn gen tiền ung thư tiến hóa - Sản phẩm gen tiền ung thư đóng vai trị quan trọng q trình sinh trưởng phân chia tế bào nên chúng bảo tồn cao tiến hóa 48 - Gen c-src tìm thấy khơng gà mà cịn nhiều lồi chim khác, động vật có vú, gồm người, cá trí trùng ruồi dấm - Nhiều gen tiền ung thư khác bảo tồn nhiều loài sinh vật khác Tất động vật xương sống có gen tiền ung thư tương đồng với tất gen ung thư liệt kê bảng 17.1 - Ruồi dấm chứa gen tế bào bình thường biểu tương đồng cao với gen ung thư tế bào động vật xương sống khác như: c-abl, c-erbB, c-fps, c-raf, c-ras c-myb, tương đồng với gen c-src Genome ruồi dấm chứa gen tương đồng với src gen tương đồng với ras giống genome động vật xương sống - Gen tiền ưng thư ras tìm thấy tương đồng nấm men saccharomyces cerevisiae, chứng tỏ có nhiều gen tiền ung thư bảo tồn rộng q trình tiến hóa - So sánh trình tự gen tiền ung thư tương đồng loài cho thấy chúng hầu hết chúng bảo tồn cao, trình tự nu khác it 15%, trí so sánh lồi xa nấm men động vật có xương sống trình tự amino acid gen tiền ung thư ras, dự đốn dựa trình tự nu thấy 2/3 vị trí amino acid vùng đầu amin protein giống đến 75% - Vùng bảo thủ cao thực chức có chức tương tự nhiều lồi có gen - Tính bảo tồn gen tiền ung thư nhiều loài xa chứng tỏ sản phẩm chúng có vai trị quan trọng, chọn lọc tự nhiên giữ lại - Mặc dù chưa hiểu hết vai trò sản phẩm gen tiền ung thư tế bào bình thường, rõ ràng chúng có liên quan trực tiếp đến trình phân chia tế bào Sản phẩm gen tiền ung thư chất điều hịa phân bào - Phần giống cấu trúc chức gen tiền ung thư đóng vai trị trung tâm kiểm sốt phân chia tế bào 49 - Gen tiền ung thư chia thành nhóm: 1/ gen mã hóa sinh yếu tố sinh trưởng c-sis chất thụ cảm yếu tố sinh trưởng c-fms c-erbB; 2/ gen mã hóa protein bọc GTP có hoạt tính GTPase c-H-ras, c-K-ras N-ras; 3/các gen protein kinase đặc thù tyrosine c-abl, c-fes, c-fgr, c-fps, c-ros, c-src c-yes tạo protein kinase đặc thù serine/threonine c-mil, c-mos c-raf; 4/ gen mã chất điều hịa phiên mã c-fos, c-fun, c-erbA, c-myc c-myb c-ets - Hầu hết sản phẩm gen tiền ung thư chất điều hòa sinh trưởng chất thụ cảm yếu tố sinh trưởng chất thụ cảm mã hóa gen c-erbB cfms - Cấu trúc sơ khai chất thụ cảm yếu tố sinh trưởng có hoạt tính protein kinase đặc thù tyrosine nội bào trình bầy hình 17.5 - Chức protein gen tiền ung thư có liên quan đến q trình truyền tín hiệu từ bề mặt tế bào vào nhân, chúng bọc lấy yếu tố sinh trưởng vị trí bọc bề mặt ngồi tế bào truyền tín hiệu thơng qua kênh phân phối đến vị trí kinase hóa tyrosine nội bào, làm hoạt hóa enzyme kinase gây q trình phosphoryl hóa số protein nội bào - Hoạt tính vị trí enzyme kinase tyrosine liên quan đến trình tự phosphoryl hóa protein thụ cảm kinase phải trải qua q trình tự phosphoryl hóa lại vị trí tyrosine đặc thù gần đầu COOH protein nội bào - Chất thụ cảm yếu tố sinh trưởng phải trải qua q trình phosphoryl hóa