Luận văn tốt nghiệp nghiên cứu nuôi thành thục và thụ tinh ống nghiệm trứng bò nội tại việt nam

Bộ Giáo dục đào tạo Trờng Đại học nông nghiệp I Nguyễn Hữu Đức Nghiên cứu nuôi thành thục thụ tinh ống nghiệm trứng bò nội Việt nam Luận án Tiến sĩ Nông nghiệp Hà Nội - 2005 Th■ah■■ng Mang Luôn 123doc thu■n l■icam s■ tr■ h■u k■t s■ nghi■m t■im■t d■ng s■website mang kho m■i th■ m■ l■i d■n CH■P vi■n nh■ng cho ■■u kh■ng ng■■i NH■N quy■n chia dùng, l■ CÁC s■l■i v■i và■I■U t■t công h■n mua nh■t 2.000.000 ngh■ bán KHO■N cho tàihi■n ng■■i li■u TH■A tài th■ hàng li■u dùng hi■n THU■N ■■u ■ t■t Khi ■■i, Vi■t c■ khách b■n l■nh Nam Chào online hàng v■c: Tác m■ng tr■ khơng tài phong thành b■n khác chun ■■n thành tíngì d■ng, v■i so nghi■p, viên 123doc v■i cơng c■a b■n hồn ngh■ 123doc g■c h■o, thơng B■n và■■ n■p có tin, cao th■ ti■n ngo■i tính phóng vào ng■, Khách trách tài to,kho■n nhi■m thu nh■ c■a ■■i hàng tùy123doc, v■i ý cót■ng th■b■n d■ ng■■i dàng s■ dùng ■■■c tra c■u M■c h■■ng tàitiêu li■u nh■ng hàng m■t■■u quy■n cáchc■a l■i123doc.net sau xác,n■p nhanh ti■n tr■ chóng thành website th■ vi■n tài li■u online l■n nh■t Vi■t Nam, cung c■p nh■ng tài li■u ■■c không th■ tìm th■y th■ tr■■ng ngo■i tr■ 123doc.net Nhi■u event thú v■, event ki■m ti■n thi■t th■c 123doc luôn t■o c■ h■i gia t■ng thu nh■p online cho t■t c■ thành viên c■a website Mangh■n Luôn Th■a Xu■t Sau Nhi■u 123doc h■■ng phát thu■n l■i event cam s■ nh■n m■t tr■ t■ h■u k■t s■ thú nghi■m t■i ýxác n■m t■■ng m■t d■ng v■, s■ nh■n website mang event kho m■i ■■i, t■o t■ th■ m■ l■i c■ng ki■m ■■ng d■n 123doc CH■P vi■n nh■ng cho ■■u ■■ng ti■n h■ kh■ng ng■■i NH■N ■ã quy■n th■ng thi■t chia t■ng ki■m dùng, l■ CÁC s■ th■c s■ l■i b■■c v■i ti■n vàchuy■n ■I■U t■t công h■n mua 123doc online kh■ng nh■t 2.000.000 ngh■ bán KHO■N sang b■ng cho tài ■■nh hi■n ng■■i li■u ph■n tài TH■A tài v■ th■ li■u hàng t■o li■u thơng dùng tríhi■n THU■N hi■u c■ c■a ■■u ■ tin t■t h■i Khi ■■i, qu■ Vi■t xác c■ khách gia b■n nh■t, minh l■nh Nam t■ng Chào online hàng uy tài v■c: l■nh thu Tác m■ng tín kho■n tr■ nh■p khơng tài phong v■c cao thành b■n email nh■t tài online khác chuyên ■■n li■u thành tínb■n Mong cho d■ng, v■i so nghi■p, viên kinh ■ã t■t 123doc 123doc.net! v■i mu■n công ■■ng c■a c■ doanh b■n hoàn mang ngh■ 123doc ký g■c online thành v■i h■o, Chúng l■i thông B■n 123doc.netLink cho viên Tính ■■ n■p có tơi tin, c■ng c■a cao th■ ■■n cung ti■n ngo■i tính website phóng ■■ng th■i vào c■p ng■, Khách trách xác tài ■i■m D■ch xã to,kho■n th■c nhi■m h■i thutháng V■ nh■ m■t s■ c■a (nh■ ■■i hàng ■■■c tùy ngu■n 5/2014; 123doc, v■i ■■■c ý cóg■i t■ng th■ tài 123doc v■ mơ ngun b■n d■ ng■■i ■■a t■ dàng s■ v■■t d■■i tri dùng ■■■c ch■ tra th■c m■c ■ây) email c■u M■c h■■ng quý 100.000 cho tài b■n tiêu báu, li■u b■n, nh■ng ■ã hàng phong m■t l■■t tùy ■■ng ■■u quy■n cách truy thu■c phú, ky, c■a c■p ■a l■i b■n vào 123doc.net m■i d■ng, sau xác, vuingày, n■p lòng “■i■u nhanh giàu ti■n s■ ■■ng tr■ giá Kho■n chóng h■u thành tr■ nh■p 2.000.000 website ■■ng Th■a th■ email vi■n th■i Thu■n c■a thành mong tài v■ li■u viên mu■n S■ online ■■ng D■ng click t■o l■n ký, D■ch ■i■u vào nh■t l■t link ki■n V■” vào Vi■t 123doc top sau cho Nam, 200 ■ây cho ■ã cung các (sau g■iwebsite c■p users ■âynh■ng ■■■c cóph■ thêm tài bi■n g■i thu li■u t■t nh■t nh■p ■■c T■it■i khơng t■ng Chính Vi■tth■i th■ Nam, v■y ■i■m, tìm t■123doc.net th■y l■chúng tìm ki■m tơi th■ racóthu■c ■■i tr■■ng th■nh■m c■p top ngo■i 3nh■t ■áp Google tr■ ■KTTSDDV ■ng 123doc.net Nh■n nhu c■u ■■■c theo chiaquy■t danh s■ tài hi■u li■udo ch■t c■ng l■■ng ■■ng vàbình ki■mch■n ti■n online website ki■m ti■n online hi■u qu■ uy tín nh■t Lnh■n 123doc Sau Th■a Xu■t h■■ng phát thu■n cam nh■n m■t t■k■t s■ t■i ýxác n■m t■■ng d■ng s■ nh■n website mang ■■i, t■o t■l■i c■ng ■■ng d■n 123doc CH■P nh■ng ■■u ■■ng h■ NH■N ■ã quy■n th■ng chia t■ng ki■m CÁC s■s■ l■i b■■c ti■n vàchuy■n ■I■U t■t mua online kh■ng nh■t bán KHO■N sang b■ng cho tài ■■nh ng■■i li■u ph■n tài TH■A v■ li■u hàng thơng dùng tríTHU■N hi■u c■a ■■u tin Khi qu■ Vi■t xác khách nh■t, minh Nam Chào hàng uy tài l■nh Tác m■ng tín kho■n tr■ phong v■c cao thành b■n email nh■t tàichuyên ■■n li■u thành b■n Mong v■i nghi■p, viên kinh ■ã 123doc 123doc.net! mu■n ■■ng c■a doanh hoàn mang 123doc kýonline v■i h■o, Chúng l■ivà 123doc.netLink cho Tính ■■ n■p tơi c■ng cao ■■n cung ti■n tính ■■ng th■i vào c■p trách xác tài ■i■m D■ch xãkho■n th■c nhi■m h■itháng V■ m■t s■ c■a (nh■ ■■i ■■■c ngu■n 5/2014; 123doc, v■i ■■■c g■i t■ng tài 123doc v■ mô nguyên b■n ng■■i ■■a t■s■ v■■t d■■i tri dùng ■■■c ch■ th■c m■c ■ây) email M■c h■■ng quý 100.000 cho b■n tiêu báu, b■n, nh■ng ■ã hàng phong l■■t tùy ■■ng ■■u quy■n truy thu■c phú, ky, c■a c■p ■a l■i b■n vào 123doc.net m■i d■ng, sau vuingày, n■p lòng “■i■u giàu ti■n s■ ■■ng tr■ giá Kho■n h■u thành tr■ nh■p 2.000.000 website ■■ng Th■a th■ email vi■n th■i Thu■n c■a thành mong tài v■ li■u viên mu■n S■ online ■■ng D■ng click t■o l■n ký, D■ch ■i■u vào nh■t l■t link ki■n V■” vào Vi■t 123doc top sau cho Nam, 200 ■ây cho ■ã cung các (sau g■iwebsite c■p