DSpace at VNU: Nghiên cứu thành phần Lipit, axit béo và hoạt tính sinh học các mẫu sinh vật biển ngành da gai (Echinodermata) hải sâm, sao biển, cầu gai
TAP CHÍ KHOA HỌC DHQGHN, KHTN & CN, T.xx, sỏ' 4, 2004 N G H IÊ N C Ứ U T H À N H P H A N L IP IT , A X IT b é o v h o t t ín h S IN H H Ọ C CÁC M Ẩ U SIN H V Ậ T B IE N n g n h d a g a 11 ĩ ỉ ỉ (E C H IN O D E R M A T A ) H Ả I SÁM , S A O B IẾ N , C Â U G A I i P h m Q u ố c L o n g , L ê M a i H n g , C h â u V ă n M in h , T r ị n h T h ị T h u H n g , Đ ỗ H ữ u N g h ị, Đ o n L a n P h n g , c ầ m T h ị I n h , C h u Q u a n g T r u y ề n , Viện Hóa học Hợp chất thiên n h iên , Viện K hoa học Công nghệ Việt N a m N g u y ễ n T h ị V ĩn h , Đ o n V iệ t B ì n h Viện c ỏ n g nghệ S in h học, Viện K hoa học Công nghệ Việt N a m Mở đ ầ u Hải Sâm gọi đỉa biển (sea slug), loài động v ậ t k hông xương sông thường gập vịnh n h ữ n g nơi có n hiều đá ngầm biển khơi H ải sâm p h â n bô' n h iều nước trê n t h ế giới có n h iều lồi [9], nước ta có tru y ề n thơng từ lâu đời - ngư d â n đ n h b ắ t thường để chê biến ă n đặc sản, phơi sấy khô làm thực p h ẩ m thuốc Theo GS Đỗ T ấ t Lợi (2001), hải sâm bơ khơng n h â n sâm nên gọi sâm biên (h ả i sâm ) y học cổ truyền - h ải sâm xem n h loại thuốc bổ th ậ n , bổ âm, tr n g dương ích tinh, n h u ậ n táo, chữa lị, chữa viêm p h ế quản, th ầ n k in h suy nhược, cầm m áu, th n h p h ầ n lipit hải sâm có tác dụ ng chữa xơ vữa động mạch, h en suyễn Cầu gai (E chinoidea) thuộc họ cước bì (còn gọi da gai- E chiderm ata) T rứ n g cầu gai loại thực p h ẩm giàu din h dưỡng có mùi vị thơm ngon đặc biệt Ớ số nước châu Á T ru n g Quốc, N h ậ t Bản, H àn Quốc người ta có tậ p q u n ă n trứ n g cầu gai n h bố dưỡng th ể từ lâu đời [9,10] Ngày số nước châu Âu n h Pháp, Ý r ấ t coi trọng loại thực p h ẩm v ỏ cầu gai có tác dụng chữa mỏi mệt, đ au nhức, giải nhiệt, chông viêm [10] Ớ nước ta, Cầu Gai có n h iều loại d ân gian sử d ụ n g n h vị thuốíc bổ dưỡng th ê từ lâu đời Sao biển ( Sea star) thuộc họ Da gai- E c h id e rm a ta biết đến trê n t h ế giới đôi tượng tiềm n ă n g chứa ch ất có h o t tín h sinh học cao k h n g u, chông viêm [10] Sao biển cũ n g có n h iều loại sử d ụn g n h vị thuốc y học cổ tru y ề n dân gian nưỏc ta N hững ng h iên cứu hóa học đơi tượng r ấ t sơ khai, có sơ" thông tin b ả n n h ấ t th n h p h ầ n sinh hóa như: h m lượng protein, axit am in, gluxit, hoocmon stero it th n h p h ầ n nguyên tố kim loại như: Ca; P; Fe; K ( N guyễn Thị Vĩnh Cs, 1999-2001) Đã đên lúc không th ể nghĩ tới việc ng hiên cứu gây nuôi, khai 11 Phạm Quốc Long, Lê Mai Hương 12 thác nguồn tài nguyên sinh v ậ t biển quý phục vụ cho nội tiêu x u ấ t k h ẩ u , mà phải tiến h n h n h ững nghiên cứu sâu ch ất có h oạt tín h sin h học chứa tro n g đó; p h â n lập chứng minh cấu trúc, củng n h tìm hiểu b ả n ch ất tác d ụ n g sinh lí ch ú n g với thể sơng - qua n h ằ m tạo sản phẩm cao cấp cho y, dược đê phục vụ sức khỏe cộng đồng N ghiên cứu