Nhiều kháng sinh dùng trong điều trị các bệnh nhiễm khuẩn do MRSA hiện nay đã và đang bị kháng lại mạnh mẽ bởi chính vi khuẩn gây bệnh. Vancomycin được xem là tiêu chuẩn vàng trong điều trị các bệnh do MRSA gây ra. Tuy nhiên, hiện nay chủng MRSA kháng vancomycin cũng đã xuất hiện. Thực vật đang thu hút nhiều sự chú ý của giới nghiên cứu về số lượng thành phần hoạt chất có hoạt tính kháng khuẩn. Trong nghiên cứu này,
HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA PHÂN ĐOẠN ETHYLACETATE TỪ CAO ETHANOL TRÂM TRÒN (SYZYGIUM GLOMERULATUM) TRÊN CHỦNG STAPHYLOCOCCUS AUREUS KHÁNG METHICILLIN (MRSA) Mai Thị Ngọc Lan Thanh1,2*, Phùng Minh Thiện1, Nguyễn Thảo Vy2, Hoàng Anh Hoàng1, Trương Vũ Thanh1 Trường Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc Gia TP.HCM Đại học Thủ Dầu Một, Bình Dương TĨM TẮT Nhiều kháng sinh dùng điều trị bệnh nhiễm khuẩn MRSA bị kháng lại mạnh mẽ vi khuẩn gây bệnh Vancomycin xem tiêu chuẩn vàng điều trị bệnh MRSA gây Tuy nhiên, chủng MRSA kháng vancomycin xuất Thực vật thu hút nhiều ý giới nghiên cứu số lượng thành phần hoạt chất có hoạt tính kháng khuẩn Trong nghiên cứu này, Sử dụng phương pháp khuếch tán đĩa phương pháp vi pha loãng dựa số FICI xác định hoạt tính kháng MRSA phân đoạn Ethyl acetate từ cao Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) khả kết hợp với kháng sinh chuẩn vancomycin Kết xác định nồng độ ức chế tối thiểu phân đoạn ethyl acetate 238,10 µg/ml FICI 0,75-1 phân đoạn ethyl acetate Trâm Tròn cho hoạt tính kết hợp phần với vancomycin Sử dụng phương pháp sắc ký cột NMR xác định cấu trúc tinh chất Pinostrobin Đây tinh chất lần tách chiết từ phân đoạn Ethyl acetate cao ethanol Trâm Tròn dùng chất thị hóa học cho phân loại cao Trâm Trịn Từ khóa: MRSA; cao chiết thực vật; Syzygium; hoạt tính kháng Khuẩn I ĐẶT VẤN ĐỀ Staphylococcus aureus nguyên nhân gây nhiễm trùng da mô mềm, ngày tăng nguy kháng thuốc [1] Vancomycin thuộc nhóm glycopeptides, tiêu chuẩn vàng điều trị bệnh nhiễm khuẩn MRSA Vancomycin có lực cao với D-ala-D-ala đầu C pentapeptide, khố hình thành tiền chất sau transglycosylation với peptidoglycan ngăn cản trình hình hình cross-linking transpeptidation Vancomycin khơng có tính thấm qua màng tế bào chất, tương tác với đích thuốc sau tiền chất khảm qua bề mặt màng Do vancomycin không tương tác với enzyme tổng hợp vách tế bào hình thành phức hợp với tiền chất peptidoglycan, hoạt động khơng xác định lực với enzyme đích chất đặc biệt *Tác giả: Mai Thị Ngọc Lan Thanh Địa chỉ: Đại học Thủ Dầu Một, Bình Dương Điện thoại: 0947 361 139 Email: Thanhmtnl@tdmu.edu.vn 120 enzyme để định cấu trúc tiền chất peptidodlycan Kháng vancomycin diện operon chứa mRNA dịch mã cho enzyme tổng hợp tiền chất có lực thấp với vancomycin Đặc biệt, đầu C D-ala-D-ala thay D-lactate D-Serine làm thay đổi vị trí gắn vancomycin phá huỷ lực cao tiền chất với vancomycin, xố bỏ đích thuốc [2] Dae Ki Joung cộng tách chiết hợp chất Oxyresveratrol (ORV) hợp chất thiên nhiên thuộc họ Stilbene tìm thấy dâu tằm (Morus alba) biểu hoạt tính sinh học khoảng rộng, ORV tách từ phân đoạn ethylacetate cho hoạt tính kháng MRSA [3] Ở Việt Nam, loại kháng sinh nhiều nguy khơng cịn đủ khả kháng lại loại vi khuẩn, kháng sinh hệ dùng