users ■âynh■ng ■■■c cóph■ thêm tài bi■n g■i thu li■u t■t nh■t nh■p ■■c T■it■i khơng t■ng Chính Vi■tth■i th■ Nam, v■y ■i■m, tìm t■123doc.net th■y l■chúng tìm ki■m tơi th■ racóthu■c ■■i tr■■ng th■nh■m c■p top ngo■i 3nh■t ■áp Google tr■ ■KTTSDDV ■ng 123doc.net Nh■n nhu c■u ■■■c theo chiaquy■t danh s■ tài hi■u li■udo ch■t c■ng l■■ng ■■ng vàbình ki■mch■n ti■n online website ki■m ti■n online hi■u qu■ uy tín nh■t Lnh■n Th■a Xu■t Sau Nhi■u 123doc Mang h■■ng phát thu■n l■i event cam s■ nh■n m■t tr■ t■ h■u k■t s■ thú nghi■m t■i ýxác n■m t■■ng m■t d■ng v■, s■ nh■n website mang event kho m■i ■■i, t■o t■ th■ m■ l■i c■ng ki■m ■■ng d■n 123doc CH■P vi■n nh■ng cho ■■u ■■ng ti■n h■ kh■ng ng■■i NH■N ■ã quy■n th■ng thi■t chia t■ng ki■m dùng, l■ CÁC s■ th■c s■ l■i b■■c v■i ti■n vàchuy■n ■I■U t■t công h■n mua 123doc online kh■ng nh■t 2.000.000 ngh■ bán KHO■N sang b■ng cho tài ■■nh hi■n ng■■i li■u ph■n tài TH■A tài v■ th■ li■u hàng t■o li■u thơng dùng tríhi■n THU■N hi■u c■ c■a ■■u ■ tin t■t h■i Khi ■■i, qu■ Vi■t xác c■ khách gia b■n nh■t, minh l■nh Nam t■ng Chào online hàng uy tài v■c: l■nh thu Tác m■ng tín kho■n tr■ nh■p khơng tài phong v■c cao thành b■n email nh■t tài online khác chun ■■n li■u thành tínb■n Mong cho d■ng, v■i so nghi■p, viên kinh ■ã t■t 123doc 123doc.net! v■i mu■n cơng ■■ng c■a c■ doanh b■n hồn mang ngh■ 123doc ký g■c online thành v■i h■o, Chúng l■i thơng B■n 123doc.netLink cho viên Tính ■■ n■p có tơi tin, c■ng c■a cao th■ ■■n cung ti■n ngo■i tính website phóng ■■ng th■i vào c■p ng■, Khách trách xác tài ■i■m D■ch xã to,kho■n th■c nhi■m h■i thutháng V■ nh■ m■t s■ c■a (nh■ ■■i hàng ■■■c tùy ngu■n 5/2014; 123doc, v■i ■■■c ý cóg■i t■ng th■ tài 123doc v■ mô nguyên b■n d■ ng■■i ■■a t■ dàng s■ v■■t d■■i tri dùng ■■■c ch■ tra th■c m■c ■ây) email c■u M■c h■■ng quý 100.000 cho tài b■n tiêu báu, li■u b■n, nh■ng ■ã hàng phong m■t l■■t tùy ■■ng ■■u quy■n cách truy thu■c phú, ky, c■a c■p ■a l■i b■n vào 123doc.net m■i d■ng, sau xác, vuingày, n■p lòng “■i■u nhanh giàu ti■n s■ ■■ng tr■ giá Kho■n chóng h■u thành tr■ nh■p 2.000.000 website ■■ng Th■a th■ email vi■n th■i Thu■n c■a thành mong tài v■ li■u viên mu■n S■ online ■■ng D■ng click t■o l■n ký, D■ch ■i■u vào nh■t l■t link ki■n V■” vào Vi■t 123doc top sau cho Nam, 200 ■ây cho ■ã cung các (sau g■iwebsite c■p users ■âynh■ng ■■■c cóph■ thêm tài bi■n g■i thu li■u t■t nh■t nh■p ■■c T■it■i không t■ng Chính Vi■tth■i th■ Nam, v■y ■i■m, tìm t■123doc.net th■y l■chúng tìm ki■m tơi th■ racóthu■c ■■i tr■■ng th■nh■m c■p top ngo■i 3nh■t ■áp Google tr■ ■KTTSDDV ■ng 123doc.net Nh■n nhu c■u ■■■c theo chiaquy■t danh s■ tài hi■u li■udo ch■t c■ng l■■ng ■■ng vàbình ki■mch■n ti■n online website ki■m ti■n online hi■u qu■ uy tín nh■t u■t phát Nhi■u Mang Luôn 123doc Th■a Xu■t Sau h■n h■■ng phát thu■n l■i event s■ cam nh■n t■ m■t tr■ t■ h■u ýk■t s■ thú nghi■m t■i ýt■■ng xác n■m t■■ng m■t d■ng v■, s■ nh■n website mang event t■o kho m■i ■■i, t■o t■ c■ng th■ m■ l■i c■ng ki■m ■■ng d■n 123doc CH■P vi■n nh■ng cho ■■ng ■■u ■■ng ti■n h■ kh■ng ng■■i NH■N ■ã quy■n th■ng thi■t chia ki■m t■ng ki■m dùng, l■ CÁC s■ th■c ti■n s■ l■i b■■c v■i ti■n vàchuy■n ■I■U t■t công online h■n mua 123doc online kh■ng nh■t 2.000.000 ngh■ bán KHO■N b■ng sang b■ng cho tài ■■nh hi■n tài ng■■i li■u ph■n tài TH■A li■u tài v■ th■ li■u hàng t■o li■u thông dùng trí hi■u hi■n THU■N hi■u c■ c■a ■■u ■ tin qu■ t■t h■i Khi ■■i, qu■ Vi■t xác c■ khách gia nh■t, b■n nh■t, minh l■nh Nam t■ng Chào online uy hàng uy tài v■c: l■nh thu Tác tín m■ng tín kho■n tr■ cao nh■p khơng tài phong v■c cao thành b■n nh■t email nh■t tài online khác chun ■■n li■u thành tín Mong b■n Mong cho d■ng, v■i so nghi■p, viên kinh ■ã mu■n t■t 123doc 123doc.net! v■i mu■n công ■■ng c■a c■ doanh b■n mang hoàn mang ngh■ 123doc ký g■c online thành v■i l■i h■o, Chúng l■i thông B■n cho 123doc.netLink cho viên Tính ■■ n■p có c■ng tơi tin, c■ng c■a cao th■ ■■n cung ti■n ngo■i ■■ng tính website phóng ■■ng th■i vào c■p ng■, Khách trách xác xã tài ■i■m D■ch xã to,h■i kho■n th■c nhi■m h■i thum■t tháng V■ nh■ m■t s■ c■a (nh■ ■■i hàng ngu■n ■■■c tùy ngu■n 5/2014; 123doc, v■i ■■■c ý cótài g■i t■ng th■ tài 123doc nguyên v■ mô nguyên b■n d■ ng■■i ■■a t■ dàng s■ v■■t tri d■■i tri dùng ■■■c ch■ th■c tra th■c m■c ■ây) email c■u quý M■c h■■ng quý 100.000 cho tài báu, b■n tiêu báu, li■u b■n, nh■ng phong ■ã hàng phong m■t l■■t tùy ■■ng ■■u phú, quy■n cách truy thu■c phú, ky, c■a c■p ■a ■a l■i b■n vào d■ng, 123doc.net m■i d■ng, sau xác, vuingày, n■p giàu lòng “■i■u nhanh giàu ti■n giá s■ ■■ng tr■ giá Kho■n chóng h■u tr■ thành tr■ nh■p ■■ng 2.000.000 website ■■ng Th■a th■ email th■i vi■n th■i Thu■n mong c■a thành mong tài v■ li■u mu■n viên mu■n S■ online ■■ng D■ng t■o click t■o l■n ■i■u ký, D■ch ■i■u vào nh■t l■t link ki■n ki■n V■” vào Vi■t 123doc cho top sau cho Nam, cho 200 ■ây cho ■ã cung các (sau g■i users website c■p users ■âynh■ng có ■■■c cóph■ thêm thêm tài bi■n g■i thu thu li■u t■t nh■p nh■t nh■p ■■c T■it■i Chính khơng t■ng Chính Vi■tth■i vìth■ Nam, vìv■y v■y ■i■m, tìm 123doc.net t■123doc.net th■y l■chúng tìm ki■m