enzyme kinase tế bào khác protein kinase C phải tương tác với yếu tố protein định hướng hoạt động khác Q trình truyền tín hiệu cịn phụ thuộc vào cấu hình chiều phân tử thụ cảm với tất đại phân tử khác mà chúng tương tác - Protein c-src sản phẩm số gen tiền ung thư có hoạt tính protein kinase đặc thù kinase Tuy nhiên, protein kinase protein xuyên màng kết hợp với bề mặt màng nguyên sinh chất Các protein có liên quan đến truyền tín hiệu chưa rõ tín hiệu phản ứng cách tín hiệu truyền qua Nhưng có lẽ phosphoryl hóa protein đích nội bào thức hoạt động sản phẩm gen tiền ung thư 50 Pjun pfos chất hoạt hóa phiên mã gen - Sản phẩm gen tiền ung thư c-jun c-fos giống với protein xác định thành phần phức hợp nhân hoạt hóa trình phiên mã gen đặc thù - Sản phẩm gen c-jun yếu tố phiên mã AP-1 yếu tố nhân cần cho phiên mã kích hoạt hợp chất kích thích tạo u định Yếu tố phiên mã AP-1 (pjun) bọc đặc thù vào yếu tố tăng cường genome virus 40 khỉ gen IIA vượn người - Vị trí bọc DNA AP-1 trình tự lõi TGACTCA Sản phẩm gen tiền ung thư cfos tạo nên phức hợp chặt chẽ với sản phẩm gen c-jun Cả hai protein tiền ung thư giầu leucine có khả hình thành nên vùng xoắn α với chuỗi mang leucine đối diện hình thành nên khóa leucine (leucine zipper) - Mơ hình hoạt động phức hợp sản phẩm protein hai gen c-jun c-fos trình bầy hình 17 hoạt tính điều khiển phiên mã từ xa gen phản ứng phức hợp hai gen cJun c-Fos Nguồn gốc đột biến gen ung thư tế bào ras - Sự tồn gen ung thư tế bào ung thư nhận diện khả gây biến nạp tế bào nuôi cấy thành trạng thái, nhiều dạng tế bào ung thư người thí nghiệm truyền nhiễm phát gen ung thư - Khi gen ung thư từ tế bào ung thư người qua nhân dịng đặc tính thấy chúng thường dẫn xuất gen tiền ung thư c-ras - Genome tất động vật xương sống chứa gen tiền ung thư khác tương tự gen ras, hai số c-H-ras c-K-ras họ hàng gần với gen ung thư v-ras chủng Harvey Kirsten virus bướu thịt chuột Gen thứ N-ras, đến không phát thấy tương đồng với genome ritroviral - Ba gen tiền ung thư ras mã hóa protein bọc GTP tương tự có hoạt tính GTPase Đáng tiếc, chức protein ras chưa rõ - Cả gen tiền ung thư trải qua đột biến thành dẫn xuất gen ung thư khác 51 - Khi gen ung thư tế bào tồn khối u bàng quang nhân dịng xác định trình tự, cho thấy chúng có nguồn gốc từ gen tiền ung thư c-H-ras Đặc biệt, tính ung thư gen đột biến EJ c-H-ras đột biến thay cặp bazo đơn gây nên khả khả gen gây biến nạp tế bào NIH 3T3 nuôi cấy Gen ung thư sinh từ gen tiền ung thư nhờ đột biến thay cặp nu GC thành TA, dẫn đến thay glycine valine amino acid thứ 12 tính từ đầu amin protein thường - Nhiều gen ung thư retroviral EJ c-H-ras từ bướu bàng quang người không tổng hợp lượng lớn protein không bình thường Hiện chưa rõ thay đổi nhỏ gen tiền ung thư mà gen tế bào bình thường nên tạo gen ung thư có khả biến nạp tế bào thành trạng thái ung thư - Một số bệnh nhân ung thư chứa gen ung thư