Nghiên cứu ảnh hưởng của một số phương pháp sấy đến chất lượng chế phẩm trích ly nấm thượng hoàng

TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH KHOA HÓA HỌC ===  === ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Đề tài: NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP SẤY ĐẾN CHẤT LƢỢNG CHẾ PHẨM TRÍCH LY NẤM THƢỢNG HỒNG GV hƣớng dẫn: SV thực hiện: Lớp: ThS Nguyễn Tân Thành ThS Nguyễn Thị Huyền Trần Danh Trung - 1152043829 Hoàng Thị Tâm - 1152043903 52K - CNTP Nghệ An - 5/2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập -Tự -Hạnh phúc NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Trần Danh Trung - 1152043829 Hoàng Thị Tâm - 1152043903 Khóa : 52K - CNTP Ngành : Cơng nghệ thực phẩm Tên đề tài: Nghiên cứu ảnh hƣởng số phƣơng pháp sấy đến chất lƣợng chế phẩm trích ly nấm Thƣợng Hồng Nội dung nghiên cứu, thiết kế tốt nghiệp: Cán hƣớng dẫn : ThS Nguyễn Tân Thành Ngày giao nhiệm vụ đồ án : Ngày tháng năm 201 Ngày hoàn thành đồ án Ngày tháng năm 201 : Ngày tháng năm 201 Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ tên) Chủ nhiệm môn (Ký ghi rõ họ tên) Sinh viên hoàn thành nộp đồ án vào ngày i tháng năm 201 Ngƣời duyệt (Ký, ghi rõ họ tên) BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập -Tự -Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Trần Danh Trung - 1152043829 Hoàng Thị Tâm - 1152043903 Khóa : 52K - CNTP Ngành : Công nghệ thực phẩm Cán hƣớng dẫn : Cán duyệt ThS Nguyễn Tân Thành : Nội dung nghiên cứu, thiết kế Nhận xét cán hƣớng dẫn Ngày tháng năm 201 Cán hƣớng dẫn (Ký, ghi rõ họ tên) ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập -Tự -Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Trần Danh Trung - 1152043829 Hoàng Thị Tâm - 1152043903 Khóa : 52K - CNTP Ngành : Công nghệ thực phẩm Cán hƣớng dẫn : Cán duyệt ThS Nguyễn Tân Thành : Nội dung nghiên cứu, thiết kế Nhận xét cán hƣớng dẫn Ngày tháng năm 201 Cán duyệt (Ký, ghi rõ họ tên) iii LỜI CẢM ƠN Khóa luận đƣợc thực phịng thí nghiệm Hóa Thực phẩm Trung tâm Phân tích - Chuyển giao Công nghệ Môi trƣờng, Trƣờng Đại học Vinh Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn đến thầy giáo ThS Nguyễn Tân Thành, ThS Nguyễn Thị Huyền - Khoa Hóa, Trƣờng Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cơ, cán khoa Hố, trƣờng Đại học Vinh tạo điều kiện cho đƣợc học tập nghiên cứu môi trƣờng học tập khoa học, giúp cho tơi có kiến thức vững vàng trƣớc bƣớc vào đời Cuối xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè động viên, giúp đỡ tơi hồn thành đề tài Vinh, ngày 16 tháng năm 2016 Sinh viên thực Hoàng Thị Tâm - Trần Danh Trung 1.3 Tổng quan phƣơng pháp trắc quang xác định hàm lƣợng hợp chất phenolic28 1.3.1 Nguyên tắc i MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU iv MỞ ĐẦU .1 Lý chọn đề tài .1 Nhiệm vụ đồ án Đối tƣợng nghiên cứu .2 Phạm vi phƣơng pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nghiên cứu .2 CHƢƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Nấm Thƣợng Hoàng (phellinus nilgheriensis) .3 1.1.1 Khái quát nấm thƣợng hồng (phellinus nigheriensis) 1.1.2 Vị trí phân loại 1.1.3 Tình hình trồng nấm Thƣợng hồng Thế giới Việt Nam 1.1.4 Thành phần hóa học nấm Thƣợng hồng [36,5,13] .5 1.1.5 Thành phần hoạt tính giá trị dƣợc liệu nấm Thƣợng Hoàng .6 1.2 Tổng quan phƣơng pháp sấy 17 1.2.1 Giới thiệu chung sấy 17 1.2.2 Vật liệu ẩm 18 1.2.3 Phân loại phƣơng pháp sấy 20 1.2.4 Các hệ thống