tơi th■ racó ■■i thu■c ■■i tr■■ng th■ nh■m nh■m c■p top ngo■i ■áp 3nh■t ■áp Google ■ng tr■ ■KTTSDDV ■ng 123doc.net nhu Nh■n nhuc■u c■u ■■■c chia theo chias■ quy■t danh s■tàitài hi■u li■u li■uch■t ch■t c■ng l■■ng l■■ng ■■ng vàvàki■m bình ki■mch■n ti■n ti■nonline online website ki■m ti■n online hi■u qu■ uy tín nh■t Nhi■u Mang Ln 123doc Th■a Xu■t Sau h■n h■■ng phát thu■n l■i event s■ cam nh■n m■t tr■ t■ h■u k■t s■ thú nghi■m t■i ýxác n■m t■■ng m■t d■ng v■, s■ nh■n website mang event kho m■i ■■i, t■o t■ th■ m■ l■i c■ng ki■m ■■ng d■n 123doc CH■P vi■n nh■ng cho ■■u ■■ng ti■n h■ kh■ng ng■■i NH■N ■ã quy■n th■ng thi■t chia t■ng ki■m dùng, l■ CÁC s■ th■c s■ l■i b■■c v■i ti■n vàchuy■n ■I■U t■t công h■n mua 123doc online kh■ng nh■t 2.000.000 ngh■ bán KHO■N sang b■ng cho tài ■■nh hi■n ng■■i li■u ph■n tài TH■A tài v■ th■ li■u hàng t■o li■u thơng dùng tríhi■n THU■N hi■u c■ c■a ■■u ■ tin t■t h■i Khi ■■i, qu■ Vi■t xác c■ khách gia b■n nh■t, minh l■nh Nam t■ng Chào online hàng uy tài v■c: l■nh thu Tác m■ng tín kho■n tr■ nh■p khơng tài phong v■c cao thành b■n email nh■t tài online khác chuyên ■■n li■u thành tínb■n Mong cho d■ng, v■i so nghi■p, viên kinh ■ã t■t 123doc 123doc.net! v■i mu■n công ■■ng c■a c■ doanh b■n hoàn mang ngh■ 123doc ký g■c online thành v■i h■o, Chúng l■i thông B■n 123doc.netLink cho viên Tính ■■ n■p có tơi tin, c■ng c■a cao th■ ■■n cung ti■n ngo■i tính website phóng ■■ng th■i vào c■p ng■, Khách trách xác tài ■i■m D■ch xã to,kho■n th■c nhi■m h■i thutháng V■ nh■ m■t s■ c■a (nh■ ■■i hàng ■■■c tùy ngu■n 5/2014; 123doc, v■i ■■■c ý cóg■i t■ng th■ tài 123doc v■ mơ nguyên b■n d■ ng■■i ■■a t■ dàng s■ v■■t d■■i tri dùng ■■■c ch■ tra th■c m■c ■ây) email c■u M■c h■■ng quý 100.000 cho tài b■n tiêu báu, li■u b■n, nh■ng ■ã hàng phong m■t l■■t tùy ■■ng ■■u quy■n cách truy thu■c phú, ky, c■a c■p ■a l■i b■n vào 123doc.net m■i d■ng, sau xác, vuingày, n■p lòng “■i■u nhanh giàu ti■n s■ ■■ng tr■ giá Kho■n chóng h■u thành tr■ nh■p 2.000.000 website ■■ng Th■a th■ email vi■n th■i Thu■n c■a thành mong tài v■ li■u viên mu■n S■ online ■■ng D■ng click t■o l■n ký, D■ch ■i■u vào nh■t l■t link ki■n V■” vào Vi■t 123doc top sau cho Nam, 200 ■ây cho ■ã cung các (sau g■iwebsite c■p users ■âynh■ng ■■■c cóph■ thêm tài bi■n g■i thu li■u t■t nh■t nh■p ■■c T■it■i khơng t■ng Chính Vi■tth■i th■ Nam, v■y ■i■m, tìm t■123doc.net th■y l■chúng tìm ki■m tơi th■ racóthu■c ■■i tr■■ng th■nh■m c■p top ngo■i 3nh■t ■áp Google tr■ ■KTTSDDV ■ng 123doc.net Nh■n nhu c■u ■■■c theo chiaquy■t danh s■ tài hi■u li■udo ch■t c■ng l■■ng ■■ng vàbình ki■mch■n ti■n online website ki■m ti■n online hi■u qu■ uy tín nh■t Bé Gi¸o dơc đào tạo Trờng Đại học nông nghiệp I Nguyễn Hữu Đức Nghiên cứu nuôi thành thục thụ tinh ống nghiệm trứng bò nội Việt nam Chuyên ngành: Sinh sản thụ tinh nhân tạo M số: 4-03-07 Luận án Tiến sĩ N«ng nghiƯp Ng−êi h−íng dÉn khoa häc: GS TSKH Cù Xuân Dần TS Nguyễn Thị Ước Hà Nội - 2005 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu Các số liệu, kết đợc trình bày luận án trung thực cha đợc công bố công trình khác Tác giả Nguyễn Hữu Đức Lời cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn GS TSKH Cù Xuân Dần, nguyên Hiệu trởng Trờng Đại học Nông nghiệp I Hà Nội, đà tận tình hớng dẫn, giúp đỡ góp ý cho luận án Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến TS Bùi Xuân NguyênTrởng Phòng Công nghệ Phôi-Viện Công nghệ Sinh học TS Nguyễn Thị Ước đà nhiệt tình dẫn, ủng hộ, tạo điều kiện để thực thí nghiệm liên quan đến luận án hết lòng đào tạo, giúp cho có điều kiện thuận lợi để ngày trởng thành thời gian công tác Phòng Công nghệ Phôi Với tình cảm sâu sắc, xin cảm ơn ủng hộ hợp tác anh chị em cán nghiên cứu đặc biệt anh Lê Văn Ty kỹ thuật viên Phòng Công nghệ Phôi-Viện Công nghệ Sinh học-Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam trình thực nghiên cứu đơn vị Tôi xin trân trọng chuyển lời cảm ơn đến Giáo s Jean Paul Renard cộng Viện INRA (Cộng hòa Pháp), dự án BIODIVA, Giáo s Jack Rutledge Tiến sĩ Leibfreid Rutledge cộng Trờng Đại học Wisconsin (Mỹ) đà giúp đỡ tài liệu, kinh nghiệm vật liệu thí nghiệm có liên quan đến luận án Tôi xin chuyển lời cảm ơn đến gia đình bác Nguyễn Văn Tân (thị xà Hà Đông), hợp tác xà Chăn nuôi bò lai sinh sản Vân Xuân (Huyện Vĩnh Tờng-Tỉnh Vĩnh Phúc), nhân dân tỉnh Hng Yên, Hải Dơng đà nhiệt tình cung cấp mẫu vật bò nhận phôi thụ tinh ống nghiệm Cuối cùng, xin trân trọng gửi lời cảm ơn đến Viện Công nghệ Sinh học, Khoa Sau Đại học, thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú Y, Bộ môn Sinh lý, Sinh hóa, Động vật-Trờng Đại học Nông nghiệp I, Vụ Đại học Sau Đại học-Bộ Giáo dục Đào tạo đà ủng hộ, tạo điều kiện giúp đỡ hoàn thành thủ tục cần thiết để bảo vệ thành công luận án Nguyễn Hữu Đức Danh mục chữ viết tắt luận án BSA Bovine Serum Albumin COC Cumulus Oocyte Complex DPBS Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline E Estradiol-17β EGF Epidermal Growth Factor FCS Foetal Calf Serum FGF Fibroblast Growth Factor FSH Follicle Stimulating Hormone HIS High Ionic Strength IVC In vitro Culture IVF In vitro