đặc trị cho bệnh nhiễm trùng Ngày nhận bài: 26/04/2019 Ngày phản biện: 06/05/2019 Ngày đăng bài: 27/05/2019 Tạp chí Y học dự phòng, Tập 29, số - 2019 huyết nhiễm Staphylococcus aureus methicillin, vancomycin xuất chủng Staphylococcus aureus kháng MRSA kháng methicillin 13,6%; Staphylococcus aureus kháng trung gian vancomycin (VISA) Staphylococcus aureus kháng vancomycin (VRSA) 6,1% [4] Nhiều loài thực vật xác định có hợp chất kháng khuẩn [1] Việt Nam nước có nguồn tài nguyên thiên nhiên đa dạng phong phú Trong đó, nguồn tài ngun thực vật vơ đa dạng, cung cấp không sản phẩm gỗ mà cung cấp cho ta nguồn tài nguyên lâm sản ngồi gỗ, có nguồn tài ngun thuốc [5] Việc ứng dụng dịch chiết thực vật để điều trị bệnh nhiễm nhuẫn Cành non Lá hoa có nhiều lợi ích tốn kém, nguồn nguyên liệu phong phú, đem lại hiệu điều trị lâu dài thuốc y học cổ truyền sử dụng từ xa xưa đến Tuy nhiên, nghiên cứu chứng minh cao chiết kháng khuẩn MRSA Việt Nam hạn chế Từ đề tài nghiên cứu sàng lọc cao chiết ethanol thực vật địa cho hoạt tính kháng S.aureus MRSA [6] Trâm trịn loài thực vật địa thành phố Thủ Dầu Một, tỉnh Bình Dương Nhóm nghiên cứu tiến hành thí nghiệm để xác định nhóm chất từ cao chiết ethanol Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) làm dấu hóa học nhằm định danh phân loại thực vật Trái Cành Hình Lá, hoa cành non chiết cao Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) II PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Hoạt tính kháng Chủng vi khuẩn Staphylococcus aureus nhạy methicillin (MSSA) ATCC 6538 (Microbiologics, USA), Chủng vi khuẩn Staphylococcus aureus kháng methicillin (MRSA) ATCC 33591 (Microbiologics, USA) từ cao chiết ethanol Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) tiến hành Trung tâm Nghiên cứu thực nghiệmTrường Đại Học Thủ Dầu Một, Phịng thí nghiệm trọng điểm- Trường Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh 2.2 Phương pháp khảo sát hoạt tính kháng MRSA 2.2.1 Ni cấy vi khuẩn Chủng vi khuẩn MSSA ATCC 6538 (Microbiologics, USA) sử dụng chủng đối chứng, MRSA (Microbiologics, USA) MSSA nuôi môi trường lỏng Trypton Soy (Himedia, Ấn Độ), môi trường Trypton Soy agar (Himedia, Ấn Độ) Chủng vi khuẩn nuôi tủ ấm (DaiHan, Hàn Quốc), nhiệt độ 370C, vòng 18 2.2.2 Thử nghiệm khả kháng khuẩn phương pháp khuếch tán đĩa thạch (Agar diffusion method) Môi trường Muller-Hinton Agar (Neogen,USA) môi trường chuẩn dùng để khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết Sử dụng phương pháp Kirby-Bauer, đĩa bổ sung 100 µl dịch ni vi khuẩn có nồng độ 106 CFU/ml, có khoan giếng, kháng sinh chuẩn vancomycin bổ sung vào giếng với thể tích 100 µl nồng độ MIC tối thiểu kháng sinh thử nghiệm 100 µl dịch chiết cao Tạp chí Y học dự phịng, Tập 29, số - 2019 121 thực vật SCTT E+D có nồng độ pha lỗng lần 5,255 µg/ml bổ sung vào giếng 2, 100 µl dịch chiết cao Trâm trịn có nồng độ 10,51 µg/ml bổ sung vào giếng 3, giếng đĩa thạch khoan có kích thước lỗ mm Sau đó, đĩa ủ 37oC vòng 18 Các thí nghiệm lặp lại lần Các kích thước vòng kháng khuẩn theo milimet (mm) đọc sau 18 [7] sử dụng tiêu chuẩn vòng kháng khuẩn CLSI để giải thích [8] 2.2.3 Khảo sát khả kết hợp [9] Pha dung dịch kết hợp SCTT E+D vancomycin (Sigma, Đức) sau: SCTT