th n h p h ầ n lipit axit béo 04 đơi tượng tiêu biểu cho lồi: hải sâm, cầu gai biển thuộc họ da gai: E chiderm ata, n h k ế t th nghiệm sơ inưitro số h o t tín h có chọn lọc ch ún g đề cập đến ỏ báo n hằm giải tro n g n hữ n g v ấn đề cần th iế t phải tiế n h n h nghiên cứu sâu chất có h oạt tín h sinh học m nêu N g u y ê n liệ u v p h n g p h p M ẫu sin h vật biến: Các m ẫu sinh v ậ t biển: H ải sâm đen (.H olothuria m a rten sii Semper); c ầ u Gai (E chinothrix calam aris (Pallas)); Sao biển (Asterina sp l.y, T rứ n g c ầ u Gai T h a n h Hoá (Astropyga d ia ta ), th u th ậ p tạ i Q u ả n g ninh, T h a n h hóa từ th n g 03/2003-05/2003 sau xử lí m ẫu bảo q u ả n theo tiêu c h u ẩn quốc t ế qui định cho m ẫu sin h vật biển, m ẫu chuyển Hà nội sử dụng để nghiên cứu hóa học h o t tín h sinh học, m ẫu chuyên gia p h ân loại lưu giữ tiêu b ản [1] P hân tích h àm lượng L ip it tống (% so với trọng lượng m ẫ u tươi): Tiến h n h theo phương pháp: B lig h E.G a n d D yer W J (1959) đôi với m ẫu sinh v ật biển [2] P hân tích th n h p h ầ n a xit béo Tiến h n h theo phương pháp p h â n tích tiêu c h u ẩn quốc tế: Tiêu ch u ẩ n IS O /F D IS 5590:1998, LB Đức [3] Các m ẫu ph ân tích dạng metyl este axit béo trê n m áy GC-MSIi: Máy sắc ký khí HP-6890, ghép nối với M ass Selective D etector A gilent 5973; Cột m ao quản: HP-5MS -0.25(m * 30m *0.25mm); Khí mang: He; Chương trìn h n h iệ t độ: 80(1 min.) - 40/ -150 (lm in.) -10/min - 260 (lOmin.); có sử dụng th viện phổ khôi: W ILEY275.L NIST 98.L Đ ánh giá hoạt tín h sin h học dịch chiết: Các m ẫu sinh v ậ t biển xử lý, tạo dịch chiết th nghiệm h o t tính sin h học theo qui trìn h chung theo tiêu c h u ẩn quôc t ế qui định [5] ♦ T h ứ hoạt tính k h n g v s v kiếm đ ịn h (A ntim icrobial a c tivity assay) Tạp chi Khoa học Đ H Q G H N K H T N & C N T.xx S ố4, 2004 Nghiên cứu thành phần lip ii, axit béo 13 Thử hoạt tín h k h n g vi sinh v ật b ằ n g phương pháp k h o a n h giấy lọc đ ặ t bê m ặt thạch theo dược điên Việt N am III [6] trê n phiến vi lượng 96 giếng mẫu chiết theo phương p h p đại V anden B ergher Vlietlinck (1994) [7] K h án g sinh kiểm định bao gồm: A mpixilin vi k h u ẩ n Gr(+), T etracylin vi k h u ẩ n Gr(-), N ystatin, A m photericin B đôi với n ấ m sợi n ấm m en cho C hủng vi sinh v ậ t kiểm định bao gồm : - Vi k h u ẩ n G r (-): E scherichia coli (ATC C 25922 ) P seudom onas aeruginosa (A TC C 25923 ) - Vi k h u ẩ n Gr(+): B a cillu s su b tillis (ATC C 27212 ) Staphylococcus aureus (A T C C 12222) - N ấm mốc: A sp erg illu s niger439 F u sa riu m oxysporum LM 42 - N ấm men: Saccharom yces cerevisiae (ATCC7754) C a n d id a albicans S H 20 - Đọc kết quả: M ẫu thơ có MIC 200^g/ml; m ẫ u tin h có MIC 50fig/ml có h o t tính ♦ T h nghiệm hoạt tín h chống oxy hoá hệ DPPH (A n tio xyd a n t) P h ả n ứng d ự a trê n nguyên lý n hư sau: D PP H (1,1- Diphenyl-2-pycril hydrazyl, Sigma) có kh ả n ă n g tạo gốc tự bền tron g d un g dịch EtO H bão hồ H oạt tính chơng ơxy