Fertilization IVM In vitro Maturation IVP In vitro Production LH Luteinizing Hormone MPF Maturation Promoting Factor OMI Oocyte Maturation Inhibitor OPU Ovum Pick Up PCR Polymerase Chain Reaction SOF Synthetic Oviduct Fluid TCM 199 Tissue Culture Medium 199 Mục lục Trang Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt Mục lục Danh mục bảng Danh mục hình ảnh Mở đầu Chơng Tổng quan vấn đề nghiên cứu 1.1 khai thác nuôi thành thục trứng bò ống nghiệm 1.1.1 Các phơng pháp khai thác trứng bò 1.1.2 Phơng pháp nuôi đánh giá thành thục ống nghiệm trứng bò 1.1.3 Các yếu tố ảnh hởng kết khai thác nuôi thành thục trứng bß èng nghiƯm 1.2 13 thơ tinh trøng bß èng nghiƯm 1.2.1 Nguyªn lý thơ tinh èng nghiƯm giai đoạn trình thụ tinh 1.2.2 Phơng pháp thụ tinh trứng bò ống nghiệm 21 32 1.2.3 Các yếu tố ảnh hởng kết thụ tinh trứng bò ống nghiệm 35 Chơng đối tợng, nội dung phơng pháp nghiên cứu 2.1 Đối tợng Nội dung nghiên cứu 2.1.1 Đối tợng nghiên cứu 46 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 46 2.1.3 Các chØ tiªu nghiªn cøu 47 2.1.4 Bè trÝ thÝ nghiƯm 47 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Thu bảo quản buồng trứng 48 2.2.2 Khai thác trứng từ buồng trứng 48 2.2.3 Phân loại chất lợng trứng 49 2.2.4 Đánh giá giai đoạn phát triển trứng 49 2.2.5 Nuôi trứng thành thục ống nghiệm 50 2.2.6 Xư lý tinh trïng dïng thơ tinh èng nghiƯm 50 2.2.7 Thụ tinh ống nghiệm 51 2.2.8 Đánh giá kết thụ tinh ống nghiệm 51 2.2.9 Nuôi phôi èng nghiƯm 51 2.2.10 Xư lý sè liƯu 52 Chơng Kết thảo luận 3.1 Khai thác trứng bò từ buồng trứng 3.1.1 ảnh hởng phơng pháp khai thác đến số chất lợng trứng bò vàng 53 3.1.2 ảnh hởng mùa đến kết khai thác trứng từ buồng trứng bò vàng 56 3.1.3 ảnh hởng giống bò đến kết khai thác trứng bò vàng bò lai Sind 3.2 57 Nuôi thành thục trứng bò ống nghiệm 3.2.1 ảnh hởng môi trờng nuôi đến khả thành thục trứng bò vàng 61 3.2.2 ảnh hởng thời gian nuôi đến khả thành thục trứng bò vàng 63 3.2.3 ảnh hởng chất lợng trứng đến tỉ lệ thành thục trứng bò vàng 68 3.2.4 ảnh hởng mùa đến khả thành thục trứng bò vàng 68 3.2.5 So sánh khả thành thục trứng bò vàng bò lai Sind èng nghiƯm 3.3 69 thơ tinh trøng bß èng nghiƯm 3.3.1 ¶nh h−ëng cđa tinh trïng dïng thơ tinh ống nghiệm trứng bò vàng 74 3.3.2 ảnh hởng thời gian tiến hành thụ tinh 78 3.3.3 ảnh hởng chất lợng trứng 79 3.3.4 ảnh hởng môi trờng thụ tinh 79 3.4 Sự phát triển phôi bò thụ tinh ống nghiệm 3.4.1 ảnh hởng môi trờng nuôi phôi 87 3.4.2 ảnh hởng chất lợng trứng 89 3.4.3 ảnh hởng đực giống 90 3.4.4 ảnh hởng mật độ nuôi phôi 92 3.4.5 ảnh hởng thành phần khí nuôi 93 3.4.6 So sánh hiệu sản xuất phôi thụ tinh ống nghiệm bò vàng bò lai Sind 3.5 bê thụ tinh ống nghiệm 94 103 Kết luận đề nghị 108 Danh mục công trình liên quan Luận án tác giả 110 Tài liệu tham khảo 111 Phụ lục 136 Danh mục bảng Trang Bảng 3.1: Số lợng chất lợng trứng khai thác từ buồng trứng bò vàng phơng pháp hút hút kết hợp cắt lớp 53 Bảng 3.2: Số lợng trứng bò loại A thu từ buồng trứng bò vàng mùa 56 Bảng 3.3: Khả khai thác trứng bò giống bò vàng bò lai Sind 58 Bảng 3.4: ảnh hởng FCS đến tỉ lệ trứng thành thục môi trờng 199 61 Bảng 3.5: ảnh hởng FSH đến tỉ lệ trứng thành thục môi trờng 199+10%FCS 62 Bảng 3.6: ảnh hởng Estradiol-17 đến tỉ lệ trứng thành thục môi trờng 199+10%FCS+FSH 62 Bảng 3.7: ảnh hởng LH đến tỉ lệ trứng thành thục môi trờng 199+10%FCS+FSH+E 63 Bảng 3.8: ảnh hởng thời gian nuôi đến khả thành thục trứng 64 Bảng 3.9: ảnh hởng chất lợng trứng đến khả thành thục 68 Bảng 3.10: ảnh hởng mùa đến khả thành thục trứng 68 Bảng 3.11: Kết nuôi thành thục trứng bò vàng bò lai Sind ống nghiệm 69 Bảng 3.12: Kết chọn lọc tinh trùng phơng pháp lọc qua phân lớp percoll 75 Bảng 3.13: Kết chọn lọc tinh trùng phơng pháp bơi ngợc (swim-up) 75 82 Guyader-Joly C., Ponchon S., Durand M., Menck C., Heyman Y (1996), “Quality assessment of bovine IVF embryos cultured on vero cells”, 12th European Embryo Transfer meeting, Lyon, 13-15 Sept 1996, 153 83 Hamano K., Kuwayama M (1993), “In vitro fertilization and development of bovine oocytes recovered from the ovaries of individual donors: a comparison between the cutting and aspiration method”, Theriogenology, 3, 1421-1423 84 Hanada A Sakamoto T., Shiyoa Y and Kobayashi J (1986), “In vitro fertilization of bovine oocytes matured in vitro”, Pro 77th Ann Meet Jpn Soci Zootech Sci., 79 85 Handrow R.R., First N.L., Parrish J.J (1989), “Calcium requirement and increased association with bovine sperm during capacitation by heparin”, J Exp Zool., 252, 174-182 86 Handrow R.R., LenR.W and Ax R.L (1982), “Structural comparisons among glycosaminoglycans to promote an acrosome reaction in bovine spermatozoa”, Biochem Biophys Res Commun., 107, 1326-1332 87 Hasler J.F., Henderson W.B., Hurtgen P.J., Jin Z.Q., McCauly A.D., Mower S.A., Neely B., Shuey L.S., Stokes J.E., Trimmer S.A (1995), “Production, freezing and transfer of bovine IVF embryos and subsequent calving results”, Theriogenology, 43, 141-152 88 Hazeleger N.L., Hill D.J., Stubbings R.B., Walton J.S (1995), “Relationship of