E+D chọn từ A3 đến A10 tương ứng với dãy nồng độ 12, 6, 3, 1.5, 0.75, 0.375, 0.1875, 0.09375µg/ml, dung dịch vancomycin theo dãy từ B3 đến B8 tương ứng với dãy nồng độ 0,009766, 0,00488, 0,002441, 0,001221, 0,00061, 0,000305µg/ml, dung dịch kết hợp pha theo tỉ lệ 1:1 thể tích (SCTT:Vancomycin) Sau dung dịch pha kết hợp cho vào giếng theo phương pháp pha loãng để khảo sát nồng độ kết hợp ức chế phát triển MRSA Cơng thức tính số FIC: FICI = FICA + FICB = MICA-B/MIC A+MICA-B/MICB [10] FICI 2 hoạt động trái ngược 2.3 Định tính thành phần hóa học cao Trâm Tròn Xác định diện thành phần Flavonoid, Alkaloid, Carotenoid, Steroid, Tannin, Polyphenol mô tả theo Harbone [11] 2.4 Quy trình chiết xuất Sau nhận cao ethanol tổng, cao bảo quản cách sục khí trơ lưu giữ tủ lạnh chưa dùng Cao ethanol có nhiều hợp chất Vì vậy, phân chia thành phân đoạn nhỏ bước quan trọng Cao ethanol hòa tan Ethanol nước theo tỉ lệ 1:1, sử dụng máy siêu âm để tạo điều kiện dễ hòa tan hồn tồn Sau đó, sử dụng phương pháp trích lỏng-lỏng thành pha nhỏ ba phân đoạn cao Hexan, ethylacetate, chloroform Tiếp theo phân đoạn cô quay để loại hết dung môi thu cao phân đoạn Các cao phân đoạn cho vào cột Silicagel 200 – 400mesh (Himedia) theo tỉ lệ mẫu: silica 1:1,5, hứng phân đoạn theo dung mơi giải ly trình tự sau lượng dung mơi tăng 25% Ethyl acetate (0% 122 - 100%) hexane, tăng 25% methanol Ethyl acetate (0% - 100%), thu phân đoạn Phân đoạn chloroform (CHCl3) chia làm phân đoạn nhỏ theo dung môi giải ly tăng 5% ethyl acetate hexane (0 đến 100%), tăng 5% methanol Ethyl acetate (0 đến 100%) Thu 20 phân đoạn nhỏ Sử dụng sắc ký mỏng để kiểm tra lại chất cần phân tách hoàn toàn hay chưa Phổ tinh chất sau gửi đến Khoa Hóa trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên Hà Nội để đo NMR Các thí nghiệm lặp lại lần xử lý phần mềm STATGRAPHICS Centurion XV III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Khảo sát khả kháng khuẩn phân đoạn từ cao ethanol Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) Từ cao ethanol Trâm tròn thu ba phân đoạn gồm hexan, ethyl acetate, chloroform Sử dụng phương pháp khuếch tán đĩa thạch, định tính khả kháng khuẩn phân đoạn kết thể Bảng Tạp chí Y học dự phịng, Tập 29, số - 2019 Bảng Kích vòng kháng khuẩn phân đoạn chủng MSSA Phân đoạn Kích thước vịng kháng khuẩn (mm) n-Hexane - Chloroform 10,33± 0,58 Ethyl acetate 21,67 ±0,58 vancomycin 22,5±0,87 (-): xuất vịng kháng khuẩn Kết xác định có hai phân đoạn cho hoạt tính kháng khuẩn MSSA phân đoạn chloroform phân đoạn ethylacetate với kích thước vịng kháng 10,33± 0,58 21,67 ±0,58 (mm) so với kích thước kháng sinh vancomycin 22,5±0,87 Trong phân đoạn hexan khơng cho hoạt tính kháng MSSA Chính kết định tính này, phân đoạn ethylacetate lựa chọn cho thử nghiệm Khảo sát hoạt tính kháng MRSA phân đoạn ethylacetate Sau cao chiết ethanol Trâm Trịn lắc phân đoạn từ n-hexan, ethyl acetate chloroform Các phân đoạn thu nhận dùng thị khả kháng khuẩn để lựa chọn MSSA kích thước vịng vơ khuẩn (mm) 13,33±0,47 MRSA kích thước vịng vơ khuẩn (mm) 14±0,82 Hình Kết kháng MSSA MRSA từ phân đoạn ethyl acetate Cao Trâm Kết cho thấy khả kháng khuẩn MSSA MRSA từ phân đoạn ethylacetate (Hình 2.) Hoạt tính kháng MRSA Phân đoạn