gen tiền ung thư c-H-ras dị hợp tử Điều chứng tỏ gen ung thư gây nên tượng thiên hướng không ung thư không thay đổi qua trung gian đến ung thư - Sự đa dạng gen ung thư gen tiền ung thư c-ras phát đặc tính từ số lượng lớn dịng tế bào phận ung thư khác động vật có vú - Các đột biến alen ung thư ras kết thay amino acid sản phẩm gen ras gây nên - Tất đột biến gen ras thành ung thư có liên quan từ đến codon thứ 12, 59 61 trình bầy bảng 17.2 - Các đột biến không làm thay đổi khả bọc GTP protein ras, làm giảm làm hoạt tính GTPase - Những protein bọc GTP có hoạt tính GTPase gọi protein G tương tác với adenylate cyclase làm thay đổi lượng cAMP tế bào, biến đổi phản ứng trao đổi chất tế bào - Protein G protein màng bất hoạt trừ kích hoạt tương tác với chất thụ cảm hocmon đặc thù Khi protein G bọc lấy GTP định hướng hoạt tính adenylate cyclase Tuy nhiên, GTP bọc vào protein G bị thủy phân hoạt tính GTPase vốn có làm protein bất hoạt 52 - Việc hoạt tính GTPase khóa protein ras dạng hoạt hóa kích cị làm phân chia tế bào tiếp tục xẩy hình thành khối u - Kết luận sản phẩm gen gen ras đóng vai trị quan trọng việc kiểm soát phân chia tế bào Chuyển vị điểm gẫy locus tiền ung thư - Có mối tương quan kiểu ung thư với thay đổi đặc thù cấu trúc nhiễm sắc thể, đặc biệt tượng gẫy chuyển vị nhiễm sắc thể đến nơi không tương đồng, thiếu đoạn liên quan đến nhiễm sắc thể đặc thù Thường điểm gẫy xẩy điểm giống nhiễm săc thể đặc thù kiểu ung thư định Thí dụ nhiễm sắc thể Philadelphia số 22 người đoạn lớn vai dài, 90% người có nhiễm sắc thể kiểu bị bệnh ung thư bạch cầu mạn hà lan (chronic myelogenous leukemia) - Hiện vị trí gẫy chuyển vị nhiễm sắc thể liên quan đến loại bệnh ung thư biết (hình 17.7) Điểm gẫy xếp lại nhiễm sắc thể gây biểu gen tiền ung thư gen điều hòa quan trọng khác cạnh điểm gẫy bị thay đổi - Nhiễm sắc thể Philadelphia sinh chuyển vị qua lại liên quan đến đầu nhiễm sắc thể số 22 (hình 17.8) Điểm gẫy nhiễm sắc thể số làm chuyển vị xẩy gần gen tiền ung thư c-abl trao đổi chuyển gen c-abl sang nhiễm sắc thể 22 Một số bệnh nhân tạo phiên mã gen c-abl khơng bình thường, số khác điểm gẫy xẩy xa phiên mã theo hướng 5’ - Bệnh ung thư tế bào lymphocyte B sản xuất kháng thể, thường thấy số vùng châu phi, người bị nhiễm bệnh virus Epstein-Barr Chuyển vị xẩy tế bào B bệnh nhân Burkitt lymphoma liên quan đến nhiễm sắc thể số nhiễm sắc thể khác 2, 22 nhiễm sắc thể mang gen sinh kháng thể, nhiễm sắc thể 14 mang gen sinh kháng thể chuỗi nặng Tế bào lymphoma B thường tiết kháng thể , gen sinh kháng thể chuỗi nặng biểu tế bào ung thư - Vị trí nhiễm sắc thể thường gẫy gây chuyển vị nhiễm sắc thể 14 tế bào ung thư lymphoma Burkitt tương ứng băng q24 q32 (hình 17.9) 53 - Gen tiền ung thư c-myc nằm băng q24 nhiễm sắc thể số 8, gen chuyển đến cạnh gen sinh chuỗi nặng nhiễm sắc thể 14 chuyển đoạn Gen tiền ung thư c-myc thường biểu bất bình thường đến vị