morphology and follicular fluid environment of bovine oocytes to their developmental potential in vitro”, Theriogenology, 43, 509-522 89 Hensleigh H.C and Hunter A.G (1985), “In vitro maturation of bovine cumulus enclosed primary oocytes and their subsequent in vitro fertilization and cleavage”, J Dairy Sci., 68, 1456-1562 90 Heyman Y., Menezo Y., Chesne P., Camous S and Garnier V (1987), “In vitro cleavage of bovine and ovine early embryos improved development using co-culture with trophoblastic vesicles”, Theriogenology, 27, 59-68 91 Holm P., Booth P.J., Schmidt M.H., Greve T., Callesen H (1999), “High bovine blastocyst development in a static in vitro production system using SOFaa medium supplemented with sodium citrate and myo-inositol with or without serum-proteins”, Theriogenology, 52, 683-700 92 Hunter R.H.F and Wilmut I (1984), “Sperm transport in the cow Periovulatory redistribution of viable cells within the oviduct”, Reprod Nutrr Develop., 24, 597-608 93 Iritani A and Niwa K (1977), “Capacitation of bull spermatozoa and fertilization in vitro of cattle follicular oocytes matured in culture”, J Reprod Fert., 50, 119-121 94 Iritani A., Kasai M., Niwa K and Song H.B (1984), “Fertilization in vitro of cattle follicular oocytes with ejaculated spermatozoa capacitated in a chemically defined medium”, J Reprod Fert., 70, 487-492 95 Jacobsen H., Schimdt M., Holm P., Sangild P.T., Vajta G., Greve T and Callesen H (2000), “Body dimensions and birth and organ weights of calves derived from in vitro produced embryos cultured with or without serum and oviduct epithelium cells”, Theriogenology, 53, 1761-1769 96 Kajihara Y., Roses G., Lago I., Calvo J., Fila D and Crispo M (1999), “Influence of culture medium on the development of bovine blastocysts”, Theriogenology, Vol 51, No 1, 239 97 Katska L and Smorag Z (1985), “The influence of culture temperature on in vitro maturation of bovine oocytes”, Anim Reprod Sci., 9, 205-212 98 Keefer C.L and Paprocki A.M (1995), “Effect of percoll following sperm separation on in vitro fertilization of bovine oocytes”, Theriogenology, Vol 43, No 1, 244 99 Keskintepe L., Burnley C.A., Brackett B.G (1995), “Production of viable bovine blastocysts in defined in vitro conditions”, Biol Reprod., 52, 1410-1417 100 Krisher R.L., Lane M., Bavister B.D (1998), “Influence of semidefined culture media on the development, cell number and metabolism of bovine embryos”, Theriogenology, 49, 207 101 Kruip TAM., Van Beneden T.H., Dieleman S.J., Bevers M.M (1988), “The effect of Estradiol-17β on nuclear maturation of bovine oocytes”, Proceedings of the 11th international Congress on Animal Reproduction, Vol 3, 336 102 Kruip Th.A.M., Boni R., Wurth Y.A., Roelofsen M.W.M., Pieterse M.C (1994), “Potential use of ovum pick up for embryo production and breeding in cattle”, Theriogenology, 42, 675-684 103 Lambert R.D., Sirard M.A., Bernard C., Beland R., Rioux Leclerc J.E., Menard P and Bedyoa M (1986), “In vitro fertilization of bovine oocytes matured in vivo and collected at laparoscopy”, Theriogenology, 25, 117-133 104 Langlais J., Kan F.W.K., Granger L., Raymond L., Bleau G., Roberts K.D (1988), “Identification of sterol acceptors that stimulate cholesterol efflux from human spermatozoa during in vitro capacitation”, Gamete Res., 20, 188 105 Lee C.N and Ax R.L (1984), “Concentrations and composition of glycosaminoglycans in the female bovine reproductive tract” J Dairy Sci., 67, 2006-2009 106 Leibfried L., First N.L (1979), “Characterization of bovine follicular oocytes and their ability to mature in vitro” J Anim Sci., 48, 7686 107 Leibfried-Rutledge M.L., Critser E.S., Eyestone W.H., Northey D.L and First (1986a), “Developmental potential of bovine oocytes matured in vitro or in vivo”, Theriogenology, 25, 164 108 Lenz R.W., Ball G.D., Leibfreid M.L., Ax R.L and First N.L (1983a), “In vitro maturation and fertilization of bovine oocytes are temperature-dependent processes”, Biol Reprod., 29, 173-179 109 Lim J.M., Okitsu O., Okuda K., Niwa K (1994), “Effect of fetal calf serum in medium on development of bovine oocytes matured and fertilized in vitro”, Theriogenology, 41, 1091-1098 110 Lima P.F., Oliveira M.A., Goncalves P.B., Montagner M.M., Reichenbach H.D., Weppert M., Neto C.C., Pina V.M., Santos M.H (2004), “Effects of retinol on the in vitro development of Bos indicus embryos to blastocysts in two different culture systems”, Reprod Domest Anim., 39 (5), 356-360 111 Liu Z and Foote R.H (1995), “Effects of CO2 concentrations and superoxide dimustase on the development of IVM/IVF bovine embryos in KSOM with 2,5mM Hepes”, Theriogenology, Vol 43, No 1, 268 112 Lonergan P Monaghan P., Rizos D., Boland M.P., Gordon I (1994), “Effect of follicle size on bovine oocyte quality and developmental competence following maturation, fertilization and culture in vitro”, Mol Reprod Dev., 37, 48-53 113 Lonergan P., Carolan C., Van Langendonckt A., Donnay I., Khatir H., Mermillod P (1996), “Role of Epidermal Growth Factor in bovine