cao Trâm Tròn báo cáo lần Việt Nam, giới có số cơng trình nghiên cứu Nghiên cứu trước chủ yếu liên quan đến họ Trâm (Syzygium sp) Trâm Dài (hay Trâm Mốc) có tên khoa học Syzygium cumini có nhiều cơng trình nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn nồng độ cao methanol kháng MRSA báo cáo 100mg/ml cho kích thước vịng kháng MRSA Tạp chí Y học dự phòng, Tập 29, số - 2019 123 13,15±0,21(mm) [12], hoạt tính kháng MRSA cao phân đoạn ethylactetate từ cao ethanol Trâm Tròn 1mg/ml biểu hoạt tính kháng khuẩn với xuất vịng vơ khuẩn có kích thước 13,33±0,47 (mm) chủng MSSA, 14±0,82 (mm) chủng MRSA Hướng khác Cao trâm tròn chưa cơng trình nghiên cứu báo cáo trước Tiếp theo nhằm xác định khả kết hợp nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) phân đoạn ethylacetate từ cao Trâm Tròn, sử dụng phương pháp vi pha loãng đĩa 96 giếng với kháng sinh vancomycin Khảo sát khả kết hợp phân đoạn ethyl acetate Trâm Tròn kháng sinh Phân đoạn ethyl acectate cho hoạt tính kháng hai chủng Staphylococcus aureus nhạy methicillin Staphylococcus aureus kháng methicillin Việc sử dụng hợp chất kháng khuẩn làm chất trợ nhằm hạn chế khả kháng thuốc chủng vi sinh vật sử dụng Vì xác định khả hợp lực phân đoạn ethyl acetate với kháng sinh vancomycin thực phương pháp vi pha lỗng Bảng Sơ đồ bố trí thí nghiệm đĩa 96 giếng dãy 10 11 12 E vancomycin kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin F Kháng sinh Oritavancin kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin G kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin H kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin kết hợp phân đoạn Ethylacetate (EA) với vancomycin 12 11 10 Hình Khả kết hợp phân đoạn ethyl acetate Trâm Tròn vancomycin Kết trình bày hình bảng Theo công thức Wayne cộng (2010) Kết FICI nằng khoảng từ 0,75 124 đến điều cho thấy khả kết hợp phân đoạn ethylacetate từ cao Trâm Tròn vancomycin thử nghiệm Tạp chí Y học dự phịng, Tập 29, số - 2019 Bảng Bảng giá trị MIC phân đoạn, kháng sinh vancomycinvà FICI VAN EA 1,90 1,90 1,90 0,95 0,95 0,95 0,48 0,24 238,10 119,05 59,52 238,10 119,05 59,52 238,10 238,10 FICVAN 2,00 2,00 2,00 1,00 1,00 1,00 0,50 0,25 FICEA 0,5 0,25 0,125 0,5 0,25 0,125 0,5 0,5 FICI 2,50 2,25 2,13 1,50 1,25 1,13 1,00 0,75 VAN: kháng sinh vancomycin, EA: phân đoạn ethyl acetate, FICVAN: Chỉ số FIC Vancomycin, FICEA: số FIC phân đoạn ethyl acetate, FICI: Chỉ số kết hợp Phân đoạn ethyl acetate cho hoạt tính kháng MRSA với MIC 238,10 µg/ml Hịa tan cao tổng MeOH: nước (1:1) Dung dịch dùng thử nghiệm kết sơ Sau khảo sát, kết cho thấy dịch chiết ethanol Trâm Trịn có chứa hợp chất Flavonoid, Alkaloid, Carotenoid, Steroid, Tannin, Polyphenol Nhằm tìm kiếm marker hóa học cho hỗ trợ định danh thực vật nhóm hợp chất phân đoạn ethylacetate cho hoạt tính kháng MRSA MSSA Nghiên cứu tiến hành phân lập hợp chất tinh khiết Kết thu hợp chất tinh khiết định danh chạy phổ NMR Kết giải phổ thể Bảng Phân lập tinh chất: Xác định cấu trúc MT-1.01 Tinh chất có mặt hầu hết tất phân đoạn xem chất Trong số phân đoạn thu từ pha n-hexane Phân đoạn (50% n-hexane:50% EtOAc) cho phần kết tinh trắng Sử dụng phương pháp kết tinh lại MeOH Et2O thu tinh thể khơng màu, hình kim Dùng TLC xác