trí đóng góp hình thành nên tế bào ung thư lymphoma Burkitt Hoạt hóa gắn chèn gen tiền ung thư - Có loại virus biến nạp cấp tính virus bướu khỉ mang gen ung thư v-src virus biến nạp chậm không mang gen ung thư kích thích biến nạp tế bào thành trạng thái ung thư sau thời gian ủ bệnh dài vài tháng - Virus biến nạp chậm thường gây ung thư kết gắn provirus vào cạnh gen tiền ung thư, hoạt hóa gen tiền ung thư thành trạng thái biểu mạnh (hình 17.10) Đoạn lặp lại tận dài DNA provirus (LTRs) virus gây u RNA chứa yếu tố tăng cường hay promoter mạnh Việc nhập provirus vào dẫn đến phiên mã tăng cường nằm gen lân cận - Bệnh u lymphoma tế bào B ví dụ liên quan đến hoạt động kích hoạt gen tiền ung thư thường virus leukosis chim (ALV) Genome virus không chứa gen ung thư, gây nhiều bệnh ung thư nặng cho gà nhiễm bệnh lymphoma Provirus kết gắn vào cạnh gen tiền ung thư c-myc hoạt hóa phiên mã gen tăng lên từ 30 – 100 lần cao tế bào bình thường - Hơn phiên mã gen c-myc chứa trình tự ALV LTR đầu 5’, chứng tỏ phiên mã đầu promoter LTR provirus (hình 17.10) Bệnh kết kết gắn ALV LTR chứa promoter/enhancer mạnh vào cạnh gen tiền ung thư c-myc - Nhiều gen tiền ung thư khác c-myb c-erbB kết gắn xẩy vào cạnh gen intron gen tiền ung thư, chứng tỏ yếu tố LTR provirus chịu trách nhiệm làm tăng cường phiên mã 10 Khuyếch đại gen tiền ung thư tế bào ung thư - Khuyếch đại gen làm tăng lượng sản phẩm gen, khuyếch đại thành phần bình thường trình phát triển, trường hợp khuyếch đại gen sinh rRNA trình sinh trứng động vật 54 - Khuyếch đại kích hoạt xẩy nhờ chọn lọc tăng lên tính chống chịu ức chế enzyme cần thiết - Gen tiền ung thư đặc thù thường khuyếch đại số loại ung thư định - Khuyếch đại siêu biểu sản phẩm gen tiền ung thư liên quan mạnh đến phát sinh ung thư sản phẩm gen đóng vai trị điều khiển phân chia tế bào - Thuốc methotrexate tác dụng ức chế enzyme khử dihydrofolate, xúc tác khâu cần thiết tổng hợp dTMP liên quan đến tổng hợp DNA Methotrexate bọc lấy vị trí hoạt động enzyme khử dihydrofolate ngăn cản khơng bọc chất bình thường Nếu chọn tế bào chống lại nồng độ methotrexate tăng dần số tế bào trở nên chống chịu cách khuyếch đại gen mã hóa enzyme khử dihy Tế bào chống chịu có nhiều copy gen tổng hợp nhiều enzyme khử dihydrofolate tế bào bình thường - Phân tử DNA tồn nhiễm sắc thể DM dài biến động từ 50 kb đến vài trăm kb Phần DNA nhiễm sắc thể trải qua trình khuyếch đại gọi amplicon - Mơ hình tổng quát trình khuyếch đại trình bầy hình 17.12 mức tăng cao gen dihydrofolate reductase, phản ứng lại việc chọn lọc tính kháng thuốc methotrexate loại động vật nguyên sinh Leishmania tropica Tuy nhiên, động thực vật bậc cao chế khuyếch đại chưa rõ - Khuyếch đại gen tiền ung thư tế bào liên quan trực tiếp đến trình phát sinh ung thư số dạng ung thư định Như gen tiền ung thư c-myc khuyếch đại với tần suất cao u ung thư phổi tế bào nhỏ, có tần suất thấp dạng