hố đ n h giá thơng qua giá trị h ấp p h ụ n h sá n g dịch th í nghiệm so với đồi chửng đọc trê n m áy Elisa bước sóng 515nm T hí nghiệm tiến h n h theo phương pháp tác giả Davies & ctv (1998) [8]; Shela G oinstein & ctvn (2003) [9] Giá trị tru n g bình s c % (Scavenging capacity) đưa vào chương trìn h xử lý số liệu Excel window tìm % tru n g b ìn h ± độ lệch tiê u c h u ẩn phép th lặp lại lần, lấy giá trị TB Các m ẫ u có giá trị: s c >30%, coi có biểu dương tín h đế tiến h n h bước nghiên cứu ♦ T h nghiệm g â y độc t ế bào invitro (C ytotoxicity a ctivity assay) Theo phương p h áp L ikhiw itayaw uid K.’e t al đan g tiế n h n h viện nghiên cứu u n g th Quốc gia Mỹ (NCI) [4] D òng tê bào: - Dòng KB ( H u m a n epidem oid carcinom a-ung th biểu mơ) từ phòng th í nghiệm Bioassay trư ờng Đ ại học Dược Illinois- USA - Dòng FI ( Fibril sarcom a of U teu s-u n g th m àng tử cung) Tạp chí Khoa học Đ H Q G H N KH TN & CN T.xx Số4 2004 Phạm Quốc Long, Lc Mai Hươnu 14 - Dòng RD (ung th m n g tim -R h ab d o sarco m a) từ Viện VSDT TƯ Đ ọc k ế t q u ả : M ẫu th ô cho giá trị IC50 < 20 Ịig/ml; m ẫ u tin h cho giá trị IC50 < ng/ml, đ n h giá có h o t tín h gây độc t ế bào K ế t q u ả v t h ả o l u ậ n 3.1 H m lư ợ n g L ip it tổ n g sô H m lượng L ipit tổ n g SCI ( % so với m ẫ u tươi ) 04 m ẫu sin h v ậ t biển đ ã xác định, tê n kh o a học, thời g ia n v địa điểm th u m ẫ u ghi trê n b ả n g B ản g 1: Hàm lượng Lipit tổng số STT T ên Việt N a m Kí h iệu m ẫ u p h â n tích Thời gian & địa điếm th u m ẫu H m lượng Lipit tổ n g số [% so với m ẫ u tươi] H SI03.03 03/03 Q u ản g N inh 0.58 H ải S âm đen (H o lo th u ria m a rte n sii S em p er) C ầu G (.A stro p yg a d ia ta ) S a o B iế n (A ste rin a s p ĩ.) T rứ n g C ầu G (A stro p yg a d ia ta ) CGI 03.03 SBI 03.03 TCGI 05.03 03/03 Q uảng N inh 03/03 Q uảng N inh 05/03 T h a n h hóa 0.63 0.68 9.97 H àm lượng Lipit tổ n g số H ải sâm (0,58%); c ầ u gai (0,63%); Sao biển (0.68%) mức t r u n g b ìn h c ũ n g p h ù hợp vói sơ" liệu p h â n tích tài liệu quốc tê (S vetashev,1996; A c k m an 1997) tro n g nước (Lâm Ngọc T râm , 1999) R iêng h m lượng Lipit tổng sô" c ủ a trứ n g c ầ u gai r ấ t cao (9,97%), điều giá trị d in h dường đặc biệt đổì tư ợ ng 3.2 T h n h p h ầ n c c a x it béo T h n h p h ầ n h m lượng axit béo tồ n tạ i lipit loại đôi tượng nguyên liệu tự nhiên , q u y ế t đ ịn h đ ến b ả n c h ấ t giá tr ị th ục tiễn loại n g u y ê n liệu Trong đối tượng sin h v ậ t biển, ngồi có m ặ t a x it béo thơng d ụn g thườ ng có tro n g nguyên liệu tự n h iê n tr ê n c ạn như: M yristic C14:0, P alm itic C16:0, Stearic C18:0, Oleic C18:1, Linoleic C18:2 A rachidonic C20:4 (AA); có th a m gia a x it béo không no m ạch dài với h o t tín h s in h học cao, đặc t h ù riêng có tro ng sin h v ậ t biển Eicosapentaeno ic C20:5 ( EPA) D ocosahexaenoic C22:6 (DHA) K ết q u ả p h â n tích t h n h p h ầ n v h m lượng axit béo (% so với tổ ng a x it béo) 04 m ẫu s in h v ậ t biên r a t r ê