định tinh thể Tạm gọi tinh chất MT-1.01 (9 mg) Tinh chất gửi đo NMR để xác định cấu trúc Sau đo khối phổ để xác nhận lại Khối phổ cho kết 270 So sánh với liệu NMR MS có sẵn với kết báo khoa học nhóm nhà khoa học người Malaysia, [13] khẳng định tinh chất Pinostrobin chalcone (Hình 4) Tạp chí Y học dự phòng, Tập 29, số - 2019 125 Bảng Bảng so sánh MT-1.01 Pinostrobin Vị trí Hợp chất MT– 1.01 (CDCl3 – 500 MHz) Pinostrobin (13) (CDCl3 – 400 MHz) δΗ (J Hz) δΧ 5,43 (1H; dd; J = 13,0; 2,5 Hz) δΗ (J Hz) 5,39 (1H; dd; J = 12,84; 2,76 Hz) 55,7 3,09 (1H; dd; J = 17,0; 13,0 Hz) 3,06 (1H; dd; J = 15,14;12,84 Hz) 43,4 2,83 (1H; dd; J = 17,0, 3,0 Hz) δΧ 55,6 43,2 2,79 (1H; dd; J = 14,68; 2,76 Hz) 195,8 196 162,8 163 6,08 (1H; dd; J = 2; 2,5 Hz) 95,2 6,08 (1H; dd; J = 2; 2,5 Hz) 94,3 6,05 (1H; d; J = 2,72 Hz) 95 6,05 (1H; d; J = 2,72 Hz) 94,1 168 168 164,2 164 10 103,2 103 1’ 138, 138 2’ 126,2 126 3’ 126,2 126 4’ 7,43 (5H; m) 128,9 7,41 (5H; m) 129 5’ 126,2 126 6’ 126,2 126 OMe 3,81 (3H; s) OH 12,02 (1H; s) 79,3 3,79 (3H; s) 79 12,00 (1H; s) 3' 2' MeO 4' O 5' 1' 6' 10 OH O Hình Cấu trúc Pinostrobin IV KẾT LUẬN tách chiết từ phân đoạn Ethylacetate cao Kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn Ethyl acetate từ cao ethanol Trâm Tròn cho hoạt tính kháng MRSA khả kết hợp với kháng sinh chuẩn vancomycin hoạt tính kháng khuẩn MRSA MSSA Hơn nữa, tinh chất Pinostrobin lần 126 ethanol Trâm Tròn TÀI LIỆU THAM KHẢO Quave CL, Plano LR, Pantuso T, Bennett BC Effects of extracts from Italian medicinal plants Tạp chí Y học dự phòng, Tập 29, số - 2019 on planktonic growth, biofilm formation and adherence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus Journal of ethnopharmacology, 2008; 118(3): 418-28 Courvalin P Vancomycin resistance in grampositive cocci Clinical Infectious Diseases, 2006; 42(Supplement_1): S25-S34 Joung DK, Mun SH, Choi SH, Kang OH, Kim SB, Lee YS, et al Antibacterial activity of oxyresveratrol against methicillin‑resistant Staphylococcus aureus and its mechanism Exp Ther Med, 2016; 12(3): 1579–1584 Nguyễn Văn Kính Phân tích thực trạng: Sử dụng kháng sinh kháng kháng sinh Việt Nam GARP-VN 2010 Hướng B, Dư NV, Anh HT, Thái TH, Hợi TM Đa dạng nguồn tài nguyên thuốc đồng bào dân tộc tỉnh Gia Lai Báo cáo Khoa học Sinh thái Tài nguyên Sinh vật-Hội nghị Khoa học Toàn quốc lần thứ năm 2013:1105-9 Thanh MTNL, Lành NT Sàng lọc kháng sinh thực vật tan dung môi nước kháng staphylococcus aureus Tạp chí Đại học Thủ Dầu Một (28):3-7 Bauer A, Kirby W, Sherris JC, Turck M Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method Am J Clin Pathol, 1966;45(4):493-6 Wayne P Clinical and laboratory standards institute Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, 2007;17 Wayne P Clinical and Laboratory Standards Institute: Performance standards for antimicrobial susceptibility testing: 20th informational supplement CLSI document M100-S20 2010 10 Kuok C-F, Hoi S-O, Hoi C-F, Chan C-H, Fong I-H, Ngok C-K, et al Synergistic antibacterial effects of herbal extracts and antibiotics on methicillin-resistant Staphylococcus aureus: A computational and experimental study Exp Ther Med, 2017;242(7):731-43 11 Harborne J Phytochemical Methods: A Guide to modern