sấy 23 1.2.5 Giới thiệu hệ thống sấy chân không 25 1.2.6 Giới thiệu hệ thống sấy thăng hoa .26 1.3 Tổng quan phƣơng pháp trắc quang xác định hàm lƣợng hợp chất phenolic .28 1.3.1 Nguyễn tắc 28 1.3.2 Đánh giá kết phân tích 31 Chƣơng QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM SẤY NẤM THƢỢNG HOÀNG BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẤY THƢỜNG, CHÂN KHÔNG, VÀ ĐÔNG KHÔ .34 2.1 Một số thiết bị, dụng cụ, hóa chất sử dụng q trình nghiên cứu 34 2.1.1 Thiết bị, dụng cụ 34 ii 2.1.2 Hóa chất .34 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu .35 2.2.1 Quy trình thực nghiệm sấy nấm thƣợng hồng phƣơng pháp sấy thƣờng, chân không đông khô .35 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 3.1 Xác định tổng phenolic dịch chiết nấm Thƣợng Hoàng .39 3.2 Kết xác định hàm lƣợng phenolic trong dịch chiết nấm Thƣợng hoàng (phellinus nilgheriensis) phƣơng pháp trắc quang 44 KẾT LUẬN .53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 iii DANH MỤC SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU Trang Hình Hình 1.1: Nấm Thƣợng Hồng Hình 1.2: Khái quát cấu trúc chuyển hóa dạng vitamin D .7 Hình 1.3: công thức cấu tạo dạng Vitamin E Hình 1.4: Cơng thức cấu tạo loại Tocopherol Hình 1.5 Một số hợp chất phenolic nấm .12 Hình 1.6: Nấm Thƣợng Hồng ni trồng kỹ thuật 15 Hình 1.7: Nấm Thƣợng Hoàng sử dụng làm thuốc 16 Hình 3.1 Phổ UV -ViS mẫu chuẩn axit gallic etanol nồng độ (mg/ml): 39 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic ethanol (l = 1,0cm, λ = 765 nm) 40 Hình 3.3 Phổ UV -ViS mẫu chuẩn axit gallic nƣớc λ= 765 nm 42 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic nƣớc (l = 1,0cm, λ = 765 nm) 43 Bảng Bảng 1.1: Các vitamin quan trọng tên gọi chúng Bảng 1.2: Phân loại acid amin 10 Bảng 1.3 Phân loại hợp chất phenollic dựa số lƣợng nguyên tử cacbon phân tử 11 Bảng 3.1 Sự phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic ethanol (l = 1,0cm, λ = 765 nm) .40 Bảng 3.2 Xử lý thống kê đƣờng chuẩn tìm giá trị εa εb 40 Bảng 3.3 Sự phụ thuộc mật độ quang vào nồng độ axit gallic nƣớc (l= 1,0cm, λ = 765 nm) .42 Bảng 3.4 Xử lý thống kê đƣờng chuẩn tìm giá trị εa εb .43 Bảng 3.5 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn .45 Bảng 3.6 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn .47 Bảng 3.7 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn .49 Bảng 3.8 Hàm lƣợng phenolic gam cao 52 iv MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ngày nay, xã hội ngày phát triển, điều kiện sống nhu cầu ngƣời ngày cao, kéo theo bệnh tật hiểm nghèo xuất ngày nhiều làm tuổi thọ ngƣời giảm xuống nguyên nhân ngƣời mắc phải nhiều bệnh hiểm nghèo nhƣ ung thƣ, tim… Theo nghiên cứu nhà khoa học nƣớc Thƣợng Hoàng đƣợc xem nhƣ loại tiên dƣợc, chữa đƣợc bách bệnh, giúp ngƣời trƣờng thọ Chúng chứa tới 120 chất, bao gồm hợp chất hữu cơ, nguyên tố vi lƣợng vitamin Thƣợng Hồng có tác dụng đặc biệt triệu chứng suy giảm miễn dịch, căng thẳng thần kinh suy sụp tinh thần, giải độc kém, ngủ, triệu chứng hệ tim mạch, ăn khơng ngon, bệnh béo phì, da xấu nhiều nếp nhăn [17](Garcı'a-Lafuente et al, 2009; Guillamo'n et al, 2010; Puttaraju et al, 2006) Thƣợng Hồng có tác dụng việc ngăn ngừa bệnh AIDS làm chậm trình phát bệnh bệnh nhân mắc phải bệnh Họ sử dụng phƣơng pháp bào chế thông thƣờng ngâm rƣợu, cắt lát nấu lấy nƣớc, nghiền bột để uống, bào chế thành viên nang, viên hoàn thuốc tiêm Ở Nhật Bản, ngƣời