Tài liệu Nghiên cứu thành phần lipit, axit béo của san hô thủy tức Millepora thu thập

Tai lieu, luan van1 of 102 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Đặng Thị Minh Tuyết NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LIPID, AXIT BÉO CỦA SAN HÔ THỦY TỨC MILLEPORA THU THẬP TẠI VÙNG BIỂN VIỆT NAM THEO CÁC THÁNG TRONG NĂM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Hà Nội - năm 2020 khoa luan, tieu luan1 of 102 Tai lieu, luan van2 of 102 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Đặng Thị Minh Tuyết NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LIPID, AXIT BÉO CỦA SAN HÔ THỦY TỨC MILLEPORA THU THẬP TẠI VÙNG BIỂN VIỆT NAM THEO CÁC THÁNG TRONG NĂM Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Đặng Thị Phương Ly Hà Nội - năm 2020 khoa luan, tieu luan2 of 102 Tai lieu, luan van3 of 102 i Lời cam đoan Luận văn công trình nghiên cứu tơi hướng dẫn khoa học TS Đặng Thị Phương Ly Các số liệu kết luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Đặng Thị Minh Tuyết khoa luan, tieu luan3 of 102 Tai lieu, luan van4 of 102 ii Lời cảm ơn Đầu tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Đặng Thị Phương Ly, người cô tâm huyết hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình hồn thiện luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh đạo Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên (VAST), Trung tâm nghiên cứu Quốc gia sinh vật biển – Phân viện Viễn Đông – LB Nga, GS.TS Phạm Quốc Long, PGS.TS Đoàn Lan Phương anh chị Phịng Hóa sinh hữu - Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên giúp sở vật chất, trang thiết bị, dụng cụ thí nghiệm, kiến thức thực nghiệm…để tơi hồn thành tốt luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo thầy cô Học Viện Khoa học Cơng nghệ, Khoa Hóa học giảng dạy, hỗ trợ, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập thực luận văn Tơi xin gửi lời tri ân tới gia đình, bàn bè, người thân ln động viên để tơi có động lực cơng việc hồn thành tốt luận văn Xin chân thành cảm ơn! khoa luan, tieu luan4 of 102 Tai lieu, luan van5 of 102 iii Danh mục kí hiệu chữ viết tắt Kí hiệu Tiếng anh Tiếng việt CAEP Ceramide aminoethylphosphonate Ceramide aminoethylphosphonate DG Diacyl glycerol Diacyl glycerol FFA Free fatty acid Axit béo tự GC–MS Gas chromatography–mass spectrometry Sắc ký khí – khối phổ PC Phosphatidylcholine Phosphatidylcholine PE Phosphatidylethanolamine Phosphatidylethanolamine PI Phosphatidylinositol Phosphatidylinositol PL Polar lipid Lipid phân cực PS Phosphatidylserine Phosphatidylserine PUFA Polyunsaturated Fatty Acid Axit béo đa nối đôi ST Sterol Sterol MADAG Monoalkyldiacylglycerol Monoalkyldiacylglycerol MSC Mesenchymal stem cells Tế bào gốc trung mô TLC Thin-layer chromatography Sắc ký lớp mỏng TAG Triacylglycerol Triacylglycerol W Wax ester Sáp khoa luan, tieu luan5 of 102 Tai lieu, luan van6 of 102 iv Danh mục bảng Bảng 2.1 Các mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla nghiên cứu 18 Bảng 3.1 Hàm lượng lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla nghiên cứu 26 Bảng 3.2 Thành phần lớp chất lipid lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 29 Bảng 3.3 Thành phần lớp chất phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 36 Bảng 3.4 Thành phần hàm lượng axit béo lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla (%) 41 khoa luan, tieu luan6 of 102 Tai lieu, luan van7 of 102 v Danh mục hình Hình 1.1 San hô thủy tức Millepora platyphylla Hình 1.2 Sự phân bố dạng phân tử alkenylacyl, alkylacyl diacyl số lớp chất phospholipid lồi san hơ thủy tức MP: Millepora platyphylla; MD: Millepora dichotoma; AS: Allopora steinegeri lồi san hơ mềm SM: Sinularia macropodia; CS: Capnella sp.; XS: Xenia sp.; GR: Gersemia rubiformis; GF: Gersemia fruticosa [25] 11 Hình 1.3 Hàm lượng (%) axit béo C20 – C22 n-6, n-3 mẫu san hô thủy tức thu thập vùng biển Việt Nam vùng biển Okhotsk [25] 12 Hình 1.4 Sự sử dụng axit béo chìa khóa sinh tổng hợp phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora thu thập vùng biển Việt Nam Allopora thu thập vùng biển Okhotsk [25] 12 Hình 3.1 Sắc kí đồ phân tích hàm lượng lớp chất lipid chương trình phân tích hình ảnh Sorbfil TLC Videodensitometer DV (Krasnodar, LB Nga) 28 Hình 3.2 Sắc kí đồ phân tích hàm lượng lớp chất phospholipid chương trình Sorbfil TLC Videodensitometer DV (Krasnodar, LB Nga) 35 Hình 3.3 Phổ GC methyl ester axit béo lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla Mp.1 40 khoa luan, tieu luan7 of 102 Tai lieu, luan van8 of 102 vi Danh mục biểu đồ Biểu đồ 3.1 Tỉ lệ hàm lượng lipid tổng tính trọng lượng khơ / hàm lượng lipid tổng trọng lượng tươi mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 27 Biểu đồ 3.2 Hàm lượng lớp chất axit béo tự (FFA) lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 30 Biểu đồ 3.3 Hàm lượng lớp chất sterol (ST) lipid phân cực (PL) lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 31 Biểu đồ 3.4 Hàm lượng lớp chất monoalkyldiacylglycerol (MADAG) sáp (W) lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 32 Biểu đồ 3.5 Hàm lượng lớp chất triacylglycerol (TAG) lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 33 Biểu đồ 3.6 Hàm lượng lớp chất phosphatidylinositol (PI) phosphatidylserine (PS) tổng phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 37 Biểu đồ 3.7 Hàm lượng lớp chất ceramide aminoethylphosphonate (CAEP) tổng phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 38 Biểu đồ 3.8 Hàm lượng lớp chất phosphatidylchonline (PC) phosphatidylethanolamine (PE) tổng phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 39 Biểu đồ 3.9 Hàm lượng axit béo no axit béo không no lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 43 Biểu đồ 3.10 Hàm lượng axit béo 12:0, 14:0, 16:0, 18:0 lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 44 Biểu đồ 3.11 Tỉ lệ hàm lượng axit béo n-3/n-6 thành