technique of plant analysis 2ed Chapman & Hall London; 1991 12 Priya SSL, Devi PR, Eganathan P, Kingsley J In vitro antimicrobial activity of Syzygium cumini fruit peel and identification of anthocyanins African J Pharm Pharmacol, 2013;7(25):1719-28 13 Ching AYL, Wah TS, Sukari MA, Lian GEC, Rahmani M, Khalid K Characterization of flavonoid derivatives from Boesenbergia rotunda (L.) Malaysian J Anal Sci, 2007;11(1):154-9 Tạp chí Y học dự phòng, Tập 29, số - 2019 127 ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF ETHYLACETATE FRACTION FROM ETHANOL TRAM TRON SYZYGIUM GLOMERULATUM EXTRACT AGAINST METHICILLIN-RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS (MRSA) Mai Thi Ngọc Lan Thanh1,2, Phung Minh Thien1, Nguyen Thao Vy2, Hoang Anh Hoang1, Trương Vu Thanh1 Ho Chi Minh City University of Technology, Vietnam National University – Ho Chi Minh City (VNU-HCM), Vietnam Thu Dau Mot University (TDMU), Binh Duong Province, Vietnam Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is currently a predominant and dangerous nosocomial pathogen Unfortunately, infections caused by this organism are becoming more difficult to treat as further evolution of drug resistance occurs within the pathogen Vancomycin is an antibiotic used to treat a number of bacterial infections Vancomycin has for a long time been considered the gold standard for the therapy of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections However, Vancomycin resistance has been reported in clinical isolates of both coagulase-negative staphylococci and Staphylococcus aureus The plant extracts have attracted increasing interests due to their secondary metabolic products such as tannins, terpenoids, alkaloids, and flavonoids 128 which have the antibacterial activity In this study, the effects of therapies combining antibiotics and Ethylacetate fraction from Ethanol Tram Tron extract on methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) were investigated The results showed that The minimum inhibited concentration of ethyl acetate fraction is 238,10 µg/ml the FICI is 0,75-1 which determined the partial synergism between vancomycin and ethyl acetate fraction from ethanol Syzygium glomerulatum extract Addition, Using the column-chromatography and NMR assessed the structure of the puriedcompound which Pinostrobin Pinostrobin has been identified for the first time as an active principle of Syzygium glomerulatum extract Keywords: MRSA; Plant extract; Syzygium; anti-bacterial activity Tạp chí Y học dự phịng, Tập 29, số - 2019 ... khuẩn (mm) 14±0,82 Hình Kết kháng MSSA MRSA từ phân đoạn ethyl acetate Cao Trâm Kết cho thấy khả kháng khuẩn MSSA MRSA từ phân đoạn ethylacetate (Hình 2.) Hoạt tính kháng MRSA Phân đoạn cao Trâm. .. chiết từ phân đoạn Ethylacetate cao Kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn Ethyl acetate từ cao ethanol Trâm Trịn cho hoạt tính kháng MRSA khả kết hợp với kháng sinh chuẩn vancomycin hoạt tính kháng khuẩn. .. Centurion XV III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Khảo sát khả kháng khuẩn phân đoạn từ cao ethanol Trâm Tròn (Syzygium glomerulatum) Từ cao ethanol Trâm tròn thu ba phân đoạn gồm hexan, ethyl acetate, chloroform