Đang tải... (xem toàn văn)
Azithromycin là kháng sinh thuộc nhóm Macrolid. Có phổ kháng khuẩn trên vi khuẩn Gram (+) và vi khuẩn Gram (). Được dùng trong các trường hợp như: nhiễm khuẩn da, mô mềm, nhiễm khuẩn tiết niệu, nhiễm khuẩn hô hấp...sự ra đời của Azithromycin đã đem lại hiệu quả cao trong điều trị nhiễm khuẩn. Tuy nhiên, trên thị trường vẫn xuất hiện các loại kháng sinh giả, thuốc không đạt chất lượng vẫn còn lưu hành. Do đó, để đảm bảo chất lượng và nâng cao hiệu quả sử dụng kháng sinh thì công tác kiểm tra chất lượng rất quan trọng. Để kiểm tra các chỉ tiêu về thuốc có thể dựa vào Dược điển Việt Nam V, hoặc dược điển của các quốc gia có nền Y học phát triển như: Mỹ, Anh, EU.
BÁO CÁO Kiểm Nghiệm Dược Phẩm Chuyên đề: Azithromycin Capsules Văn Sỷ Tài Nguyễn Thị Ngọc Quyên ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, nhu cầu sử dụng chế phẩm kháng sinh để điều trị bệnh phổ biến Sự đời nhiều loại kháng sinh Cephalosporin, Macrolid, Quinolon…đã đem lại hiệu cao điều trị nhiễm khuẩn Bên cạnh đó, thuốc giả, thuốc khơng đạt chất lượng lưu hành thị trường Do đó, cơng tác kiểm nghiệm chất lượng thuốc quan trọng nhằm đảm bảo thuốc đạt chất lượng Để đánh giá tiêu chất lượng dựa vào Dược điển Việt Nam, Anh, Mỹ… Cách dùng thuốc Azithromycin Azithromycin là kháng sinh thuộc nhóm macrolide Có tác dụng tốt vi khuẩn Gram (+) như: Steptococcus, Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, … Gram (-) như: Haemophilus influenza, Salmonella … THUỐC ĐƯỜNG ĐƯỢC DÙNG TRONG CÁC TRƯỜNG HỢP SAU: Viêm tai cấp tính Nhiễm khuẩn tiết niệu Nhiễm khuẩn da, mô mềm Nhiễm khuẩn hô hấp CÁC YÊU CẦU CHỈ TIÊU DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM DƯỢC ĐIỂN ANH DƯỢC ĐIỂN MỸ Tính chất Tính chất Tính chất Độ đồng khối lượng Độ đồng khối lượng Độ đồng khối lượng Định tính Định tính Định tính Độ hịa tan Độ hịa tan Độ hòa tan Định lượng Định lượng Định lượng Giới hạn tạp chất Capsules TỔNG QUAN Azithromycin ĐỘ TAN Azithromycin CÔNG THỨC CẤU TẠO CTPT: C38H72N2O12 = 749.0 Nang cứng, bột màu trắng (hoặc trắng ngà), không mùi, vị đắng Không tan nước; Dễ tan Ethanol tuyết đối Methyl clorid ĐỘ ĐỒNG ĐỀU KHỐI LƯỢNG Dược điển Việt Nam >2mg 2% (kl/kl) Dược điển Anh >2mg 2% (kl/kl) Tiến hành 20 đơn vị ngẫu nhiên Cân khối lượng nang.Tháo rời hai vỏ nang, dùng lau vỏ cân khối lượng vỏ mthuốc nang = m nang thuốc - mvỏ Tiến hành tương tự 19 đơn vị khác ngẫu nhiên Tính khối lượng trung bình Capsules Azithromycin Dược điển Mỹ >25mg 25% (kl/kl) Tiến hành 10 đơn vị ngẫu nhiên Cân khối lượng nang.Tháo rời hai vỏ nang, dùng lau vỏ cân khối lượng vỏ mthuốc nang = m nang thuốc - mvỏ Tiến hành tương tự đơn vị khác ngẫu nhiên Tính khối lượng trung bình = = % chênh lệch so với KLTB viên nang 7.5% Đạt: Khơng có q đơn vị có khối lượng nằm giới hạn chênh lệch so với KLTB; Và khơng có đơn vị có khối lượng vượt gấp đơi đơn vị Capsules ĐỊNH TÍNH Azithromycin Phản ứng A (Theo DĐ Anh) Phản ứng B (Theo DĐ Anh; VN & Mỹ) - Hòa tan lượng viên nang chứa 0,5g Azithromycin với 50ml diclometan - Lọc làm bay dịch lọc đến khô dòng nitơ - Đo phương pháp quang phổ hồng ngoại cho kết gần phổ tham chiếu Azithromycin Trong phần Định lượng: Pic sắc ký đồ dung dịch thử