Nghiên cứu tách chiết và nâng cao hàm lượng hoạt chất 6 shogaol trong cao gừng (zingiber officinale), fucoidan trong cao rong nâu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Nguyễn Tường Vi NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT VÀ NÂNG CAO HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT 6-SHOGAOL TRONG CAO GỪNG (Zingiber officinale), FUCOIDAN TRONG CAO RONG NÂU (Sargassum mcclurei) VÀ APIGENIN TRONG CAO CẦN TÂY (Apium graveolens) LUẬN VĂN THẠC SĨ: HĨA HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Nguyễn Tường Vi NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT VÀ NÂNG CAO HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT 6-SHOGAOL TRONG CAO GỪNG (Zingiber officinale), FUCOIDAN TRONG CAO RONG NÂU (Sargassum mcclurei) VÀ APIGENIN TRONG CAO CẦN TÂY (Apium graveolens) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Nguyễn Cửu Khoa Thành phố Hồ Chí Minh – 04/2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan luận văn thạc sĩ ngành Hóa hữu với đề tài “Nghiên cứu tách chiết nâng cao hàm lượng hoạt chất [6]-shogaol cao gừng (Zingiber officinale), fucoidan cao rong nâu (Sargassum mcclurei) apigenin cao cần tây (Apium graveolens)” cơng trình khoa học tơi thực hướng dẫn GS TS Nguyễn Cửu Khoa Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Nếu có gian dối nào, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Học viên cao học Lê Nguyễn Tường Vi ii LỜI CẢM ƠN Luận văn Thạc sĩ thực hoàn thành Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam hướng dẫn GS TS Nguyễn Cửu Khoa Trong thời gian học tập chương trình đào tạo thạc sĩ Học viện Khoa học Công nghệ, nhận nhiều kiến thức bổ ích từ tập thể Giảng viên khoa Hóa học – Học viện Khoa học Công nghệ Những kiến thức giúp tơi phát triển kĩ tri thức, áp dụng vào đơn vị cơng tác hồn thành luận văn tốt nghiệp Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp Thạc sĩ, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến GS TS Nguyễn Cửu Khoa hết lòng hướng dẫn, định hướng tạo điều kiện cho thực luận văn cách tốt Bên cạnh đó, tơi xin gửi lời cảm ơn đến thầy thuộc khoa Hóa học ln sẵn sàng hỗ trợ kiến thức tạo điều kiện trang thiết bị, máy móc có liên quan đến luận văn Cảm ơn cán Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng trực tiếp hỗ trợ giải đáp thắc mắc suốt q trình tơi thưc Cảm ơn gia đình tập thể lớp cao học khóa 2018B ln động viên tơi thực luận văn tốt nghiệp Kính chúc quý thầy cô dồi sức khỏe thành công nghiệp khoa học Chúc bạn học viên khóa 2018B thành công Tôi xin chân thành cảm ơn! Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 06 tháng 06 năm 2021 Học viên cao học Lê Nguyễn Tường Vi iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt MeCN COSY CTPT brs d DEPT D2O EtOAc EtOH EtOH abs HMBC HPLC HSQC LOD LOQ m MeOH MeOD NMR ppm q s SD RSD iv SKĐ t TLC TMS UV-Vis δ H , δC v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh mục nguyên liệu hóa chất .18 Bảng 2.2 Danh mục thiết bị dụng cụ .20 Bảng 2.3 Dung dịch chuẩn khảo sát khoảng tuyến tính [6]-shogaol 30 Bảng 2.4 Dung dịch chuẩn khảo sát tính tuyến tính apigenin .33 Bảng 2.5 Dung dịch chuẩn khảo sát tính tuyến tính fucoidan .37 Bảng 3.2 Ảnh hưởng thời gian đến khả trích ly cao gừng 40 Bảng 3.3 Ảnh hưởng thể tích dung mơi đến khả trích ly cao gừng 41 Bảng 3.4 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả trích ly cao gừng 42 Bảng 3.5 Dữ liệu NMR hợp chất phân lập từ gừng so với TLTK 45 Bảng 3.6 Kết định