phần axit béo mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 45 Biểu đồ 3.12 Hàm lượng axit béo 20:4n-6, 20:5n-3, 22:5n-6, 22:6n-3 thành phần axit béo mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 46 khoa luan, tieu luan8 of 102 Tai lieu, luan van9 of 102 vii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Danh mục kí hiệu chữ viết tắt iii Danh mục bảng iv Danh mục hình v Danh mục biểu đồ vi MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1.1.Giới thiệu lớp Hydrozoa 1.1.2.Vài nét san hô thủy tức Millepora 1.1.3.Tình hình nghiên cứu san hơ thủy thức 1.2 GIỚI THIỆU VÀ Ý NGHĨA CỦA LIPID VÀ AXIT BÉO 13 1.2.1.Giới thiệu lipid axit béo 13 1.2.2.Ý nghĩa việc nghiên cứu lipid, axit béo 15 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1.NGUYÊN LIỆU 18 2.2.SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU CHUNG 23 2.3.PHƯƠNG PHÁP 23 2.3.1 Phương pháp chiết lipid tổng 23 2.3.2 Phương pháp xác định thành phần hàm lượng lớp chất lipid 24 2.3.3.Phương pháp xác định thành phần hàm lượng lớp chất phospholipid 24 khoa luan, tieu luan9 of 102 Tai lieu, luan van10 of 102 viii 2.3.4 Phương pháp xác định thành phần hàm lượng axit béo 25 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1 HÀM LƯỢNG LIPID TỔNG TRONG CÁC MẪU SAN HÔ THỦY TỨC MILLEPORA PLATYPHYLLA 26 3.2 THÀNH PHẦN VÀ HÀM LƯỢNG CÁC LỚP CHẤT LIPID CỦA CÁC MẪU SAN HÔ THỦY TỨC MILLEPORA PLATYPHYLLA 28 3.3 THÀNH PHẦN VÀ HÀM LƯỢNG CÁC LỚP CHẤT PHOSPHOLIPID CỦA CÁC MẪU SAN HÔ THỦY TỨC MILLEPORA PLATYPHYLLA 34 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 khoa luan, tieu luan10 of 102 Tai lieu, luan van73 of 102 Mp.6 Mp.7 Mp.8 khoa luan, tieu luan73 of 102 Tai lieu, luan van74 of 102 Mp.9 Mp.10 Mp.11 khoa luan, tieu luan74 of 102 Tai lieu, luan van75 of 102 Mp.12 khoa luan, tieu luan75 of 102 Tai lieu, luan van76 of 102 PHỤ LỤC Phổ GC methyl ester axit béo lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla Mp.1 9/16:1n-7 4.0 20/ 3/14:0 4.5 38/22:6n-3 8/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 3.5 -0.5 2.5 khoa luan, tieu luan76 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 36/22:5n-6 34/ 37/22:5n-3 35/22:4n-6 33/20:5n-3 32/20:4n-3 0.0 31/20:4n-6 0.5 30/ 1.0 29/20:1n-9 1.5 27/18:4n-3 2.0 28/20:0 2.5 1/12:0 2/ 4/ 5/ 6/DMA 7/ 10/ 12/ 11/ 13/ 15/ 14/Phyt 17/DMA-18:0 18/ 16/17:1 19/ 21/18:1n-9 22/ 23/ 24/18:2n-6 25/18:3n-6 26/18:3n-3 3.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 2.0 1.0 0.0 -1.0 2.5 khoa luan, tieu luan77 of 102 3.0 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 47/22:5n-6 46/22:4n-6 48/22:5n-3 45/ 44/22:1 42/20:5n-3 43/22:0 41/20:4n-3 40/20:4n-6 38/ 39/ 37/ 35/ 36/20:1n-9 4.0 33/18:4n-3 34/20:0 8.0 7.0 49/22:6n-3 23/18:0 24/18:1n-9 11/16:0 9.0 31/ 32/18:3n-3 6.0 3/14:0 uV(x10,000) 10.0 Chromatogram 25/18:1n-7 26/ 27/ 28/18:2n-6 29/ 30/18:3n-6 1/12:0 2/ 4/ 5/ 6/ 8/ 7/ 10/ 9/DMA 12/ 14/16/ 15/ 17/Phyt 18/13/16:1n-7 20/17:1 19/ 21/ 22/ Tai lieu, luan