ta sử dụng nấm nhƣ nguồn thực phẩm dƣợc phẩm hàng đầu, họ có sức khỏe tốt tuổi thọ cao Không dùng đơn dạng nấm tƣơi mà Nhật nấm đƣợc sản xuất thành nhiều dạng sản phẩm nhƣ: nƣớc tƣơng, bột nấm, nƣớc cháo, súp nấm, thực phẩm chức bổ, loại, thuốc, trà để điều trị số bệnh nhƣ: viêm phế quản mãn tính, bệnh tim mạch, viêm gan cấp mãn, viêm khớp, viêm phổi Việc điều trị loại thuốc, hóa chất trị liệu khan đắt tiền so mức thu nhập ngƣời Việt Nam (chƣa kể đến tác dụng phụ) Trong nấm Thƣợng Hồng với giá thành tƣơng đối rẻ có hiệu cao việc điều trị làm thuyên giảm số bệnh nhƣ: ung thƣ, đái đƣờng, vấn đề tim mạch, hô hấp(Hoạt động chống ung thư số basidiomycetes, đặc biệt Phellinus linteus Ikekawa et al Ung thư jpn J Res 1968; 59:155-157) Chính lý nhƣ mà đề xuất đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số phương pháp sấy đến chất lượng chế phẩm trích ly nấm Thượng Hồng” nhằm góp phần đa dạng chế phẩm thuốc từ nấm, hạn chế phần bệnh tật hiểm nghèo ngày tràn lan Nhiệm vụ đồ án Trong khóa luận này, chúng tơi có nhiệm vụ sau: - Giới thiệu nấm Thƣợng Hoàng, phƣơng pháp nghiên cứu - Khảo sát nguyên liệu, khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến trình chiết hoạt chất sinh học nhƣ: dung môi, nhiệt độ, thời gian, tỉ lệ ngun liệu/dung mơi - Tìm chế độ thích hợp cho q trình trích ly hoạt chất sinh học từ nấm Thƣợng Hoàng Đối tƣợng nghiên cứu Nấm Thƣợng Hồng (hay cịn gọi Hồng Sơn) tên loài gần chi Phellinus, họ Hymenochaetaceae… Đây loài nấm mọc nhiều năm lớp thụ tầng năm sau chồng lên lớp thụ tầng năm trƣớc Nấm thƣờng mọc vùng rừng sâu núi cao hiểm trở, khu rừng nguyên sinh, tuổi nấm có đến vài chục năm Phạm vi phƣơng pháp nghiên cứu Đề tài tập trung nghiên cứu vấn đề khả tách chiết hoạt chất sinh học từ nấm Thƣợng Hồng dựa vào việc tìm hiểu phân tích cơng trình nghiên cứu có nhà nghiên cứu ngồi nƣớc liên quan đến nấm Thƣợng Hoàng Ngoài ra, nghiên cứu dựa vào hiểu biết thị trƣờng nấm Thƣợng Hoàng Việt nam giới với tƣ liệu, tài liệu bổ ích nấm Thƣợng Hoàng sách báo, kiến thức học trƣờng Đại Học Vinh phƣơng tiện thông tin đại chúng Đề tài nghiên cứu sử dụng phƣơng pháp tổng hợp, thống kê, phân tích nhận xét từ số liệu liệu thu thập đƣợc Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nghiên cứu - Ý nghĩa khoa học: kế thừa phát triển kết nghiên cứu khoa học việc tách chiết hoạt chất nấm Thƣợng Hoàng - Ý nghĩa thực tiễn: việc nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số phương pháp sấy đến chất lượng chế phẩm trích ly nấm Thượng Hoàng” trƣớc hết giúp cho thân hiểu sâu sắc nấm nhỏ bé này, phần khác chúng tơi muốn mang kiến thức phổ biến cho ngƣời hiểu ngày nhận thức sâu sắc ý nghĩa kinh tế sức khỏe mà nấm Thƣợng Hoàng mang lại, nhƣ cách lựa chọn thơng số trích li thích hợp nhà sản xuất chế phẩm từ lồi nấm (∑xi)2 = 0,0004 m m i 1 i 1 A  m. xi2  ( xi ) = 0,00015 m m m m i 1 i 1 i 1 i 1 A1   yi ( xi2 )   xi  xi yi = 1,6656E-06 m m m i 1 i 1 i 1 A2  m. xi yi   xi  yi = 0,01341315 Từ suy ra: a A1 A = 0,011104; b  A2 A = 89,421 Đánh giá độ xác a, b : S y y  S a2  S y2 Sb2  S y2  Yi   k i x i y  Yi  = 3,53281E-05 m2 i = 2,59073E-05  Sa = 0,00508992 A m = A 1,177603667  Sb = 1,085174487 Độ xác a, b đƣợc tính theo biểu thức sau:  a  t p, k Sa = 0,016196124;  b  t p, k Sb = 3,453025217 Với : t(0,95, 4) = 3,182 Độ tin cậy a,b: a  a   a  a  t p , k Sa = 0.011104 ± 0.016196124 b  b   b  b  t p , k Sb = 89.421 ± 3.453025217 Vậy phƣơng