ung thư khác - Alitalo cộng phát có nhiều copy gen c-myc HSR nhiễm sắc thể X khơng bình thường tế bào ác tính bệnh nhân ung thư hậu môn (colon) Ở bệnh nhân chứa nhiễm sắc thể DM mang gen c-myc khuyếch đại 55 - Khuyếch đại gen tiền ung thư làm sản xuất nhiều sản phẩm gen tiền ung thư, kiện khuyếch đại khơng liên quan đến xuất phát ung thư, đóng góp vào bước đường hướng dẫn đến ung thư - Khuyếch đại liên tục (hồi quy) gen tiền ung thư sp’’cific loại tế bào ung thư đặc biệt chúng tỏ chúng có liên quan đến trình phát sinh ung thư 11 Nguồn gốc gen ung thư virus - Gen ung thư virus tiến hóa từ gen tiền ung thư tế bào bình thường, tính tương đồng chúng provirrus kết gắn vào nhiễm sắc thể tế bào tạo nên Nhưng khơng có nghĩa phải tiến hóa từ gen tiền ung thư tế bào mà tiến hóa từ gen tiền ung thư tổ tiên - Sự khác chúng gen tiền ung thư tế bào chứa intron cịn gen ung thư virus khơng chứa intron, toàn chứa exon - Trong số trường hợp, nhiều retrovirus xâm nhiễm loài họ hàng xa gặp phải copy gen tiền ung thư tương tự virus ung thư simian khỉ virus ung thư mèo(feline) mang gen ung thư virus có nguồn gốc từ gen tiền ung thư csis Như nhiều virus gần chứa gen ung thư có nguồn gốc từ gen tiền ung thư tế bào hồn tồn khơng có liên quan VII Ung thư kết cuối trình nhiều bước - Trạng thái ung thư sản phẩm hậu q trình nhiều bước Dịng tế bào dùng thí nghiệm truyền nhiễm giai đoạn trung gian ung thư - Một số gen ung thư định có hiệu hợp tác trình kích thích tạo thành ung thư - Gen ung thư khác có thể đóng vai trị tạo ung thư loại tế bào khác - Nhiều kiện phân tử khác có liên quan đến làm tăng khả phân chia tế bào, làm tăng khả khối u xâm lấn mô bên cạnh tăng khả di Về vấn đề ung thư người cần phải xác định 56 - Công việc nghiên cứu tương lai gen tiền ung thư ung thư hứa hẹn thu thơng tin quan trọng chu trình phân tử điều khiển chu trình phân chia tế bào sinh vật nhân chuẩn bậc cao người VIII Kết luận - Chu kỳ tế bào trải qua: tái DNA, cô đặc nhiễm sắc thể, giai đoạn phân tách nhiễm sắc pha M xẩy cách xác - Tế bào phải trải qua hai thời điểm quan trọng là: bắt đầu vào cuối giai đoạn G1, định việc tổng hợp DNA đầu pha S hàng loạt bước pha M, cô đặc phân tách nhiễm sắc - Các protein G-cyclin tổng hợp tích lũy gian kỳ (interphase) phân rã pha M - Protein kinase ký hiệu pp34 chất quan trọng điều khiển chu kỳ tế bào, pp34 hình thành phức hợp với cyclin có vai trị kích thích phân chia ngun nhiễm Protein kinase pp34 kiểm sốt khởi đầu phân bào nhờ tương tác với G1-cyclin - Protein điều hịa pp34 giúp tế bào khơng phân chia hay phân chia cách phosphoryl hóa hay khơng phosphoryl hóa tyrosine số 15 - Ở nấm men đột biến thấy vị trí tyrosine 15 pp34 thay phenylalanine, khơng xẩy phosphoryl hóa làm chu kỳ tế bào xẩy bất bình thường - Điều khiển phân chia tế bào sinh vật đa bào đòi hỏi chế điều hịa phức tạp hơn, mơ quan quan thể phải sinh trưởng đến kích thước