van77 of 102 Mp.2 5.0 25.0 27.5 30.0 2.0 1.0 0.0 -1.0 2.5 khoa luan, tieu luan78 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 24/ 25/20:1n-9 23/20:0 21/18:3n-3 31/20:5n-3 32/22:0 30/20:4n-3 27/ 28/ 29/20:4n-6 20.0 22.5 25.0 36/22:5n-6 35/22:4n-6 37/22:5n-3 34/ 22/18:4n-3 19/18:2n-6 20/18:3n-6 33/22:1 3.0 26/ 4.0 18/ 6.0 5.0 38/22:6n-3 15/18:0 7.0 16/18:1n-9 17/18:1n-7 9.0 7/16:0 uV(x10,000) 10.0 Chromatogram 8/ 10/ 9/16:1n-7 12/Phyt 11/ 13/ 14/17:1 1/12:0 2/ 3/14:0 4/ 5/ 6/ Tai lieu, luan van78 of 102 Mp.3 8.0 27.5 30.0 1.0 -1.0 0.0 3.0 2.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan79 of 102 5.0 7.5 10.0 24/18:4n-3 25/20:0 26/ 27/20:1n-9 23/18:3n-3 20/18:2n-6 21/ 22/18:3n-6 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 38/22:5n-3 37/22:5n-6 36/22:4n-6 35/22:1 33/20:5n-3 34/22:0 32/20:4n-3 29/ 30/ 31/20:4n-6 28/ 4.0 5.0 39/22:6n-3 18/18:1n-9 19/18:1n-7 9.0 17/18:0 7/16:0 uV(x10,000) 10.0 Chromatogram 2/14:0 3/ 4/ 5/ 6/8/ 9/16:1n-7 10/ 12/ 11/ 14/ 13/Phyt 15/ 16/17:1 1/12:0 Tai lieu, luan van79 of 102 Mp.4 8.0 7.0 6.0 25.0 27.5 30.0 1.0 -1.0 0.0 2.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan80 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 39/22:5n-3 26/18:4n-3 27/20:0 38/22:5n-6 37/22:4n-6 36/22:1 34/20:5n-3 35/22:0 33/20:4n-3 32/20:4n-6 28/ 29/20:1n-9 25/18:3n-3 30/ 31/ 4.0 22/18:2n-6 23/ 24/18:3n-6 7.0 6.0 40/22:6n-3 9.0 19/18:0 7/16:0 uV(x10,000) 10.0 Chromatogram 20/18:1n-9 21/18:1n-7 2/14:0 3.0 3/ 5/ 4/ 6/8/ 10/ 9/16:1n-7 11/ 12/ 14/ 13/Phyt 15/ 16/ 17/17:1 18/ 1/12:0 Tai lieu, luan van80 of 102 Mp.5 8.0 5.0 25.0 27.5 30.0 0.5 -0.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan81 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 32/22:4n-6 34/22:5n-3 31/22:1 29/20:5n-3 30/22:0 28/20:4n-3 27/20:4n-6 33/22:5n-6 22/18:4n-3 2.5 26/ 23/20:0 3.0 24/ 25/20:1n-9 21/18:3n-3 17/ 18/18:2n-6 20/18:3n-6 19/ 1.5 15/18:1n-9 2.0 16/18:1n-7 4.5 4.0 35/22:6n-3 14/18:0 7/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 2/14:0 3/ 4/ 6/ 5/ 8/ 10/ 9/16:1n-7 12/ 11/Phyt 13/17:1 1/12:0 Tai lieu, luan van81 of 102 Mp.6 3.5 25.0 27.5 30.0 0.5 -0.5 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan82 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 26/20:5n-3 27/22:0 25/20:4n-3 24/20:4n-6 23/20:1n-9 21/18:4n-3 22/20:0 20/18:3n-3 18/18:2n-6 19/18:3n-6 16/18:1n-9 17/18:1n-7 17.5 20.0 22.5 31/22:5n-3 30/22:5n-6 29/22:4n-6 4.0 3.5 32/22:6n-3 15/18:0 6/16:0 4.5 28/22:1 2.0 2/14:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 3/ 5/ 4/ 7/ 9/ 8/16:1n-7 11/Phyt 10/ 12/ 13/ 14/17:1 1/12:0 Tai lieu, luan van82 of 102 Mp.7 3.0 2.5 25.0 27.5 30.0 0.5 -0.5 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan83 of 102 5.0 7.5 23/ 24/20:1n-9 20/18:3n-3 17/18:2n-6 19/18:3n-6 18/ 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 33/22:5n-3 31/22:4n-6 30/22:1 28/20:5n-3 29/22:0 27/20:4n-3 26/20:4n-6 32/22:5n-6 21/18:4n-3 22/20:0 2.5 25/ 