trình đƣờng chuẩn xử lý là: y = (0,011104 ± 0,016196124) + (89.421 ± 3.453025217).x 3.2 Kết xác định hàm lƣợng phenolic trong dịch chiết nấm Thƣợng hoàng (phellinus nilgheriensis) phƣơng pháp trắc quang - Hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol + Đối với sấy thƣờng Quá trình định lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol phƣơng pháp UV - ViS đƣợc tiến hành nhƣ sau: 44 Sau tiến hành sấy bắng tủ sấy thƣờng đến khối lƣợng không đổi, đem cân ta đƣợc khối lƣợng cao = 5,4 mg; Ta hòa tan lại ethanol nồng độ 0,6 mg/ml tức hòa tan lại 0,006g cao 10 ml ethanol Sau đem phân tích đƣợc lƣu trữ 40C trƣớc sử dụng Phép đo: Lấy xác 1ml mẫu pha lỗng tiến hành nhƣ mô tả Tiến hành làm đồng thời mẫu đối chứng cách thay 1ml mẫu 1ml ethanol, ta thu đƣợc kết sau: Từ phƣơng trình đƣờng chuẩn tuân theo định luật Beer: ∆Ai =89,407 Ci -0,0038 Và kết thực nghiệm, tiến hành xử lý ta thu đƣợc kết nhƣ sau: Bảng 3.5 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn Lần đo Thể tích dung dịch phân tích (ml) ∆Ai Ci 1 0.30581 0.003462928 0.30668 0.003472659 0.30476 0.003451184 Để đánh giá độ xác phƣơng pháp, sử dụng hàm phân bố Student để đánh giá kết thu đƣợc xác định hàm lƣợng phenolic mẫu thật Chọn C =0.003462928; C ≈ X ; yi = xi -C n Ta có: Giá trị trung bình: X  C   i 1 - Phƣơng sai: S X  X n 1 i  yi = 0.003462257 n = 1.16E-09 - Độ lệch chuẩn trung bình: S X  S2 = 1.96325E-05 n Xác định độ tin cậy kết phân tích Ta có:   t p, k S X =8.44196E-05, Với t(0,95;2) = 4.3 Trong t p , k hàm phân bố student ứng với bậc tự k (k= n-1) xác suất p 45 - Khoảng tin cậy: X   a  X  0.003377837≤ Cphenolic ≤ 0.003546676 Nếu  nhỏ X gần tới giá trị thực - Hàm phân bố thực nghiệm ttn  X a SX = │0.003462257-0,0035│/1.96325E-05= 1.922486392 - So sánh ttn với t p , k ta thấy: ttn =1.922486392< t p , k = 4,3 X ≠a nguyên nhân gẫu nhiên với p = 0,95 - Sai số tƣơng đối q%  t S  100  p, k X 100 =2.438281285 % X X q% =2.438281285 % < 5% kết nghiên cứu đƣợc chấp nhận áp dụng kết nghiên cứu để xác định hàm lƣợng phenolic số đối tƣợng Từ bảng ta có mật độ quang trung bình mẫu là: ∆Ai = (0.3058+0.3067+0.3048)/3=0.30575 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1.: ∆Ai = (89.4073 ± 7.016824) Ci - (0.0038378 ± 0.032912) Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0,003358≤ Cphenolic ≤0,003552 (mg/ml) Hàm lƣợng phenolic gam cao đƣợc tính theo công thức: m phenolicmg / g   C phenolic.V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol lg cao là: 5,59666≤ mphenolic ≤ 5,92(mg/ml) (1) + Đối với sấy chân khơng Q trình định lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol phƣơng pháp UV – ViS đƣợc tiến hành nhƣ sau: 46 Sau tiến hành sấy máy sấy chân không đến khối lƣợng không đổi, đem cân ta đƣợc khối lƣợng cao = 5,4 mg; Ta hòa tan lại ethanol nồng độ 0,6 mg/ml tức hòa tan lại 0,006g cao 10 ml ethanol Sau đem phân tích đƣợc lƣu trữ 40C trƣớc sử dụng Phép đo: Lấy xác 1ml mẫu pha lỗng tiến hành nhƣ mô tả Tiến hành làm đồng thời mẫu đối chứng cách thay 1ml mẫu 1ml ethanol, ta thu đƣợc kết sau: Từ phƣơng trình đƣờng chuẩn tuân theo định luật Beer: ∆Ai =89,407 Ci -0,0038 Và kết thực nghi Bảng 3.6 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn Lần đo Thể tích dung dịch phân tích (ml) ∆Ai Ci 1 0.17082 0.001953091 0.17089 0.001953874 0.17129 0.001958348 Để đánh giá độ xác phƣơng pháp, sử dụng hàm phân bố Student để đánh giá kết thu đƣợc xác định