lượng [6]-shogaol nguyên liệu gừng .46 Bảng 3.7 Kết định lượng [6]-shogaol mẫu gừng thị trường 47 Bảng 3.8 Kết định lượng [6]-shogaol mẫu sản phẩm chiết tách 47 Bảng 3.9 Kết tính tương thích hệ thống [6]-shogaol .49 Bảng 3.10 Độ đặc hiệu [6]-shogaol .50 Bảng 3.11 Đường chuẩn [6]-shogaol phương pháp HPLC 51 Bảng 3.12 Độ lặp lại quy trình định lượng [6]-shogaol HPLC 52 Bảng 3.13 Độ quy trình thẩm định [6]-shogaol 52 Bảng 3.14 Ảnh hưởng thời gian đến khả trích ly cao cần tây .54 Bảng 3.15 Ảnh hưởng thể tích dung mơi đến khả trích ly cao cần tây 55 Bảng 3.16 Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến khả trích ly cao cần tây 56 Bảng 3.17 Kết NMR hợp chất phân lập từ cần tây so với TLTK 59 Bảng 3.18 Kết định lượng apigenin nguyên liệu cần tây .61 Bảng 3.19 Kết định lượng apigenin cao cần tây thị trường 62 Bảng 3.20 Kết định lượng apigenin sản phẩm chiết tách 63 Bảng 3.21 Kết tính tương thích hệ thống apigenin 64 Bảng 3.22 Độ đặc hiệu quy trình thẩm định apigenin 65 Bảng 3.23 Độ lặp lại quy trình thẩm định apigenin HPLC 66 vi Bảng 3.24 Đường chuẩn apigenin phương pháp HPLC-PDA 66 Bảng 3.25 Độ quy trình thẩm định apigenin 68 Bảng 3.26 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả trích ly rong nâu 69 Bảng 3.27 Ảnh hưởng thời gian đến khả trích ly rong nâu 70 Bảng 3.28 Ảnh hưởng thể tích dung mơi đến khả trích ly rong nâu 71 Bảng 3.29 Kết định lượng fucoidan HPLC 75 Bảng 3.30 Kết định lượng fucoidan UV-Vis 76 Bảng 3.31 Tính tương thích hệ thống fucoidan phương pháp UV-Vis 76 Bảng 3.32 Độ đặc hiệu fucoidan dùng phương pháp UV-Vis .77 Bảng 3.33 Khoảng tuyến tính fucoidan sử dụng phương pháp UV-Vis 78 Bảng 3.34 Độ lặp lại quy trình định lượng fucoidan UV-Vis .79 Bảng 3.35 Độ phương pháp định lượng fucoidan UV-Vis 79 138 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.69: Độ [6]-shogaol ppm 100% lần 139 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.70: Độ [6]-shogaol ppm 100% lần 140 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.71: Độ [6]-shogaol ppm 100% lần 141 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.72: Độ [6]-shogaol ppm 120% lần 142 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.73: Độ [6]-shogaol ppm 120% lần Time 143 Component Name 6-shogaol Total Phụ lục 1.74: Độ [6]-shogaol ppm 120% lần Time 144 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG FUCOIDAN BẰNG UV-VIS Tính tương thích hệ thống Phụ lục 1.75: Tính tương thích hệ thống fucoidan Độ đặc hiệu 145 146 Phụ lục 1.76: Độ đặc hiệu fucoidan mẫu chuẩn mẫu thử 147 Độ lặp lại 148 149 Phụ lục 1.77: Bước sóng thẩm định độ lặp lại mẫu fucoidan 150 Phụ lục 1.78: Số liệu thẩm định độ lặp lại fucoidan 151 Khoảng tuyến tính Phụ lục 1.84: Đồ thị khoảng tuyến tính fucoidan nồng độ 2,4,5,6,8,10,15 ppm 152 Độ Phụ lục 1.85: Độ fucoidan phương pháp UV-Vis ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Nguyễn Tường Vi NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT VÀ NÂNG CAO HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT 6- SHOGAOL TRONG CAO GỪNG (Zingiber. .. ngành Hóa hữu với đề tài ? ?Nghiên cứu tách chiết nâng cao hàm lượng hoạt chất [6] -shogaol cao gừng (Zingiber officinale), fucoidan cao rong nâu (Sargassum mcclurei) apigenin cao cần tây (Apium graveolens)”... CHIẾT TÁCH, NÂNG HÀM LƯỢNG, ĐỊNH LƯỢNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG [6] -SHOGAOL TRONG CỦ GỪNG 2.5.1 Chiết tách [6] -shogaol từ củ gừng Gừng khô Zingiber officinale (1 kg) chiết EtOH 90% 60