phải có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu của pic sắc ký đồ dung dịch chuẩn Phản ứng A 0.5 g Azi 50 ml diclometan Lọc Dịch lọc Bay Phản ứng B Cắn Đo quang phổ hồng ngoại Phổ tương đương phổ Azi chuẩn Sơ đồ minh họa phản ứng A Dung dịch thử Dung dịch chuẩn ĐỘ HÒA TAN DƯỢC ĐIỂN MỸ DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM DƯỢC ĐIỂN ANH Thiết bị: Kiểu cánh khuấy Tốc độ quay: 100 vịng/phút Mơi trường hòa tan: 900 ml dung dịch đệm phosphat pH 6.0 Thời gian: 45 Pha dung dịch đệm Phosphat pH 6.0 6l dinatri hydrophosphat 0.1 N + 40ml HCl (TT) Điều chỉnh tới pH 6.0 ± 0.1 + 600mg Trypsin + 40 ml HCl (TT) Trộn Dung dịch đệm Phosphat pH 6.0 Thiết bị đo độ hòa tan Azi hịa tan MT ĐỘ HỊA TAN – DƯỢC ĐIỂN ANH 2020 Dung môi A K2HPO4 0.67% - Acetonitril (40; 60) + H3PO4 Dung môi A pH 8.0 (1) Sau 45 phút, lấy mẫu dd chứa Azi MTHT, lọc - Pha loãng lượng dịch lọc với mơi trường hịa tan để tạo dung dịch chứa 0,027% Azithromycin Kali hydrophosphat 0.67% - Axetonitril (40; 60) Pha động Điều kiện sắc ký Tính phù hợp hệ thống Yêu cầu: (3) (2) 0.027% Azi chuẩn Trong MTHT + KOH 56% 0.027% Azi & Tạp chất A chuẩn Trong dm A Dung dịch pH 11.0 - Cột kích thước (25 cm x 4,6 mm) nhồi vinyl octa-decylsilyl; - Tốc độ dòng 1ml/phút; - Nhiệt độ cột 40 °; Bước sóng phát 210 nm; Bơm 20 μl dung dịch - Trên sắc ký đồ: Dung dịch (2), hệ số đối xứng (Tf) nằm khoảng 0.8-2.0 Trên sắc ký đồ: Dung dịch (3), Độ phân giải (Rs) 1.5 Khơng 75 % (Q) lượng Azithromycin, C38H72N2O12, so với lượng ghi nhãn hòa tan 45 10 ĐỘ HÒA TAN DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM V Cách tiến hành Xác định lượng Azithromycin hoà tan phương pháp sắc ký lỏng (Điều kiện sắc ký pha động mô tả mục Định lượng) Pha động Methanol-nước-amoniac (80: 19,9: 0,1) Điều kiện sắc ký Dung dịch thử Dung dịch chuẩn Yêu cầu: - Cột kích thước (25 cm × 4,6 mm) nhồi pha tĩnh B (5 μm) - Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 215 nm - Tốc độ dịng:1,5 ml/min - Thể tích tiêm: 20 l Sau 45p hịa tan lấy phần dịch lọc lọc Cân xác Azithromycin chuẩn hịa tan mơi trường hịa tan dd có nồng độ tương đương với dd thử Khơng 75 % (Q) lượng Azithromycin, C38H72N2O12, so với lượng ghi nhãn hòa tan 45 Cách xác định lượng Azithromycin hòa tan theo DĐVN V 11 ĐỘ HỊA TAN Tính phần trăm Azithromycin (C38H72N2O12) hòa tan: DƯỢC ĐIỂN DƯỢC MỸ ĐIỂN 2020 ANH 2020 rU = đáp ứng peak dung dịch Thử rS = đáp ứng peak dung dịch Chuẩn Cs = nồng độ Azithromycin chuẩn dung dịch chuẩn (mg / mL) L = hàm lượng nhãn (mg/capsules) D = hệ số pha loãng dung dịch mẫu V = thể tích mơi trường, 900 ml u cầu: lượng hịa tan khơng nhỏ 75% lượng Azithromycin ghi nhãn 13 Bảng so sánh độ hòa tan theo DĐ Anh - Việt Nam - Mỹ 14 ĐỊNH LƯỢNG Pha động Dung dịch chuẩn DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM V Methanol-nước-amoniac (80: 19,9: 0,1) Hòa tan lượng Azithromycin chuẩn pha động để thu dung dịch có nồng độ Azithromycin khoảng 1,0 mg ml Cân xác lượng bột viên tương ứng với khoảng 50 mg azithromycin vào bình định mức 50 ml, thêm 30 ml pha động lắc siêu âm 15 phút Pha loãng pha động vừa đủ đến vạch, lắc đều, lọc Trong đó: X: khoảng yêu cầu cân tương ứng mcân = Dung dịch thử Pha loãng Cân