hàm lƣợng phenolic mẫu thật Chọn C =0.001953874;C ≈ X ; yi = xi -C n Ta có: Giá trị trung bình: X  C   i 1 - Phƣơng sai: S X  X n 1 i  yi = 0.001955104 n = 8.04E-10 - Độ lệch chuẩn trung bình: S X  S2 = 1.63747E-05 n Xác định độ tin cậy kết phân tích Ta có:   t p, k S X =7.04112E-05;Với t(0,95;2) = 4.3 Trong t p , k hàm phân bố student ứng với bậc tự k (k= n-1) xác suất p - Khoảng tin cậy: X   a  X  47 0.001955104≤ Cphenolic ≤ 0.002025515 Nếu  nhỏ X gần tới giá trị thực - Hàm phân bố thực nghiệm ttn  X a SX = │0,00451896- 0,0045│/ 5,12647E-06 = 3.365203649 - So sánh ttn với t p , k ta thấy: ttn =3.365203649< t p , k = 4,3  X ≠a nguyên nhân ngẫu nhiên với p = 0,95 - Sai số tƣơng đối q%  t S  100  p, k X 100 =3.601403596% X X q% = 3.601403596% < 5% kết nghiên cứu đƣợc chấp nhận áp dụng kết nghiên cứu để xác định hà lƣợng phenolic số đối tƣợng Từ bảng ta có mật độ quang trung bình mẫu là: ∆Ai = (0.17082+0.17089+0.17129)/3=0.171 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1.: ∆Ai = (89.4073 ± 7.016824) Ci - (0.0038378 ± 0.032912) Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0.00172≤ Cphenolic ≤0.00215 (mg/ml) Hàm lƣợng phenolic gam cao đƣợc tính theo cơng thức: m phenolicmg / g   C phenolic.V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic 1gam cao là: 2.86666≤ mphenolic ≤ 3.58333(mg/ml) (1) Đối với sấy đơng khơ: Q trình định lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol phƣơng pháp UV – ViS đƣợc tiến hành nhƣ sau: 48 Sau tiến hành sấy máy sấy đông khô đến khối lƣợng không đổi, đem cân ta đƣợc khối lƣợng cao = 5,4 mg; Ta hòa tan lại ethanol nồng độ 0,6 mg/ml tức hòa tan lại 0,006g cao 10 ml ethanol Sau đem phân tích đƣợc lƣu trữ 40C trƣớc sử dụng Phép đo: Lấy xác 1ml mẫu pha lỗng tiến hành nhƣ mơ tả Tiến hành làm đồng thời mẫu đối chứng cách thay 1ml mẫu 1ml ethanol, ta thu đƣợc kết sau: Hình 3.5 Phổ UV -ViS d ch chiết nấm ethanol λ= 765 nm Từ phƣơng trình đƣờng chuẩn tuân theo định luật Beer: ∆Ai =89,407 Ci -0,0038 Và kết thực nghiệm, tiến hành xử lý ta thu đƣợc kết nhƣ sau: Bảng 3.7 Kết tính nồng độ phenolic dịch chiết nấm ethanol theo phƣơng trình đƣờng chuẩn Lần đo Thể tích dung dịch phân tích (ml) ∆Ai Ci 1 0.48523 0.005469706 0,48587 0.005476864 0,48524 0.005469818 Để đánh giá độ xác phƣơng pháp, sử dụng hàm phân bố Student để đánh giá kết thu đƣợc xác định hàm lƣợng phenolic mẫu thật Chọn C =0.005469818;C ≈ X ; yi = xi -C n Ta có: Giá trị trung bình: X  C   i 1 - Phƣơng sai: S X  X n 1 i  yi = 0.005472129 n = 1.68E-09 - Độ lệch chuẩn trung bình: S X  S2 = 2.36767E-05 n Xác định độ tin cậy kết phân tích 49 Ta có:   t p, k S X =0.00010181;Với t(0,95;2) = 4.3 Trong t p , k hàm phân bố student ứng với bậc tự k (k= n-1) xác suất p - Khoảng tin cậy: X   a  X  0.005370319≤ Cphenolic ≤ 0.005573939 Nếu  nhỏ X gần tới giá trị thực - Hàm phân bố thực nghiệm ttn  X a SX = │0.005472129- 0.0055│/2.36767E-05 = 1.177134 - So sánh ttn với t p , k ta thấy: ttn =1.177134 < t p , k = 4,3  X ≠a nguyên nhân ngẫu nhiên với p = 0,95 - Sai số tƣơng đối q%  t S  100  p, k X 100 =1.860516% X X q% =1.860516 %< 5% kết nghiên cứu đƣợc chấp nhận áp dụng kết nghiên cứu để xác định hàm lƣợng phenolic số đối tƣợng Từ bảng ta có mật độ quang trung bình mẫu là: ∆Ai = (0.48523+0.48587+0.48524)/3=0.48544 Mặt khác, từ phƣơng trình đƣờng chuẩn xây dựng mục 3.1.1.1.: ∆Ai = (89.4073 ± 7.016824) Ci - (0.0038378 ± 0.032912) Chúng tơi tính đƣợc nồng