n b ả n g Tạp chi Khoa học ĐHQGHN, KHTN & CN, ỉ XX s ổ 4, 2004 Nghiên cứu thành phan lipil, axil héo B 2: Thành phẩn axit béo 04 mẫu sinh vật biến TT A x it b é o 10 11 12 13 14 lõ 16 17 18 19 C14:0 C15:0 C :l(n -7 ) C16:0 C17:0 C18:3 C 18:2(n-6) C l :l( n - ) C18:0 C19:0 C20:4 (n-6) (AA) C20:5(n-3) (E P A ) C20:2 C :l(n -9 ) C20:0 C21:0 C22:6(n-3) (DHA) O th e rs T ống a x it béo no Tông ax it béo k h ô n g no 20 H ải sâm đ e n [%] 2.97 2.37 11.30 10.15 1.45 1.32 0.67 5.39 5.67 0.54 8.99 8.55 S ao b iế n [%] 2.12 3.21 3.31 9.10 0.83 C ầu gai [%] 19.42 - - - - 9.14 7.50 3.28 9.31 5.47 5.82 10.12 1.08 1.02 8.59 2.35 - - 7.02 15.97 - T r ứ n g c ầ u g a i [%] 8.67 1.80 6.64 18.82 1.11 - 6.72 6.79 9.13 11.94 1.73 10.54 4.76 0.45 8.18 7.83 4.76 12.25 - - - - - 8.55 2.02 0.82 1.13 28.11 25.99 - - 28.69 28.14 12.07 37.74 2.51 9.95 35.61 45.90 43.17 50.19 54.44 T h n h phần h àm lượng ax it béo tro n g lồi nói c h u n g đêu có ch ứ a loại axit béo phổ d ụn g tro n g th n h p h ầ n sinh v ậ t biển, lồi đ ều có h m lượng a x it béo không no, đa nối đơi tương đối cao (41,2-50,19%), lồi có m ặ t a x it béo r ấ t q u a n trọng th ể sông AA với h m lượng (6,72-9,31%) T uy n h iê n có m ột s ố k h c biệt n hư sau: - Hải sâm đen: tro ng hàm lượng a x it béo k h n g no (41,2%) có c h ứ a th n h p h ầ n axit béo có ho ạt tín h sinh học cao EPA (8,55%) D H A (1,59%) - Sao biển: tro n g h m lượng ax it béo k h ôn g no c ủ a (43,17%), n h n g có m ặ t EPA với h m lượng (5,47%) - Cầu gai trứ n g c ầ u gai có h m lượng a x it béo k h ô n g no tư n g đôi cao từ (49,68-50,19%), n h iê n m ẫ u c ầ u gai có m ặ t EPA (6.79%), th ì tro n g m ẫ u trư n g Cẩu gai lại có m ặ t loại EPA (7,83%) DHA (2,51%) 3.3 M ột sô k ế t q u ả th n g h iệ m h o t tín h s in h hoc Các kết q u ả th h o t tín h k h n g v s v k iểm đ ịn h {A n tim icro b ia l a c tiv ity a ssa y) bảng 3; Kết thử nghiệm hoạt tín h chơng oxy hố tron g h ệ DPPH (A n tio xyd a n t) Tạp chi Khoa học D lỉQ CiH N KH TN CN T.xx Sô'4 2004 Phạm Quốc Long, Lê Mai Hương 16 bảng 4; k ế t th nghiệm gây độc t ế bào (C ytotoxicity a c tiv ity assay) bảng Bảng 3: Kết thử kháng STT vsv kiểm định '•Jong độ ức c h ế tối th iể u M IC( ị.ig! m l ) Ký hiệu Vi k h u ẩ n Gr(-) Vi k h u ẩ n Gr(+) N ấ m mốc Nấm m en m âu E.Coli s.cereui P aeruginosa B.subtillis s.aureus ASP.niger F.oxysporum c albicans siae (MeOH) HSI 03.03 (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-.) SBI 03.03 (-) (-) (-) (•) (-) (■) (■) (-) CGI 03.03 (•) (-) (-) (-) (■) (-) (-) TCGI 05.03 (-) (•) (-) (-) (-) (-) (-) (-) B ảng 4: Kết thử hoạt tính chống Oxy hóa STT Ký h i ệ u m ẫ u (M eO H ) G i t r ị s c (%) Ghi DMSO C hứng (+) HSI 03.03 CGI 03.03 SBI 03.03 TCGI 05.03 0,0010,00 78,33+0,49 9,9±0,7 26,3±0,5 19,9±0,1 38,7±0,0 Am tính Dương tính Am tính Am tính Am tính Có hoat tính B ảng 5: Kết thử nghiệm gây độc tế bào ST T D òng tế bào G iá t r ị ICsoíng/ml) Ký h i ệ u m au C hứng (+) HSI 03.03 CGI 03.03 SBI 03.03 TCGI 