lượng tương ứng 50mg Azi (mcân) Kết mcân 30ml pha động dm B Lắc siêu âm 15p Thêm vừa đủ đến vạch, lắc Hàm lượng Azithromycin C38H72N2O12 từ 90.0% - 100.0% so với lượng ghi nhãn 15 ĐỊNH LƯỢNG Pha động K2HPO4 0.67% - Acetonitril (40; 60) DƯỢC ĐIỂN ANH 2020 + H3PO4 Pha động pH 8.0 (1) Cân xác lượng bột tương ứng với 0.5g Azithromycin hòa tan với 40 ml pha động bình định mức 100ml, thêm pha động vừa đủ đến vạch, lắc đều, lọc Pha loãng 1ml dịch lọc 10ml pha động Pha loãng Cân lượng tương ứng 0.5g Azi Mcân 40ml pha động Thêm vừa đủ đến vạch pha động 1ml dịch lọc 10ml Lọc (2) 0.05% mg/ml Azithromycin chuẩn pha động (3) 0.05% mg/ml Azithromycin chuẩn tạp chất Azithromycin A chuẩn pha động Kết quả: Hàm lượng Azithromycin C38H72N2O12 từ 95.0% - 105.0% so với lượng ghi nhãn 16 ĐỊNH LƯỢNG Pha động 5.8g kali phosphate 2130ml nước 870ml Axetonitril + 6ml KOH 10N Dung dịch 0.165 mg/ml Azithromycin chuẩn gốc chuẩn Axetonitril Dung dịch gốc thử Dung dịch thử DƯỢC ĐIỂN MỸ 2020 DD điều chỉnh tới pH 11.0 ± 0.1 Lọc Dung dịch Chuẩn 3.3 µg / ml Azi từ dung dịch gốc chuẩn pha động − Lấy 20 chế phẩm Cho 1mg/ml Azi khan acetonitril 70% Lắc 30 phút Pha loãng Axetonitril đến vạch định mức − Lấy 40 ml dung dịch đem quay ly tâm − Lấy phần làm dung dịch thử 3,2 µg / mL Azithromycin từ dung dịch gốc thử rU = đáp ứng peak dung dịch Thử Tính phần trăm lượng azithromycin: rS = đáp ứng peak dung dịch Chuẩn CS = nồng độ Azithromycin dung dịch chuẩn (mg / mL) CU = nồng độ lý thuyết Azithromycin dung dịch thử (µg / mL) P = hiệu lực azithromycin Azithromycin (µg / mg) F = hệ số chuyển đổi, 0,001 mg / μg Kết quả: Hàm lượng Azithromycin C38H72N2O12 từ 90.0% - 100.0% so với lượng ghi nhãn 17 Bảng so sánh định lượng theo DĐ Anh - Việt Nam - Mỹ GIỚI HẠN TẠP CHẤT – DĐ ANH Pha động A Pha động B Hỗn hợp dung môi Hòa tan 1.8g dinatri hydrophosphat khan (TT) vào 1000ml nước điều chỉnh đến pH 8.9 H3PO4 loãng (TT) dung dịch NaOH (TT) Methanol – Acetonitril (250; 750) DD đệm pH 10.0 – Acetonitril – Methanol (350; 300; 350) Dung dịch thử Hòa tan 0.2g chế phẩm 25ml hỗn hợp dung môi Dung dịch đối chiếu (1) Pha loãng 1ml dd thử thành 100ml hỗn hợp dung mơi Dung dịch đối chiếu (2) Hịa tan Azi chuẩn 1ml hỗn hợp dung môi dùng để đánh giá tính phù hợp hệ thống (chứa tạp chất F, H, J) Dung dịch đối chiếu (3) Hòa tan 8.0mg Azi chuẩn 1ml hh dung môi dùng để định tính pic (chứa tạp chất A,B,C,E,F,G,I,J,L,M,N,O,P ) GIỚI HẠN Diện tích pic tạp B ≤ 2l diện tích pic dd đối chiếu (1) Tổng diện tích pic tạp D J ≤ 0.5l diện tích pic dd đối chiếu (1) Diện tích pic tạp chất khác ≤ 0.2l diện tích pic dd đối chiếu (1) Diện tích pic tạp A,C,E,F,H,I,L,M,N,O,P ≤ 0.5l diện tích pic dd đối chiếu (1) Diện tích pic tạp G ≤ 0.2l diện tích pic dd đối chiếu (1) Tổng diện tích pic tạp ≤ 3l diện tích pic dd đối chiếu (1) TỔNG KẾT Nhìn chung yêu cầu kỹ thuật viên nang tương đối giống tiêu CHỈ TIÊU Tính chất Định tính Độ đồng khối lượng Độ hòa tan Định lượng Tạp chất liên quan DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM V DƯỢC ĐIỂN ANH DƯỢC ĐIỂN MỸ Nang cứng, bột màu trắng (hoặc trắng ngà), không mùi, vị đắng PP sắc ký lỏng PP quang phổ hồng ngoại PP sắc ký lỏng Tiến hành 20 đơn vị Chênh lệch 7.5% so