độ phenolic 1ml dung dịch đem phân tích: 0,00539≤ Cphenolic ≤ 0,00542(mg/ml) Hàm lƣợng phenolic gam cao đƣợc tính theo cơng thức: m phenolicmg / g   C phenolic.V m Trong đó: V: Là thể tích dung dịch mẫu ban đầu m: Là khối lƣợng mẫu Vậy hàm lƣợng phenolic dịch chiết nấm ethanol là: 50 8.98333≤ mphenolic ≤ 9,03333(mg/ml) (1) 51 Bảng 3.8 Hàm lƣợng phenolic gam cao Tên mẫu Mật độ quang trung bình (A) Nồng độ phenolic 1ml dd Hàm lượng phenolic đem phân tích(mg/ml) 1g cao (mg/g) 0,003358 -0,003552 5,59666 -5,92 Sấy thường 0.30575 Sấy chân 0.17100 0.00172 -0.00215 2.86666 - 3.58333 0.48544 0,00539 - 0,00542 8.98333 - 9,03333 không Sấy đông khô 52 KẾT LUẬN Căn vào nhiệm vụ đề tài, dựa kết nghiên cứu, rút kết luận sau: Đã xác định đƣợc số thành phần có nấm nhƣ: độ ẩm, hàm lƣợng cellulose, phenolic Hàm lƣợng phenolic mẫu nấm khác mẩu đƣợc sấy máy sấy khác (máy sấy thƣờng, chân không đông khô) Phƣơng pháp sấy máy sấy ảnh hƣởng trực tiếp tới tính chất cảm quan nhƣ hàm lƣợng phenolic mẩu nấm Thƣợng Hoàng Dựa vào kết thu đƣợc lụa chọn đƣợc phƣơng pháp sấy phù hợp(iữ đƣợc tính chất cảm quan nguyên liệu ban đầu số thành phần chất khô thu hồi đƣợc lớn nhất) phƣơng pháp sấy đông khô(tổng lƣợng hợp chất Phenolic lớn nhất) 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn, (2008), Kỹ thuật trồng chế biến nấm ăn nấm dược liệu, Hà Nội Hồ Viết Quý (2002) Cơ sở hóa học phân tích đại - tập II – Các phương pháp phân tích lý – hóa, NXBĐHSP Lê Ngọc Tú, Bùi Đức Hợi, Lƣu Duẩn, Ngô Hữu Hợp, Đặng Thị Thu, Nguyễn Trọng Cần (2001) Hóa thực Phẩm, NXBKHKT BS Nguyễn Bá Nhuận, (2007), Tasly Lingzhi300 với chiến chống ung thư Nguyễn Thị Minh Tú (2009), Quy trình tách chiết hoạt chất sinh học từ nấm linh chi (Ganoderma lucidum), Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 47(1) 45-53 Nguyễn Thị Chính (2005), Báo cáo tổng kết Khoa học Kỹ thuật “Phát triển công nghệ sản xuất nấm dược liệu phục vụ tăng cường sức khỏe” Đề tài hợp tác nghiên cứu khoa học nghị định thƣ phủ Việt Nam-Hàn Quốc Nguyễn Thƣợng Dong (2007), Nấm Linh chi, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Tuấn Anh, Trần Thu Hƣơng, Nguyễn Thị Phƣơng Hà (2007), Khảo sát điều kiện chiết hợp chất có hoạt tính sinh học nấm linh chi (Ganoderma lucidum Karst.) Tuyển tập cơng trình - Hội ngh khoa học cơng nghệ Hố học Hữu tồn quốc lần thứ 4, 284-288 Trần Thị Văn Thi, Nguyễn Thị Hoài, Lê Trung Hiếu, (2012), Chiết xuất, xác định hàm lƣợng khảo sát tác dụng dƣợc lý phân đoạn polysaccharid từ nấm linh chi nuôi trồng Thừa Thiên Huế, Tạp chí dƣợc học, số 443, 1822 10 Trần Tuấn Kha (2013), Nghiên cứu thành phần loài đặc điểm phân bố nấm làm dƣợc liệu mọc gỗ vƣờn Quốc gia Ba Vì, Tạp chí Nơng nghiệp phát triển nơng thơn, kỳ 1+2, 183-187 11 Trịnh Tam Kiệt (2011), Nấm lớn Việt Nam, tập, NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ Hà Nội 12 Trịnh Thanh Tâm, Nguyễn Quốc Cƣờng, Từ Phan Nam Phƣơng, Đống Thị Anh Đào, (2011), Nghiên cứu ảnh hƣởng điều kiện sấy đối lƣu đến thành 54 phần dinh dƣỡng bột nấm mèo Auricularia auricula-judae, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 49(6A), 176-182 13 Vũ Kim Thoa, Bùi Thị Hƣơng, Nguyễn Thùy Châu, (2001), Nghiên cứu công nghệ sản xuất nấm linh chi sinh khối, Kết nghiên cứu KH-CN Viện Công nghệ sau thu hoạch, 48-56 Tài liệu tiếng Anh 14 Ali Khoddami, Meredith Thomas H Roberts (2013) Review: Techniques for Analysis of Plant Phenolic Compounds, Molecules, 