05.03 KB 0,002 >20 >20 >20 >20 FL 0,004 >20 19,2 >20 >20 K ết lu ận RD 0,001 >20 >20 >20 >20 Am tính Dương tín h dòng Am tính Am tính KB: T ế bào ung thư biếu mô người RD: Tế bào ung thư màng tim người FL: T ế bào ung thư màng tử cung người Kết th nghiệm họ at tín h sinh học cho thấy: - Cả m ẫu khơng có h o t tín h k h n g v s v kiêm định - H oạt tín h chơng oxy hóa: tro ng 04 m â u thử, có m ẫ u tr ứ n g cầu gai (TCGI) có hoạt tín h với giá trị s c = 38,7%, dâu h iệ u tích cực đê t a tiế n h n h bước nghiên cứu Tạp chí Khoa học ĐH Q G H N , K H T N & CN, T.xx, S ổ4 2004 Nghicn cứu thành phần li pit, ỉixit bco - 17 Đặc biệt m ẫ u cầu gai (CGI) có tín h iệu dương tín h đơi với 01 dòng t ế bào ung th m àng tử cung người (FL) với giá trị IC5o(ng/ml) = 19,2 Đây d ấu hiệu r ấ t quan trọng giúp cho ta đ ịn h hướ ng tậ p c h u n g n g h iê n cứu sâu th ê m vê hóa học hoạt tín h sinh học theo hướng n ày c ủ a m ẫ u cầu gai Từ kết q u ả n g h iê n cứu hó a học h o t tín h sinh học trê n cho th ấ y có thê có mơi liên q u a n h o t tín h s in h học có m ặ t (với th n h p h ầ n h m lượng cao) axit béo có h o t tín h sin h học như: AA, EPA, DHA m ẫ u cầu gai trứ n g Điều củng chi đ ịn h cho ta n ên c hú ý tậ p ch u n g nghiên cứu sâu hóa học hoạt tín h sinh học đối tư ợ ng m ẫ u c ầu gai trứ n g cầu gai vùng biển Việt nam K ế t l u ậ n 1) Đã xác định h m lượng lip it tô n g sô' 04 mẫu: h ả i sâm (0,58%); cầu gai (0,63%); biến (0.68%) R iêng h m lượng lip it tổng sô" trứ n g cầu gai r ấ t cao (9,97%), điều chí giá trị d in h dưởng loại n g u y ên liệu đặc biệt 2) T h n h p h n h m lượng axit béo tron g lồi nói ch u n g đêu có chứa loại axit béo phô d ụ ng tro n g t h n h p h ầ n s in h v ậ t biển, lồi đểu có m ặ t a x it béo r ấ t quan trọng th ê sông AA với h m lượng (6,72-9,31%) Các axit béo có h o t tín h sinh học cao EPA DHA, có tro n g h ả i s â m đen là: EPA (8,55%) DHA (1,59%); biển là: EPA (5,47%); cầu gai là: EPA (6.79%), trứ n g cầu gai là: EPA(7,83%) DHA(2,51%) 3) K ết th n g h iệ m h o t tín h sin h học cho thấy: tro ng m ẫ u khơng có hoạt tính k h n g v s v k iểm định H o t tín h chơng Oxy hóa, có m ẫu trứ n g cầu gai có h o ạt tính với giá trị s c = 38,7%; v đặc b iệ t m ẫ u c ầ u gai (CGI) có tín hiệu dương tín h dòng tê bào ung th m n g tứ cưng (FL) vối giá trị IC50(|ig/ml) = 19,2 Điều định cho ta nên ý tậ p t r u n g n g h iê n cứu s â u hóa học h o t tín h sinh học đỏi tượng m ầu cáu gai tr ứ n g c ầu gai tro n g v ù n g biển Việt nam Lời c m ơn: Công trìn h hồn th n h với s ự h ỗ trợ k in h p h í chương trìn h hợp tác ItaliaViệt n am 2003-2005 TÀI L IỆ U TH AM KHẢO Richard J p Cannell, N a tu l Products Isolation, H um ana Press-Totowa, New Jersey (1998), pp 803-327 Bligh E.G and Dyer W.J, A daptation of a Macro-scale method to the micro-scale for fatty acid methyl transesterrification of biologycal lipid extracts, Canad J Biochem Physiol Vol 37(1959), pp 911-917 ISO/FDIS 5590: 1988, Germany l ap chi Khoa