với KLTB Đạt: ≤ không x2 PP sắc ký lỏng - Tiến hành 10 đơn vị - Chênh lệch 7.5% so với KLTB - Đạt: ≤ khơng x2 Khơng 75 % (Q) lượng Azithromycin, C38H72N2O12, so với lượng ghi nhãn hòa tan 45 HL Azi 90.0% - 100.0% so với lượng ghi nhãn HL Azi 95.0% - 105.0% so với lượng ghi nhãn HL Azi 90.0% - 100.0% so với lượng ghi nhãn 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO Dược điển Việt Nam: [1] Hội đồng Dược điển (2017), “Chuyên luận 114, Azithromycin, nang”, Dược điển Việt Nam V, tập 1, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 128-129 [2] Hội đồng Dược điển (2017), “Phụ lục 1.13 – Thuốc nang”, Dược điển Việt Nam V, tập 2, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr PL-19-PL20 [3] Hội đồng Dược điển (2017), “Phụ lục 11.2 – Phép thử độ đồng hàm lượng”, Dược điển Việt Nam V, tập 2, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr PL-249 [4] Hội đồng Dược điển (2017), “Phụ lục 11.3 – Phép thử độ đồng khối lượng”, Dược điển Việt Nam V, tập 2, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr PL-249-PL-250 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO Dược điển Anh: [1] The British Pharmacopoeia Commission (2020), “Volume III - Azithromycin Capsules”, British Pharmacopoeia (2020), pp 179-180 [2] The British Pharmacopoeia Commission (2020), “Volume III – General Monographs (Capsules)”, British Pharmacopoeia (2020), pp 42-44 [3] The British Pharmacopoeia Commission (2020), “Volume V – Appendix XII C”, British Pharmacopoeia (2020), pp A408-A409 Dược điển Mỹ: [1] U.S Pharmacopeia (2020), “Volume I - Azithromycin Capsules”, The United States Pharmacopeia (2020), USP 43 NF 38, pp 450-451 [2] U.S Pharmacopeia (2020), “Volume IV – General test and assays”, The United States Pharmacopeia (2020), USP 43 NF 38, pp 6410 21 01 “ Câu hỏi lượng giá ” 22 Câu 1: Theo DĐVN V kiểm tiêu độ đồng khối lượng với viên nang Azithromycin 250 mg % chênh lệch so với khối lượng trung bình ? 10% 7.5% A B 5% D 6.5% C 23 Câu 2: Theo Dược điển Mỹ độ hòa tan phải đạt yêu cầu: ≥ 75% lượng Azithromycin so với nhãn hòa tan 45p ≥ 95% lương Azithromycin so với nhãn hòa tan 30p A B ≥ 75% lương Azithromycin so với nhãn hòa tan 30p D ≥ 75% lương Azithromycin so với nhãn hòa tan 60p C 24 Câu 3: Pha động sử dụng kiểm nghiệm Azithromycin theo Dược điển Anh? Ethanol - Nước – Amoniac (20 : 10 : 10) Methanol - Nước - Amoniac (80 : 19 : 0,1) A B Kali hydrophosphat - Axetonitril - Amoniac (10 : : 6) D Kali hydrophosphat - Axetonitril (40 : 60) C 25 THANK FOR watching 26 ... (2017), ? ?Chuyên luận 114, Azithromycin, nang? ??, Dược điển Việt Nam V, tập 1, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 128-129 [2] Hội đồng Dược điển (2017), “Phụ lục 1.13 – Thuốc nang? ??, Dược điển Việt Nam V, tập... LƯỢNG Dược điển Việt Nam >2mg 2% (kl/kl) Dược điển Anh >2mg 2% (kl/kl) Tiến hành 20 đơn vị ngẫu nhiên Cân khối lượng nang. Tháo rời hai vỏ nang, dùng lau vỏ cân khối lượng vỏ mthuốc nang = m nang thuốc. .. kỹ thuật viên nang tương đối giống tiêu CHỈ TIÊU Tính chất Định tính Độ đồng khối lượng Độ hòa tan Định lượng Tạp chất liên quan DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM V DƯỢC ĐIỂN ANH DƯỢC ĐIỂN MỸ Nang cứng, bột