18, 2328-2375 15 L.M Cheung, Peter C.K Cheung * Mushroom extracts with antioxidant activity against lipid peroxidation Food Chemistry 89 (2005) 403–409 16 Zhu T., Kim S.H., Chen C.Y (2008), A medicinal mushroom: Phellinus linteus, Curr Med Chem.,15, 1330-1335 17 Rathee S., Rathee D., Rathee D., Vikash K., Rathee P (2012), Mushrooms as therapeutic agents, Rev Bras Farmacogn Braz J Pharmacogn., 22, 459574 18 Vojdani A., Erde J (2006), Regulatory T cells, a potent immunoregulatory target for CAM researchers: modulating allergic and infectious disease pathology (II), Evid Based Complement Alternat Med., 3, 209-215 19 Ramberg J.E, Nelson E.D., Sinnott R.A (2010) Immunomodulatory dietary polysacchari des: a systematic review of the literature, Nutr J 54-75 20 Donatini B (2010), Basics on mycotherapy: preliminary concepts on the medicinal use of mycelia, Phytotherapie, 8,191-197 21 Lull C., Wichers H.J., Savelkoul H.R.I (2005), Antiinflammatory and immunomodul ating properties of fungal metabolites, Media Inflam., 2, 6380 22 Lee I.K., Yun B.S (2007), Highly oxygenated and unsaturated metabolites providing a diversity of hispidin class antioxidants in the medicinal mushrooms Inonotus and Phellinus, Bioorg Med Chem.,15, 3309-14 23 Lee I.K., Yun B.S (2011), Styrylpyrone-class compounds from medicinal fungi Phellinus and Inonotus spp., and their medicinal importance, J Antibiot 64, 349-59 24 Jung J.Y., Lee I.K., Seok S.J., Lee H.J., Kim Y.H., Yun B.S (2008), Antioxidant polyphenols from the mycelia culture of the medicinal fungi 55 Inonotus xeranticus and Phellinus lintrus, J Appl Microbiol., 104, 18241832 25 Min B.S., Yun B.S., Lee H.K., Jung H.J., Jung H.A., Choi J.S (2006), Two novel furan derivatives from Phellinus linteus with anti-complement activity, Bioorg Med Chem Lett., 16, 3255-7 26 Lee Y.S., Kang Y.H., Jung J.Y., Kang I.J., Han S.N., Chung J.S (2008), Inhibitory constituents of aldose reductase in the fruiting body of Phellinus linteus, Biol Pharm Bull., 31, 765-8 27 Lee Y.S., Jang Y.H., Jung J.Y., Lee S., Ohuchi K., Shin K.H (2008) Protein glycation inhibitors from the fruiting body of Phellinus linteus Biol Pharm Bull., (1), 1968-72 28 Nagatsu A., Itoh S., Tanaka R., Kato S., Haruna M., Kishimoto, (2004), Identification of novel substituted fused aromatic compounds, meshimakobnol A and B, from natural Phellinus linteus fruit body, Tetrahedron Lett., 45, 5931-3 29 Koji ma K., Ohno T., Inoue M., Mizukami H., Nagatsu A.(2008) Phellifuropyranone A: a new furopyranone compound isolated from fruit bodies of wild Phellinus linteus Chem Pharm Bull., 56, 173-175 30 Zheng Y.B., Lu C.H., Shen Y.M (2012), New abscisic acid-related metabolites from Phellinus vaninii, J Asian Nat Prod Res., 14(7) 613-617 31 Song A.R., Sun X.L., Kong C., Zhao C., Qin D., Huang F., Yang S (2014), Discovery of a new sesquiterpenoid from Phellinus ignarius with antiviral activity against influenza virus, Arch Virol., 159(4) 753-760 32 Jeon T.I., Jung C.H., Cho J.Y., Park D.K., Moon J.H (2013), Identification of an anticancer compound against HT-29 cells from Phellinus linteus grown on germinated brown rice, Asian Pac J Trop Biomed., 3(10) 785-789 33 Chen Y.C., Chang H.Y., Deng J.S., Chen J.J., Huang S.S., Lin I.H., Kuo W.L., Chao W., Huang G.J (2013), Hispolon from Phellinus linteus induces G0/G1 cell cycle arrest and apoptosis in NB4 human leukaemia cells, Am J Chin Med., 