học ĐHQGHN K H T N CN r.XX So 4, 2004 Phạm Quốc Long, Lê Mai Hương 18 Likhitwitayawuid K, Cytotoxic and antimalarial bisbenzynliso-quinon alkaloids from Stephania erecta, J N atural Product, 56(1993), pp 30-36 Shmitz F.J, Bowden BF, Toth SI, Marine Biotechnology, Plenum Press, Vol.l, New York (1993), pp 197-308 Bộ Y tế, Dược điển Việt N am III, NXB Y học, Hà nội, T.3, phụ lục 10(1994),378tr Vanden, B., and Vlietinck, A J., Antimicrobial screening of natural products, Method in Plant Biochemistry ,4(1991), pp 47- 68 Davies, K J A., and Goldberg, A L., l,l-Diphenyl-2-pyerylhydrazyl radical (DPPH) scavenging, J Biol Chem , 17 (1987), pp 262-271 Shela G., Olga, M B., Elena, K., Antonin, L., Milan, c., Nuria, G M., Ratiporn, H., YongSeo, P., Soon- Teck, J., Simon, T., Comparition of the contens of the main biochemical compounds and the antioxidant activity of some spanish olive oils as determined by four different radical scavening test, J Biol Chem, 14(2003), pp 154- 159 10 M Suffness and J M Pezzuto, In vitro screening of potential cancer chemopreventive agents, Methods in plant Biochem istry, 6(1991), pp 47-69 VNU JOURNAL OF SCIENCE, Nat., Sci., &Tech., T.xx, N04, 2004 S T U D Y O N L I P I D , F A T T Y A C ID C O M P O S IT IO N A N D B IO A C T IV E O F E C H I N O D E R M A T A O F M A R IN E V IE T N A M P h a m Q u o c L o n g , L e M H u o n g , C h a u V a n M i n h , T r i n h T h i T h u H u o n g , Đ o H u u N g h i, Đ o a n L a n P h u o n g , C a m T h i I n h , C h u Q u a n g T r u y e n In stitu te o f N a tu tr a l Products C hem istry Vietnam ese A ca d em y o f Science a n d Technology N g u y e n T h i V in h , Đ o a n V ie t B i n h In stitu te o f Biotechnology, Vietnam ese A cadem y o f Science a n d Technology The content of lipid a n d fatty acids composition of four sam p les of E chin o d e rm a ta of M arine Vietnam : sea slug(H olothuria m a rten sii Semper); sea u c h in a n d egg (E ch in o th rix calam aris (Pallas)); sea s ta r (A sterin a sp.) were determ ined T heir bioactive such as antim icrobial activity; an tio x y d a n t a n d cytotoxicity activity were tested invitro a n d discused also K ey w o r d s : M IC - M in im u m In h ib ito ry C oncentration S C - Scanuenging C apacity (%) IC 50- Inh ib ito ry C oncentration o f 50% cell grow th Tạp chí Khoa học ĐHQGHN K IỈT N & CN T.XX So 4, 2004 ... ng tậ p c h u n g n g h iê n cứu sâu th ê m vê hóa học hoạt tín h sinh học theo hướng n ày c ủ a m ẫ u cầu gai Từ kết q u ả n g h iê n cứu hó a học h o t tín h sinh học trê n cho th ấ y có thê... sâu hóa học hoạt tín h sinh học đối tư ợ ng m ẫ u c ầu gai trứ n g cầu gai vùng biển Việt nam K ế t l u ậ n 1) Đã xác định h m lượng lip it tô n g sô' 04 mẫu: h ả i sâm (0,58%); cầu gai (0,63%);... axit béo (% so với tổ ng a x it béo) 04 m ẫu s in h v ậ t biên r a t r ê n b ả n g Tạp chi Khoa học ĐHQGHN, KHTN & CN, ỉ XX s ổ 4, 2004 Nghiên cứu thành phan lipil, axil héo B 2: Thành phẩn axit