oocyte maturation and preimplantation embryo development”, Biol Reprod., 54, 1412-1421 114 Lonergan P., O’Kearney-Flynn M., Boland M.P (1999), “Effect of protein supplementation and presence of an antioxidant on the development of bovine zygotes in synthetic oviduct fluid medium under high or low oxygen tension”, Theriogenology, 51, 15651576 115 Lonergan P., Rizos D., Gutierrez-Adan A., Fair T., Boland M.P (2003), “Oocyte and embryo quality: effect of origin, culture conditions and gene expression patterns”, Reprod Domest Anim., 38(4), 259-267 116 Lu K.H., Cran D.G and G.E Seidel Jr (1999), “In vitro fertilization with flow-cytometrically-sorted bovine sperm”, Theriogenology, 52, 1393-1405 117 Lu K.H., Gordon I., Chen H.B., Gallagher M., McGovern H (1988), “Birth of twins after transfer of cattle embryos produced by in vitro techniques”, Vet Res., 122, 539-40 118 Lu K.H., Gordon I., Gallagher M., McGovern H (1987), “Pregnancy established in cattle by transfer of embryos derived from in vitro fertilization of oocytes matured in vitro”, Vet Rec., 121, 259-260 119 Madison V., Avery B., Greve T (1992), “Selection of immature bovine oocytes for developmental potential in vitro”, Anim Reprod Sci., 27, 1-11 120 Mastromonaco G.F., Semple E., Robert C., Rho G.J, Betts D.H., King W.A (2005), “Different culture media requirements for IVF and nuclear transfer bovine embryos”, Reprod Domest Anim., 39 (6), 462-467 121 Mermillod P., Wils C., Massip A and Dessy F (1992), “Collection of oocytes and production of blastocysts in vitro from individual, slaughtered cows”, Journal of Reproduction & Fertility, 92, 717723 122 Merton J.S and Mullart E (1999), “Comparison of the effect of two bovine in vitro culture system, TC199/FCS/BRL-co-culture and SOFaaBSA, on embryo production and pregnancy rate”, Theriogenology, Vol 51, No 1, 248 123 Merton J.S., J.A.W van Dillen, Hasler J.F and J.H.G den Das (1995), “Effect of co-culture media and CO2 concentration on embryo development in a bovine embryo in vitro production system”, Theriogenology, Vol 43, No 1, 280 124 Mizushima S and Fukai Y (2000), “Fertilizability and developmental capacity of bovine oocytes cultured individually in a chemically defined maturation medium”, Theriogenology, 55, 1431-1445 125 Moor R.M and Trouson A.O (1977), “Hormonal and follicular factors affecting maturation of sheep oocytes in vitro and their subsequent developmental capacity”, J Reprod Fert 49, 101-109 126 Mtango N.R., Varisanga M.D., Dong Y.J., Rajamahendran R., Suzuki T (2003), “Growth factors anh growth hormone enhance in vitro embryo production and post-thaw survival of vitrified bovine blastocytes”, Theriogenology, 59(5-6), 1393-1402 127 Myers M.W., Broussard J.R., Menezo Y., Prough S.G., Blackwell J., Godke R.A., Thibodeaux J.K (1994), “Established cell lines and their conditioned media support bovine embryo development during in vitro culture”, Human Reprod., 9, 1927-1931 128 Nagai T., Niwa K., Iritani A (1984), “Effect of sperm concentration during preincubation in a defined medium on fertilization in vitro of pig follicular oocytes”, J Reprod Fert., 70, 271-275 129 Nakagawa A., Martino A., Pollard J.W., Leibo S.P (1995), “Stage of nuclear maturation of bovine oocytes at insemination influences sperm penetration and zygote development”, Theriogenology, 43, 286 130 Newton C.R., Hansen P.J and Low B.G (1988), “Characterization of a high molecular weight Glycoprotein secreted the pre-implantation bovine conceptus”, Biology of Reproduction, 39, 553-560 131 Nguyen B.X., Ty L.V., Duc N.H., Uoc N.T (1997), “Vietnam: The degradation of bioresources and the attempts to apply biotechnology for their sustainable conservation and utilization”, Proceedings of the IUPAC Conference, Phuket, Thailand, 23-27 November 1997, 83 132 Nguyen B.X., Uoc N.T., Ty L.V., Duc N.H (1998), “Potential of genetic diversity and embryo biotechnology for improvement of meat-milk production under tropical conditions”, Proceedings of the 4th Asia-Pacific Conference on Agricultural Biotechnology, 1316 July 1998, Darwin, Australia, 292-294 133 Nguyen B.X., Uoc N.T., Ty L.V., Long D.D., Duc N.H (1996), “Embryo technology in Vietnam, contemporary results obtained in a national project”, Proceedings of the 2nd Asian Symposium on Animal Biotechnology November 11-14/1996, Nanjing, China, 2128 134 Nguyen B.X., Uoc N.T., Ty L.V., Long D.D., Duc N.H (1996), “Embryo transfer in cattle under tropical and nonstandardized breeding conditions of Viet Nam”, Proceedings of the Third Asia Pacific Conference on Agricultural Biotechnology: Issues and Choices 10-15 November 1996, Thailand, 22-26 135 Niwa K., Ohgoda O (1988), “Synergistic effect of caffeine and heparin on in vitro fertilization of cattle oocytes matured in culture”, Theriogenology, Vol 30, No 4, 733-741 136 Numabe T., Oikawa T., Kikuchi T., Horiuchi T (2000), “Birth weight and birth rate of heavy calves conceived by transfer in vitro or in vivo produced bovine embryos”, Anim Reprod Sci., 64, 13-20 137 