41(6) 1439-1457 34 Kubo M., Liu Y., Ishida M., Harada K., Fukuyama Y (2014), A new spiroindene pigment from the medicinal fungus Phellinus ribis, Chem Pharm Bull., 62(1) 122-124 56 35 He J.B., Feng T., Zhang S., Dong Z.J., Li Z.H., Zhu H.J., Liu J.K (2014), Seven new drimane-type sesquiterpenoids from cultures of fungus Phellinus tuberculosus, Nat Prod Bioprospect., 4, 21-25 36 Huang S.C., Kuo P.C., Hwang T.L., Chan Y.Y., Chen C.H., Wu T.S.,(2013), Three novel sesquiterpenes from the mycelium of Phellinus linteus, Tetrahedron Letters, 54(26), 3332-3335 37 Hsieha P.W., Wub J.B., Wu C.H., Chemistry and biology of Phellinus linteus (2013), BioMedicine, 3, 106-113 38 Park, H.K., Ko, H.G., Kim, S.H., Park, W.M., 2004 “Molecular identification of Asian isolates of medicinal mushroom Hericium erinaceum by phylogenetic analysis of nuclear ITS rDNA” J Microbiol Biotechnology 14, pp 816–821 39 Sheng - Quan Huang, Jin-Wei Li, Zhou Wang, Hua - Xin Pan, Jiang - Xu Chen and Zheng - Xiang Ning (2010), “Optimization of Alkaline Extraction of Polysaccharides from Ganoderma lucidum and Their Effect on Immune Function in Mice”, Molecules 40 Wilfred Vermerris, Ralph Nicholson Phenolic Compound Biochemistry Springer Pages 1,2; 41 Yilin W., (2010), “Method for extracting Hericium erinaceus polysaccharide”, CN 103044563 A 42 Aishah M.S, Wan Rosli W.I, (2013), Effect of different drying techniques on the nutritional values of oyster mushroom (Pleurotus sajor-caju), Sains Malaysiana, 42(7), 937-941 43 Diego F Rojas Vahos, Paola A Zapata Ocampo, Ana M Palacio Barrera, Sandra P Ospina Alvarez, Lucía Atehortúa (2013), Basidiomycetes mushroom biotechnology for the development of functional products: The effect of drying processes on biological activity The open conference proceedings journal, 4, 93-98 44 Jo W S., Park S D., Park S C., Chang Z Q., Seo G S., Uhm J Y., Jung H.Y (2009), Changes in quality of Phellinus gilvus mushroom by different drying methods, Mycoscience 50: 70-73 45 Lee, M J., Seog, E J., Lee, J H (2007) Physicochemical properties of Chaga (Inonotus obliquus) mushroom powder as influenced by drying methods Journal of Food Science and Nutrition, 12, 40–45 46 Ma L S, Chen H X., Zhu W C., Wang Z S (2013), Effect of different drying methods on physicochemical properties and antioxidant activities of 57 polysaccharides extracted from mushroom Inonotus obliquus, Food Research International, 50(2) 633–640 47 Tulek Y, (2011), Drying kinetics of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) in a convective hot air dryer, Journal agriculture science techology 13, 655664 48 Michel Duubois, K.A Gilles, J.K.Hamilton, P.A Reber and Fred Smith, “Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances” 58 ... nghiên cứu khoa học việc tách chiết hoạt chất nấm Thƣợng Hoàng - Ý nghĩa thực tiễn: việc nghiên cứu đề tài ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng số phương pháp sấy đến chất lượng chế phẩm trích ly nấm Thượng. .. Hoàng Thị Tâm - 1152043903 Khóa : 52K - CNTP Ngành : Công nghệ thực phẩm Tên đề tài: Nghiên cứu ảnh hƣởng số phƣơng pháp sấy đến chất lƣợng chế phẩm trích ly nấm Thƣợng Hồng Nội dung nghiên cứu, ... thư số basidiomycetes, đặc biệt Phellinus linteus Ikekawa et al Ung thư jpn J Res 1968; 59:155-157) Chính lý nhƣ mà đề xuất đề tài ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng số phương pháp sấy đến chất lượng chế phẩm