xác, vị trí xác, hài hịa với tế bào, mô quan khác thể - Mối liên lạc tế bào sinh vật đa bào đóng vai trị cức quan trọng chu kỳ tế bào - Gen tiền ung thư mã hóa sinh protein có chức theo nhiều cách liên lạc tế bào khác 57 - Gen ung thư retroviral mã hóa sản phẩm làm tế bào bình thường trải qua biến đổi thành trạng thái ung thư Các gen bình thường có nhiễm sắc thể động vật, tương đồng với gen ung thư virus retroviral gọi gen tiền ung thư - Các gen tiền ung thư biến đổi thành gen ung thư đột biến, kết hợp với trình tự điều hịa tượng khuyếch đại gen làm sản sinh nhiều sản phẩm gen tiền ung thư - Gen tiền ung thư phát cách lai với mẫu dị gen ung thư retroviral, dẫn xuất ung thư gen tiền ung thư phát thí nghiệm truyền nhiễm sở khả làm tế bào nuôi cấy tiến hành biến đổi thành trạng thái ung thư ức chế liên lạc tế bào, dẫn đến hình thành khối u ni cấy in vitro mà khơng hình thành lớp tế bào bề mặt - Hiện phát nghiên cứu 20 gen ung thư retroviral tiền ung thư tương ứng khác động vật Gen tiền ung thư bảo tồn cao động vật bậc cao, chứng tỏ sản phẩm chúng đóng vai trị quan trọng nhiều lồi sinh vật - Sản phẩm gen tiền ung thư yếu tố sinh trưởng, chất thụ cảm yếu tố sinh trưởng, chất tiếp nhận hocmon hay chất hoạt hóa phiên mã từ xa, protein xuyên màng gắn GTP có hoạt tính xúc tác gắn GTP (GTPase) Cuối sản phẩm gen tiền ung thư protein enzyme kinase giúp gắn gốc phosphat đặc thù vào vị trí tyrosine serine/threonine, có tác dụng giúp truyền tín hiệu từ bề mặt màng vào nhân phiên mã tế bào - Ba thành viên họ gen tiền ung thư c-ras c-K-ras, C-H-ras N-ras phát thể đột biến thành dạng alen gen ung thư tế bào nhiều bệnh ung thư người khác Các alen khác thay cặp nu đơn khác ba codon 12, 59 61 mRNA, làm thay đổi amino acid vị trí gây nên Dẫn đến làm hoạt tính GTPase protein c-ras làm protein khả điều khiển bình thường làm xuất ung thư dạng đột biến c-ras 58 - Gen tiền ung thư chưa trình tự mã hóa ngắt qng gồm exon intron gen bình thường khác, gen ung thư chứa toàn exon Gen ung thư retroviral bắt nguồn từ phiên mã gen tiền ung thư thành thục - Dạng tế bào ung thư ác tính sản phẩm cuối dẫy q trình liên quan đến việc kích thích số bước định Nghiên cứu chức sản phẩm gen tiền ung thư giúp đưa thông tin bổ ích chu kỳ điều khiển phân chia tế bào sinh vật bậc cao 59 ...+ Thông qua khả sinh sản, sinh nhiều cháu, hệ số nhân cao + Các cháu lại có khả sống sót tồn phát triển tốt, tỷ lệ sống sót cao + Rồi cháu lại tiếp tục tồn sống sót cao - Khả thành cơng... tính đa dạng sinh tần số cao đột biến soma Là đột biến xảy tế bào soma sản sinh kháng thể xẩy tế bào mầm sinh tế bào tạo kháng thể Tuy nhiên, chưa có phát cho thấy có tần suất đột biến cao xẩy gen... qua hoạt động protein - Biểu gen phản ảnh thông qua trình sinh protein đặc thù điều khiển chúng thơng qua khía cạnh chúng sinh đâu, sinh sinh Sự đa dạng vĩ đại chức tuyệt vời thực vật - Cây Sequoiadendron