Ohgoda O., Niwa K., Yuhara M., Takahashi S and Kanoya K (1988), “Variations in penetration rates in vitro of bovine follicular oocytes not reflect conception rates after artificial insemination using frozen semen from different bulls”, Theriogenology, Vol 29, No 6, 1375-1381 138 Oikawa T., Tanada N., Kikuchi T., Numabe T., Takenaka M., Horiuchi T (2005), “Evaluation of activation treatments for blastocyst production and birth of viable calves following bovine intracytoplasmic sperm injection”, Anim., Preprod Sci., 86 (3-4), 187-194 139 Oliphant G., Brackett B.G (1973), “Immunological assessment of surface changes of rabbit sperm undergoing capacitation”, Biol Reprod., 9, 404 140 Olson S.E and Seidel G.E (1995), “Vitamine E improves development of bovine embryos produced in vitro”, Theriogenology, Vol 43, No 1, 289 141 Otoi T., Yamamoto K., Koyama N., Tachikawa S., Suzuki T (1997), “Bovine oocyte diameter in relation to developmental competence”, Theriogenology, 48, 769-774 142 Oyamada T., Iwayama H., Fukui Y (2004), “Additional effect of epidermal growth factor during in vitro maturation for individual bovine oocytes using a chemically defined medium”, Zygote, 12 (2), 143-150 143 Paloma Duque, Enrique Gomez, Elena Diaz, Nieves Facal, Carlos Hidalgo, Carmen Diez (2003), “Use of two replacements of serum during bovine embryo culture in vitro”, Theriogenology, 59, 889899 144 Papis K., Avery B., Holm P, Callesen H and Greve T (1995), “The effect of vitrification solution, equilibration time, and direct dilution method on survivabilitty of equilibrated or vitrified bovine in vitro matured oocytes”, Theriogenology, Vol 43, No 1, 293 145 Parrish J J., Susko-Parrish J.L and First N.L (1985a), “Effect of heparine and chondroitin sulfate on the acrosome reaction and fertility of bovine sperm in vitro” Theriogenology, 24, 537-549 146 Parrish J.J., Susko-Parrish J., First N.L (1989), “Capacitation of bovine sperm by heparin: inhibitory effect of glucose and role of intracellular pH”, Biol Reprod., 41, 683 147 Parrish J.J., Susko-Parrish J., Winer M.A., First N.L (1989), “Capacitation of bovine sperm by heparin”, Biol Reprod., 38, 11711180 148 Parrish J.J., Susko-Parrish J.L., Leibfried-Rutledge M.L (1986b), “Bovine in vitro fertilization with frozen-thawed semen”, Theriogenology, 25, 591-600 149 Pavlok A.A., Lucas-Hahn, Niemann H (1992), “Fertilization and developmental competence of bovine oocytes derived from different categories of antral follicles”, Mol Reprod Dev., 31, 6367 150 Pieterse MC., Kappen KA., Kruip ThAM., Taverne MAM (1988), “Aspiration of bovine oocytes during transvaginal ultrasound scanning of the ovaries”, Theriogenology, 30, 751-761 151 Pinyopummintr T., Bavister B.D (1991), “In vitro matured/in vitro fertilized bovine oocytes can develop into morulae/blastocyst in chemically defined, protein-free media”, Biol Reprod., 45, 736746 152 Puglisi R., Balduzzi D., Galli A (2004), “In vitro sperm penetration speed and its relationship with in vivo bull fertility”, Reprod Domest Anim., 39 (6), 424-428 153 Renard J.P., Buisson F.M., Wintenberger-Torres S and Menezo Y (1976), In-vitro culture of cow embryos from Day and Day 7, Eggs transfer in cattle, 159-164 154 Richard F., Sirard M.A (1993), “The effect of co-culture of follicular components with bovine oocytes on meiotic resumption”, Biol Reprod., 48, 123 155 Sato E., Iritani A and Nishkawa Y (1977a), “Effects of energy sources on oocyte maturation in pig and cattle”, Jap J Zool Sci., 48, 333-335 156 Sato E., Iritani A and Nishkawa Y (1977b), “Factors involved in maturation of pig and cattle follicular oocytes cultured in vitro”, Jap J Anim Reprod., 23, 12-18 157 Schwartz M.A., Koehler J.K (1979), “Alteration in lectin binding to guinea pig spermatozoa accompanying in vitro capacitation and the acrosome reaction”, Biol., Reprod., 21, 1295 158 Screenan J (1968), “In vivo and in vitro culture of cattle eggs”, Proc 6th Int Congr Anim Reprod & A.I., Paris, 577-580 159 Seidel G.E., Larson L.L., Spilman C.H., Haln J and Foote R.H (1971), “Culture and transfer of calf ova”, J Dairy Sci., 54, 923926 160 Seidel G.E., Leipold S.D and Shawki H (1995), “Preparation of sperm for in vitro fertilization by swim-up or centrifugation through Percoll or BSA”, Theriogenology, Vol 43, No.1, 319 161 Shioya Y., Kuwayama M., Fukushima M., Iwasaki S and Hanada A (1988), “In vitro fertilization and cleavage capability of bovine follicular oocytes classified by cumulus cells and matured in vitro”, Theriogenology, Vol 13, No 3, 489-496 162 Shur B.D., Hall N.G (1982), “A role of mouse sperm surface galactosyltransferase in sperm binding to the egg zona pellucida”, J Cell Biol., 95, 574-579 163 Sirard M.A., Lambert R.D., Menard D.P and Bedoya M (1985), “Pregnancies after in vitro fertilization of cow follicular oocytes, their incubation in rabbit oviduct and their transfer to the cow uterus”, J Reprod Fert., 75, 551-556 164 Sirard M.A., Parrish J.J., Ware C.B., Liebfried-Rutledge M.L., First N.L (1988), “The