2.0 15/18:1n-9 16/18:1n-7 3.5 3.0 34/22:6n-3 4.5 14/18:0 6/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 2/14:0 3/ 4/ 5/ 7/ 9/ 8/16:1n-7 11/ 10/Phyt 12/17:1 13/ 1/12:0 Tai lieu, luan van83 of 102 Mp.8 4.0 25.0 27.5 30.0 0.5 -0.5 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan84 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 33/22:5n-3 31/22:4n-6 30/22:1 28/20:5n-3 29/22:0 27/20:4n-6 22/18:4n-3 32/22:5n-6 23/20:0 2.5 24/20:1n-9 21/18:3n-3 19/18:2n-6 20/18:3n-6 3.0 25/ 26/ 2.0 17/18:1n-9 18/18:1n-7 4.0 3.5 34/22:6n-3 4.5 16/18:0 7/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 2/14:0 3/ 4/ 6/ 5/ 8/ 10/ 9/16:1n-7 11/ 12/Phyt 13/ 14/ 15/17:1 1/12:0 Tai lieu, luan van84 of 102 Mp.9 25.0 27.5 30.0 0.5 -0.5 4.0 3.5 2.5 2.0 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan85 of 102 5.0 7.5 10.0 28/ 29/20:1n-9 12.5 15.0 33/20:4n-6 17.5 20.0 22.5 25.0 41/22:6n-3 39/22:5n-6 38/22:4n-6 40/22:5n-3 37/ 36/22:0 35/20:5n-3 34/20:4n-3 31/ 32/ 30/ 22/18:2n-6 26/18:4n-3 27/20:0 25/18:3n-3 23/ 24/18:3n-6 4.5 7/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 8/16:1n-7 9/ 11/ 10/ 12/ 13/Phyt 14/ 15/ 16/17:1 17/ 18/ 19/18:0 20/18:1n-9 21/18:1n-7 2/14:0 3.0 3/ 4/ 6/ 5/ 1/12:0 Tai lieu, luan van85 of 102 Mp.10 27.5 30.0 0.5 -0.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan86 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 38/22:1 37/22:0 20.0 22.5 42/22:5n-3 40/22:4n-6 25.0 29/18:4n-3 43/22:6n-3 41/22:5n-6 36/20:5n-3 34/20:4n-6 35/20:4n-3 32/ 33/ 39/ 30/20:0 31/20:1n-9 28/18:3n-3 4.5 9/16:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 2/14:0 3/ 4/ 8/5/ 7/DMA 6/ 10/16:1n-7 11/ 12/ 13/ 14/Phyt 15/ 16/17:1 17/ 18/DMA-18:0 19/ 21/18:0 20/ 22/18:1n-9 23/18:1n-7 24/ 25/18:2n-6 26/ 27/18:3n-6 1/12:0 Tai lieu, luan van86 of 102 Mp.11 27.5 30.0 0.5 -0.5 2.0 1.5 1.0 0.0 2.5 khoa luan, tieu luan87 of 102 5.0 7.5 10.0 12.5 34/20:4n-6 15.0 17.5 20.0 22.5 2.5 25.0 42/22:6n-3 40/22:5n-6 39/22:4n-6 41/22:5n-3 38/ 36/20:5n-3 3.0 37/22:1 35/20:4n-3 33/ 32/20:1n-9 3.5 30/18:4n-3 4.0 31/20:0 29/18:3n-3 11/ 12/ 13/ 14/ 16/ 15/Phyt 17/17:1 18/DMA-18:0 19/ 21/18:0 20/ 23/ 22/18:1n-9 24/ 26/18:2n-6 25/ 27/ 28/18:3n-6 4.5 9/16:0 10/16:1n-7 2/14:0 uV(x10,000) 5.0 Chromatogram 3/ 4/ 5/ 7/ 6/8/DMA 1/12:0 Tai lieu, luan van87 of 102 Mp.12 27.5 30.0 ... lượng axit béo n-3/n-6 thành phần axit béo mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla 45 Biểu đồ 3.12 Hàm lượng axit béo 20:4n-6, 20:5n-3, 22:5n-6, 22:6n-3 thành phần axit béo mẫu san hô thủy. .. phospholipid mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla thu thập 12 tháng - Phân tích thành phần hàm lượng axit béo mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla thu thập 12 tháng - Đánh giá kết thu tính... ester axit béo lipid tổng mẫu san hô thủy tức Millepora platyphylla Mp.1 Trong thành phần axit béo mẫu nghiên cứu, tổng cộng 22 axit béo nhận dạng bao gồm axit béo từ C12 tới C22, nhiều axit béo