culture of bovine oocytes to obtain developmentally competent embryos”, Biology of Reproduction, 39, 546-552 165 Sirisathien S., Hernandez-Foncesca H.J., Brackett B.G (2003), “Influences of epidermal growth factor and insulin-like growth factor-1 on bovine blastocyte development in vitro”, Anim Reprod Sci., 77(1-2), 21-32 166 Springfellow D.A., Wrathall A.E (1995), “Epidemiological implications of the production and transfer of IVF embryos”, Theriogenology, 43, 89-96 167 Staigmiller R.B and Moor R.M (1984), “Effect of follicle cells on the maturation and developmental competence of ovine oocytes matured outside the follicle”, Gamete Res., 9, 221-229 168 Takagi Y., Mori k., Takahashi T., Sugawara S., Masaki J (1992), “Differences in development of bovine oocytes recovered by aspiration or by mincing” J Anim Sci., 70, 1923-1927 169 Tervit H.R., Whittingham D.G., Rowson LEA (1972), “Successful culture in vitro of sheep and cattle ova”, J Reprod Fertil., 30, 493497 170 Thibault C., Levaseur M.C., Hunter R.H.F (1993), Reproduction in mammals and man Ed Ellipses, Paris 171 Thopsmon J.G.E., Simpson A.C., Pugh P.A., Donne P.E., Tervit H.R (1990), “Effect of oxygen concentration on in vitro development of preimplantation sheep and cattle embryos”, J Reprod Fertil., 573578 172 Trouson A.O., Willadsen S.M., Owson LEA (1977), “Fertilization and development capability of bovine follicular oocytes matured in vitro and in vivo and transferred to the oviducts of rabbit and cows”, J Reprod Fert., 51, 321-327 173 Van Soom A., Boerjan M., Ysebaert M.T., De Kruif A (1996), “Cell allocation to the inner cell mass and the trophectoderm in bovine embryos cultured in two different media”, Mol Reprod Dev., 45, 171-182 174 Wang Z.K., Wei P.H., Lei C., Wang D.Q., Yu D.Q and Kong M.Q (1995), “Developmental capacity and nuclear changes of bovine oocytes from ovaries stored for varied times and temperatures”, Theriogenology, 43, 347 175 Ward C.R., Storey B.T (1984), “Determination of the time course of capacitation in mouse spermatozoa using a chlortetracyclin fluorescence assay”, Dev Biol., 104, 287 176 Willadsen S.M and Polge C (1981), “Attempts to produce monozygotic quadruplets in cattle by blastomere seperation”, Vet Rec., 108, 211-213 177 Xu K.P., Greve T., Callesen H and Hyttel P (1987), “Pregnancy resulting from cattle oocytes matured and fertilized in vitro” Journal of Reproduction & Fertility, 81, 501-504 178 Yanagimachi R (1981), Mechanisms of fertilization in mammals In Fertilization and Embryonic Development in-vitro, Eds L Mastroianni & J.D Biggers Plenum Press, New York, 81-182 179 Yanagimachi R (1988), Mammalian fertilization In Physiology of Reproduction, Eds E Knobil & J.D Neill Raven Press New York Vol.1, 135-185 180 Younis A.I., Brackett B.G., Frayer-Hosken R.A (1989), “Influence of serum and hormones on bovine maturation and fertilization in vitro”, Gamete Res., 23, 189-201 Tài liệu tham khảo tiếng pháp 181.Colleau J.J., Heyman Y., Renard J.P (1998), “Les biotechnologies de la reproduction chez les bovines et leurs applications rÐelles ou potentielles en sÐlection”, Prod Anim INRA 210-226 182.Dauzer L., Thibault C., Wintenberger S (1954) La fÐcondation in vitro de l’oeuf de lapine C.R Acad Sci., Paris, 38, 1063-1064 183.Le Guienne B., Thibault C., Chupin D., Gerard M., Thibier M (1988), FÐcondation in vitro chez les mammifÌres domestiques Etat actuel et perspectives El & Ins., 225, 13 184.Palmer E., Magistrini m., Bezard J., Duchamp G (1990), “Gestation aprÌs fÐcondation in vitro dans l’espÌce Ðquine”, C R Acad Sci., 310, 71 185.Renault J (1992), Formulaire de probabilitÐs et de statistique Dunod Universite, Paris, 176p 186.Thibault C (1966), “La culture in vitro des oeuf de vache” Annls Biol Anim Biochim Biophys., 6, 159-164 187.Thibault C et Levasseur M.C (1991), La reproduction chez les mammifÌres et l’homme Ed Ellipses Paris Sơ đồ sản xuất phôi bò ống nghiệm Bò Bò đực Thu trứng PBS Tinh trùng đông lạnh Đánh giá chất lợng kính hiển vi soi (x120) Giải đông tinh trùng 37oC-1 Chän läc, rưa trøng DPBS Trøng chÊt l−ỵng A, B Xö lý, chän läc tinh trïng (läc percoll swim-up) Nuôi thành thục TCM199, FSH, LH, E, 5%CO2, 39oC Trøng thµnh thơc Tinh trïng chän läc Thơ tinh èng nghiƯm 5%CO2, 39oC Nu«i ph«i TCM199, SOF, KSOM, B2 5%CO2, 5%O2, 90%N2, 39oC Ph«i 2, 4, tÕ bào, phôi dâu, phôi nang Cấy phôi tơi Xác định giới tính Đông lạnh bảo quản (-1960C) Nhân dòng CNP ... khai thác nuôi thành thục trứng bò ống nghiệm 1.2 13 thụ tinh trứng bò ống nghiệm 1.2.1 Nguyên lý thụ tinh ống nghiệm giai đoạn trình thụ tinh 1.2.2 Phơng pháp thụ tinh trứng bò ống nghiệm 21... thành thục trứng bò vàng 63 3.2.3 ảnh hởng chất lợng trứng đến tỉ lệ thành thục trứng bò vàng 68 3.2.4 ảnh hởng mùa đến khả thành thục trứng bò vàng 68 3.2.5 So sánh khả thành thục trứng bò vàng... hởng giống bò đến kết khai thác trứng bò vàng bò lai Sind 3.2 57 Nuôi thành thục trứng bò ống nghiệm 3.2.1 ảnh hởng môi trờng nuôi đến khả thành thục trứng bò vàng 61 3.2.2 ảnh hởng thời gian nuôi